ICS11.220DB21B41遼寧省地方標準DB21/T3255—2020非洲豬瘟感染養豬場恢復飼養消毒及檢測技術規范DisinfectionanddetectionforASFVpollutedpigfarmresumeproduction遼寧省市場監督管理局發布DB21/T3255—2020目次前1言..............................................................................II范圍................................................................................1術語和定義..........................................................................1儀器和器材..........................................................................1藥品................................................................................1操作流程............................................................................2消毒注意事項........................................................................4陽性結果處置........................................................................4234567IDB21/T3255—2020前言本標準按照GB/T1.1—2009給出的規則起草。本標準由遼寧省農業農村廳提出并歸口管理。本標準起草單位：遼寧省農業發展服務中心、沈陽偉嘉牧業技術有限公司。本標準主要起草人：楊作豐、趙寶凱、郭洪軍、李洪宇、高志峰、鄂祿祥、金暉、王方、于學武、龐學敏、尚續增、范治斌、權根花、李巍、陳寧、左士峰、趙紅秋。本標準發布實施后，任何單位和個人如有問題和意見建議，均可以通過來電和來函等方式進行反饋，我們將及時答復并認真處理，根據實際情況依法進行評估及復審。歸口管理部門通訊地址：遼寧省農業農村廳（沈陽市和平區太原北街2號），聯系電話標準起草單位通訊地址：遼寧省動物及產品檢疫中心（沈陽市沈河區萬柳塘路105號甲），聯系電話IIDB21/T3255—2020非洲豬瘟感染養豬場恢復飼養消毒及檢測技術規范1范圍本標準規定了非洲豬瘟感染豬場清群后，恢復生產前消毒及檢測的程序及方法要求。本標準適用于非洲豬瘟感染豬場清群后，恢復生產前的消毒及檢測。2術語和定義下列術語和定義適用于本標準。2.1非洲豬瘟（AfricanSwineFever，ASF）是由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的，感染家豬和野豬的一種急性、熱性、高度接觸性動物傳染病，以高熱、網狀內皮系統出血和高死亡率為特征。2.2恢復飼養恢復飼養（簡稱復養）是指豬場發生疫情并清群后，經過大量細致縝密的準備工作，包括：發病原因分析、豬場的全面清洗消毒和評估、硬件升級改造、一定時間的空欄、操作流程的優化、人員上崗前培訓考核、進豬前的疫病監測后，再次引進生豬的過程。相對光單位（relativelightunit,RLU）發光儀的原始數據通常以相對光單位表示，本身不是一個科學定義的單位，僅是一個樣品中光產生量的相對測試值。在快速潔凈檢測中，RLU數值反映的是微生物、食物殘留物和污物等中總的ATP濃度。實時熒光定量核酸擴增檢測系統（Real-timeQuantitativePCRDetectingSystem，qPCR）實時定量PCR儀加實時熒光定量試劑，構成qPCR實時熒光定量核酸擴增檢測系統。3需使用的儀器和器材包括：清洗機、臭氧發生器、彌霧機、紫外燈、微生物快速檢測儀（ATP熒光檢測儀）、冰箱、電子秤、鋼絲球、防護服、棉簽、離心管（5mL離心管、2mL離心管）等。4需使用的消毒藥品包括：火堿石灰乳（20%石灰乳和2%火堿混懸液的配置方法：1公斤燒堿，10公斤生石灰，加入50公斤水，拌勻后紗網過濾。石灰乳必須即配即用，過久放置會變質導致失去殺菌消毒作用）、堿性泡沫清洗劑、濃戊二醛溶液、過硫酸氫鉀復合粉、甲醛溶液、高錳酸鉀、酒精、生理鹽水等。1DB21/T3255—20205操作流程5.1疫情復盤和風險評估針對擬恢復飼養的ASF污染場，在無害化清群后，需進行疫情復盤和風險評估，對存在的風險點進行針對性整改，符合復養條件的飼養場方可開展檢測和消毒工作。5.2第一次檢測符合復養條件的豬場，對豬舍、場區、庫房、出豬臺、儲糞池、排污系統等區域分別采樣，每個區域使用棉拭子隨機采樣5份，使用農業農村部推薦的試劑和方法進行ASF病原檢測，全面排查豬場內病原情況，評估豬場內ASFV存在的風險點，對高風險點做重點清洗消毒。5.3第一次全場消毒按照豬舍、生產區、生活區、場區外圍的順序（以后消毒同此順序），將火堿石灰乳（2%火堿溶液+20%石灰乳）過濾后，每間隔30分鐘噴灑一遍，全場噴灑三遍，對豬場進行首次全場消毒，以降低場區的ASFV載量。5.4清理首次全場消毒后24小時，豬場進行清理工作。將豬舍、出豬臺、糞溝和糞尿池、豬舍外周及場內所有可視垃圾與廢棄物移出，包括豬場的殘留糞污、墊料、木制品、飼料及殘渣等，并做銷毀處理；按照從高到低、從內到外的順序，盡可能拆卸圈舍內設備，如隔離欄、產床、地板、吊頂的頂棚、風機、空氣循環系統、燈罩等，將拆卸的設備移除圈舍外消毒；銷毀可能污染的工作衣物、工具、紙張、藥品等不易消毒的物資。將豬舍內所有可拆卸物品拆卸后清洗，包括漏縫地板、飲水桶、飲水嘴等。按照由內到外，從高向低的順序使用高壓清洗機以45度斜角清洗生豬飼養圈舍、出豬臺、飼料存放間、場區道路等生產區域，確保沖洗無死角，并做好電箱、照明系統、電源開關的防水。清洗標準：要求沖洗后擋板上無糞液及其他污染物，產床上無糞便、料塊，漏糞地板縫隙無散料和糞液，料槽死角無剩料殘渣，糞溝內無糞便，料管及百葉無灰塵。若沖洗時有難以清除的污漬或銹漬，可用洗滌劑浸泡溶解后沖刷干凈。沖洗后，按照5.4的要求清理沖下的糞便和污物。清洗完成后，如檢查不合格，立即重新清洗，直至清洗合格。清洗檢查合格后，使用堿性泡沫清洗劑由內向外對豬舍進行泡沫清洗，要求達到泡沫全覆蓋，泡沫均勻，浸泡30分鐘后，使用高壓水槍將泡沫徹底清洗掉。將拆卸后的漏縫地板正反面均進行清水及泡沫清洗。糞溝內糞便完全清理干凈。干燥后漏縫地板正反面、糞溝、硬化地面、地面至實體墻面1米高左右處均噴灑三遍2%火堿溶液，每間隔30分鐘噴灑一遍。拆卸的料管、飲水嘴、飲水器、生產器具等放置于2%火堿溶液中浸泡消毒24小時。生產區、出豬臺、儲糞池、蓄水池等區域亦采用2%火堿溶液堿化消毒。5.7濃戊二醛酸化消毒2DB21/T3255—2020火堿消毒密閉24小時后，使用清水沖洗豬舍，徹底干燥，再使用1:200倍稀釋的20%濃戊二醛溶液，對墻面、地面等進行均勻噴灑消毒，要求每平方米至少使用0.5L消毒液，以掛起水珠為標準。5.8第二次檢測豬舍干燥后，使用微生物快速檢測儀（ATP熒光檢測儀）進行多點采樣檢測，評估清洗消毒質量，根據微生物快速檢測儀使用說明，微生物檢測合格標準：RLU＜100。不合格則立即重新清洗消毒。5.9甲醛熏蒸消毒檢測合格后，高壓水槍沖洗豬舍，徹底干燥后，使用高錳酸鉀和甲醛溶液進行熏蒸消毒，其中高錳酸鉀和甲醛溶液每立方米的用量分別為6.25g和12.5mL，密閉72小時。5.10設備消毒豬舍中不能使用清洗機進行清洗消毒的儀器和設備，對其用1:200過硫酸氫鉀復合粉溶液浸泡的新抹布擦拭表面和內部，每個設備擦拭三遍，每間隔30分鐘擦拭一遍。5.11水線、水簾消毒將消毒后的飲水、加藥水桶中放滿水，配制1:200過硫酸氫鉀復合粉溶液，消毒后的飲水嘴重新裝好，打開最遠端的飲水器，使消毒液流經所有管道，浸泡2小時后，每個水嘴至少按壓1分鐘進行消毒，直至桶中水全部放凈。使用清水沖洗水簾蓄水池，將水移出后，再向蓄水池中加水，配制1:200過硫酸氫鉀復合粉溶液，開啟水簾循環12小時，對水簾消毒。對人員房舍及庫房等地使用1:200過硫酸氫鉀復合粉溶液擦拭消毒，之后使用臭氧熏蒸消毒，根據臭氧機產生臭氧的能力、房舍空間、臭氧濃度達到100mg/立方米需要的時間設定熏蒸時間（分鐘），熏蒸時間=30+（空間X100）/臭氧發生器產臭氧能力。臭氧消毒后使用彌霧機應用1:200過硫酸氫鉀復合粉溶液熏蒸，要求達到30ml/立方米，密閉1小時后通風。消毒工作結束后，對豬舍、出豬臺、儲糞池等全部生產區及生活區外圍噴灑火堿石灰乳（2%火堿溶液+20%石灰乳），非硬化路面鋪撒生石灰，要求全覆蓋，厚度適宜。第二次全場消毒工作結束后，對豬舍、場區、人員房舍、倉庫、出豬臺、儲糞池周圍等區域采樣，每個區域使用棉拭子隨機采樣至少5份，重點采集圈舍內外地面、墻面、飲水管道、食槽、水嘴、欄桿、風機等高風險場所樣品，使用農業農村部推薦的試劑和方法進行ASF病原檢測。空欄檢測合格后，引進經檢測合格的哨兵豬，依據飼養場的規模，結合實際，合理選擇設置投放數量。引進后，將哨兵豬分別放置于隔離舍、配懷舍、產房、保育舍、育肥舍，保證每個區域每個欄舍都有哨兵豬，以進行飼養觀察，為復養做準備。3DB21/T3255—2020哨兵豬飼養45天后，觀察臨床癥狀，并進行非洲豬瘟病原學檢測。無臨床癥狀且病原檢測為陰性的豬場，可以考慮進行復養。6消毒注意事項6.1消毒時，做好個人防護，佩戴防毒面具，手套，口罩，護目鏡等。6.2使用實時熒光定量qPCR檢測時，若環境樣品中檢測到病毒核酸，則提示該環境存在生物安全風