綜合試卷第=PAGE1*2-11頁（共=NUMPAGES1*22頁） 綜合試卷第=PAGE1*22頁（共=NUMPAGES1*22頁）PAGE①姓名所在地區姓名所在地區身份證號密封線1.請首先在試卷的標封處填寫您的姓名，身份證號和所在地區名稱。2.請仔細閱讀各種題目的回答要求，在規定的位置填寫您的答案。3.不要在試卷上亂涂亂畫，不要在標封區內填寫無關內容。一、單選題1.生物制藥工程中的細胞培養通常采用哪種方式？

A.液體靜置培養

B.液體旋轉培養

C.固體表面培養

D.無菌空氣培養

2.在生物反應器中，微生物發酵與細胞培養的主要區別是什么？

A.培養對象不同

B.培養環境不同

C.培養目的不同

D.培養方法不同

3.生物制藥工程中，常用哪些方法進行蛋白質的純化？

A.離心分離

B.凝膠過濾

C.離子交換

D.以上都是

4.以下哪項不是生物制藥工程中常見的發酵工藝？

A.微生物發酵

B.動物細胞培養

C.植物細胞培養

D.酵母發酵

5.生物制藥工程中，發酵液的離心分離通常使用哪種設備？

A.滾筒式離心機

B.管式離心機

C.離心過濾機

D.水平式離心機

6.下列哪種因素對細胞培養的生長和產物表達影響最大？

A.培養基成分

B.溫度

C.氧氣供應

D.pH值

7.生物制藥工程中，常用的生物反應器類型有哪些？

A.塔式生物反應器

B.槳式生物反應器

C.渦輪式生物反應器

D.以上都是

8.以下哪項不是影響細胞培養產率的因素？

A.細胞密度

B.培養基濃度

C.光照強度

D.污染程度

答案及解題思路：

1.答案：B

解題思路：液體旋轉培養（又稱旋轉生物反應器）是生物制藥工程中常用的細胞培養方式，因為它能提供更好的氧氣供應和攪拌效果。

2.答案：A

解題思路：微生物發酵和細胞培養的主要區別在于培養對象，前者為微生物，后者為動物或植物細胞。

3.答案：D

解題思路：在生物制藥工程中，蛋白質的純化方法通常包括離心分離、凝膠過濾、離子交換等多種技術。

4.答案：D

解題思路：酵母發酵是生物制藥工程中常見的發酵工藝，而其他選項（微生物發酵、動物細胞培養、植物細胞培養）都是常見的發酵方式。

5.答案：A

解題思路：滾筒式離心機常用于生物制藥工程中的發酵液離心分離，因為它適用于處理較大體積的液體。

6.答案：A

解題思路：培養基成分對細胞培養的生長和產物表達有直接影響，因為它提供了細胞生長所需的營養物質。

7.答案：D

解題思路：塔式、槳式、渦輪式生物反應器都是生物制藥工程中常用的生物反應器類型，各有其優缺點。

8.答案：C

解題思路：光照強度通常不是影響細胞培養產率的因素，因為細胞培養過程大多在無光或低光照條件下進行。二、多選題1.生物制藥工程中，細胞培養的主要步驟包括哪些？

A.細胞復蘇

B.細胞接種

C.培養基制備與更換

D.細胞傳代

E.細胞鑒定與篩選

2.在生物反應器中，以下哪些因素會影響微生物的生長？

A.pH值

B.溫度

C.氧氣供應

D.液體流速

E.營養物質濃度

3.以下哪些方法可用于生物制藥工程中的蛋白質純化？

A.離心分離

B.凝膠過濾

C.柱層析

D.超濾

E.電泳

4.生物制藥工程中，發酵過程需要監控哪些參數？

A.發酵液的pH值

B.發酵液的溫度

C.微生物的活菌數

D.培養基的葡萄糖濃度

E.氧氣或二氧化碳的濃度

5.在生物制藥工程中，以下哪些設備用于細胞培養？

A.生物反應器

B.細胞培養瓶

C.液體循環系統

D.無菌操作臺

E.冷卻設備

6.以下哪些因素會影響細胞培養的產物表達？

A.細胞類型

B.培養基組成

C.溫度和pH值

D.氧氣供應

E.培養基的流速

7.以下哪些方法可用于生物制藥工程中的發酵工藝？

A.常壓發酵

B.壓力發酵

C.旋轉生物反應器

D.微生物流化床

E.靜態發酵

8.在生物制藥工程中，發酵液的分離純化過程有哪些步驟？

A.預處理

B.沉淀或離心

C.濾過

D.膜分離技術

E.結晶或沉淀

答案及解題思路：

1.答案：A,B,C,D,E

解題思路：細胞培養的主要步驟涵蓋了從復蘇到篩選的全過程，每個步驟都是保證細胞正常生長和產物的關鍵。

2.答案：A,B,C,D,E

解題思路：這些因素是生物反應器設計中的關鍵參數，直接影響到微生物的生長狀況和產物產量。

3.答案：A,B,C,D,E

解題思路：蛋白質純化通常需要結合多種方法，以達到高效純化的目的。

4.答案：A,B,C,D,E

解題思路：發酵過程中監控這些參數可以幫助調整培養條件，保證微生物的正常生長和產物的合成。

5.答案：A,B,C,D,E

解題思路：這些設備是細胞培養過程中的基本工具，各自承擔著不同的功能。

6.答案：A,B,C,D,E

解題思路：這些因素都會對細胞生長和產物表達產生直接影響，因此在培養過程中需要嚴格控制。

7.答案：A,B,C,D,E

解題思路：根據不同的需求和環境，選擇合適的發酵工藝方法，以優化發酵過程。

8.答案：A,B,C,D,E

解題思路：分離純化過程通常需要經過多個步驟，以保證最終產物的質量和產量。三、判斷題1.生物制藥工程中，細胞培養是蛋白質藥物生產的關鍵步驟。（√）

解題思路：細胞培養是生物制藥工程中用于生產蛋白質藥物的基礎，它提供了蛋白質生物合成的場所和條件，是蛋白質藥物生產的核心步驟。

2.在生物反應器中，微生物發酵與細胞培養可以同時進行。（×）

解題思路：微生物發酵和細胞培養通常涉及不同的生物過程和需求，它們通常不能在同一個生物反應器中同時進行。

3.離心分離是生物制藥工程中常用的蛋白質純化方法。（√）

解題思路：離心分離是一種常用的蛋白質純化技術，通過離心力將不同密度的物質分離開來，廣泛應用于生物制藥工程中。

4.培養基成分對細胞培養的生長和產物表達有重要影響。（√）

解題思路：培養基成分直接影響細胞的生長環境和代謝過程，因此對細胞生長和蛋白質產物表達有顯著影響。

5.生物制藥工程中，發酵過程不需要監控任何參數。（×）

解題思路：發酵過程需要嚴格監控多種參數，如pH值、溫度、溶解氧等，以保證發酵效率和產品質量。

6.生物制藥工程中，發酵液的分離純化過程包括過濾、離心和層析等步驟。（√）

解題思路：發酵液的分離純化過程通常包括多個步驟，過濾、離心和層析是其中的常用技術。

7.在生物反應器中，微生物發酵與細胞培養可以相互影響。（√）

解題思路：生物反應器內的微生物發酵和細胞培養過程可能會相互影響，如代謝產物的積累、pH值變化等。

8.生物制藥工程中，細胞培養的產物表達可以通過優化培養基成分來提高。（√）

解題思路：通過優化培養基成分，可以調節細胞的生長和代謝，從而提高蛋白質產物的表達水平。四、填空題1.生物制藥工程中，細胞培養的主要步驟包括：細胞復蘇、細胞傳代、細胞篩選、細胞擴增。

2.在生物反應器中，微生物發酵的主要參數有：溫度、pH值、溶氧量。

3.生物制藥工程中，常用的蛋白質純化方法有：離子交換層析、親和層析、凝膠過濾、鹽析。

4.生物制藥工程中，發酵液的分離純化過程包括：粗分離、精分離、濃縮。

5.影響細胞培養產率的因素有：營養條件、氧氣供應、無菌操作。

答案及解題思路：

1.答案：細胞復蘇、細胞傳代、細胞篩選、細胞擴增。

解題思路：細胞培養是一個復雜的過程，首先需要對細胞進行復蘇，使其重新進入活力狀態。隨后通過傳代培養保持細胞的穩定性，篩選出所需的細胞株，最后進行細胞擴增以獲得足夠的細胞量。

2.答案：溫度、pH值、溶氧量。

解題思路：微生物發酵過程中，溫度、pH值和溶氧量是三個關鍵參數，它們直接影響微生物的生長和代謝。溫度過高或過低都會影響微生物的活性，pH值的波動會破壞微生物的生長環境，而溶氧量不足則會影響有氧代謝。

3.答案：離子交換層析、親和層析、凝膠過濾、鹽析。

解題思路：蛋白質純化方法多種多樣，離子交換層析利用蛋白質的帶電性質進行分離；親和層析利用蛋白質與特定配體的特異性相互作用；凝膠過濾則基于蛋白質分子大小的差異；鹽析則是利用蛋白質在不同鹽濃度下的溶解度差異進行分離。

4.答案：粗分離、精分離、濃縮。

解題思路：發酵液的分離純化是一個連續的過程，首先通過粗分離去除發酵液中的大部分雜質，然后進行精分離提高純度，最后通過濃縮去除溶劑，獲取高純度的產品。

5.答案：營養條件、氧氣供應、無菌操作。

解題思路：細胞培養產率受多種因素影響，營養條件是細胞生長的基礎，氧氣供應保證細胞正常代謝，而無菌操作是防止污染的關鍵。任何的不足都會影響細胞培養的產率。五、簡答題1.簡述生物制藥工程中細胞培養的主要步驟。

主要步驟包括：

細胞選擇與制備：選擇合適的細胞株，并進行細胞活化、計數、傳代等準備工作。

培養基準備：根據細胞需求配置合適的培養基，包括基礎培養基和添加必需的生長因子、維生素等。

細胞接種：將活化后的細胞接種到細胞培養容器中。

培養條件控制：維持適宜的溫度、pH、氣體環境（如氧氣、二氧化碳）。

細胞生長與觀察：定期觀察細胞生長情況，記錄生長曲線。

收獲與處理：當細胞生長到一定密度時，進行收獲和后續處理。

2.生物制藥工程中，發酵過程需要監控哪些參數？

需要監控的參數包括：

溫度：維持發酵過程中的溫度在適宜范圍。

pH值：監控并調整發酵液的pH值，以保持酶活性和細胞生長環境的穩定。

溶解氧（DO）：保證細胞有足夠的氧氣進行代謝活動。

營養物質濃度：監控并補充必要的營養物質，如葡萄糖、氨基酸等。

代謝產物濃度：監控可能產生的代謝產物，以判斷發酵過程是否正常。

菌體濃度：通過光學密度（OD）等方法監測菌體生長情況。

3.簡述生物制藥工程中蛋白質純化的常用方法。

常用方法包括：

離子交換層析：利用蛋白質與離子交換樹脂之間的電荷差異進行分離。

凝膠過濾層析：根據蛋白質分子量大小進行分離。

親和層析：利用蛋白質與其特異性配體的相互作用進行分離。

反滲透和超濾：通過半透膜分離蛋白質和其他分子。

電泳：根據蛋白質的電荷和分子量差異進行分離。

4.生物制藥工程中，發酵液的分離純化過程有哪些步驟？

分離純化過程包括以下步驟：

粗分離：通過簡單的物理方法如離心、沉淀等去除不溶性雜質。

初步純化：使用離子交換、凝膠過濾等層析技術進行初步純化。

進一步純化：通過親和層析等更精細的層析技術提高純度。

最終純化：可能需要使用多種純化技術相結合，以達到高純度要求。

質控分析：對純化后的蛋白質進行質控分析，保證其純度和活性。

5.影響細胞培養產率的因素有哪些？

影響細胞培養產率的因素包括：

培養基組成：營養物質的平衡、pH值、氧氣供應等。

細胞株特性：不同細胞株的生長速度和產率不同。

培養條件：溫度、pH值、氣體環境等。

生物反應器設計：如攪拌速度、氣體分布等。

污染控制：防止細菌、真菌和病毒等微生物的污染。

操作技能：實驗人員的操作技巧和經驗也會影響產率。

答案及解題思路：

答案解題思路內容。

（由于篇幅限制，此處僅提供解題思路概述，具體答案需根據實際情況填寫。）

1.解題思路：根據細胞培養的基本流程，分步驟描述每個階段的主要操作。

2.解題思路：列舉發酵過程中關鍵參數，并簡述其重要性。

3.解題思路：介紹蛋白質純化中常用的層析技術，并說明其原理。

4.解題思路：描述發酵液分離純化的流程，包括粗分離、初步純化、進一步純化和最終純化等步驟。

5.解題思路：分析影響細胞培養產率的多種因素，包括培養基、細胞特性、培養條件等。六、論述題1.論述生物制藥工程中細胞培養對蛋白質藥物生產的重要性。

解答：

在生物制藥工程中，細胞培養是蛋白質藥物生產的關鍵步驟之一。細胞培養技術能夠模擬生物體內細胞生長的環境，使得蛋白質藥物的生產過程更加高效和可控。以下為細胞培養對蛋白質藥物生產的重要性：

（1）提供生物活性蛋白質：細胞培養能夠使重組蛋白在生物體內自然環境中合成，保證蛋白質的生物活性。

（2）提高生產效率：細胞培養技術可以實現大規模、高密度培養，從而提高蛋白質藥物的生產效率。

（3）降低生產成本：通過優化細胞培養條件，減少生產過程中的能耗和原材料消耗，降低生產成本。

（4）保證產品質量：細胞培養過程中可以嚴格監控細胞生長狀態，保證蛋白質藥物的純度和質量。

2.論述生物制藥工程中發酵過程參數監控的意義。

解答：

發酵過程參數監控在生物制藥工程中具有重要意義，以下為發酵過程參數監控的幾個方面：

（1）保證發酵過程穩定：通過實時監控發酵過程參數，及時發覺并處理異常情況，保證發酵過程的穩定。

（2）優化發酵條件：通過分析參數變化，優化發酵條件，提高發酵效率和生產質量。

（3）預防發酵失敗：實時監控參數變化，可以提前發覺潛在問題，避免發酵失敗。

（4）提高生產安全性：發酵過程中可能存在危險物質，參數監控有助于保證生產安全。

3.論述生物制藥工程中蛋白質純化方法的優缺點。

解答：

生物制藥工程中，蛋白質純化方法主要包括以下幾種：離子交換層析、凝膠過濾、親和層析、液液萃取等。這些方法的優缺點：

（1）離子交換層析：優點：操作簡單、成本低；缺點：對蛋白質結構影響較大，可能引起蛋白質變性。

（2）凝膠過濾：優點：分辨率高、分離效果良好；缺點：對蛋白質分子量選擇性較強，可能存在分離不徹底的情況。

（3）親和層析：優點：分離效果好、回收率高；缺點：成本較高、操作復雜。

（4）液液萃取：優點：操作簡單、成本低；缺點：分離效果受溶劑