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TechnicalcodeofpracticeforcryopreservationofAlpiniaofficinarumHanceseeds中華中醫(yī)藥學會發(fā)布I 1 1 1 1 1 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 4 5——T/CACM1326.1藥用植物頑拗性種子超低溫保存技術(shù)——T/CACM1326.4益智種子超低溫保存技。1高良姜種子超低溫保存技術(shù)規(guī)程凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）GB/T3543.6農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程），為姜科（Zingiberaceae）山姜屬（Alpiniaroxb.）多年生草本植止痛消食功能，是“十大南藥”之一。為《中華人民共和國高良姜的繁殖材料為完整種子，貯藏習性判斷為頑拗性種子。種子不規(guī)則扁圓形，表面種子超低溫保存seedofcryopreser4種子采收及選擇4.1種子采收24.2種子選擇挑選飽滿、均勻、健康的種子，置于4℃冰箱中保存?zhèn)?.1.1檢測法測定高良姜種子生活力。待測種子在30℃~35℃溫水中浸種2h，隨后取吸脹種子20粒，整5.1.2鑒定及要求在光下用放大鏡對染色結(jié)果進行觀察鑒定。凡種胚周圍出現(xiàn)黃色暈圈的種子為有活力的種子，否5.1.3計算用尼龍網(wǎng)袋包裹高良姜種子，置于盛有變色硅膠的干燥器內(nèi)，硅膠與種子的體積比為60：1，室3W0——種子含水量，用百分數(shù)表示(%);高良姜種子超低溫保存的冷凍方式為玻璃化冷凍法，即將裝有種子的1mL凍存管min，換上預(yù)冷新鮮的PVS2后迅速投入液氮中進行超低溫保存。液氮中至少凍存24h后，取出2個凍存取出1管解凍后的種子，按照5.1活力檢測方法，進行超低溫保存后的初始生活力檢測。當種將剩下1管解凍后的高良姜種子，播種到帶有無菌濾紙的帶蓋發(fā)芽盒中，溫度28℃~30℃,4精密稱取BTB0.1g，溶解于煮沸過的100mL純水中，然后用濾紙去殘渣。濾液若呈黃色，可加數(shù)滴氫氧化鈉溶液，使之變?yōu)樗{色或藍綠色，置于棕色瓶中長期加入杯中，加熱并不斷攪拌使之完全溶解。待溶液稍稍冷卻即可趁熱倒入9cm培養(yǎng)皿中，使之成一A.3玻璃化溶液（PVS2）的配制及保存方法5Louis:MissouriBotanicalGa

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