廣西地方標準《多肉植物玉露組織培養技術規程》（征求意見稿）編制說明一、任務來源及起草單位根據廣西壯族自治區質量技術監督局《關于下達2017年第四批廣西地方標準制定（修訂）項目計劃的通知》，我單位申報的《多肉植物玉露組織培養技術規程》獲立項，立項編號：2017-0485。本標準由廣西壯族自治區農業科學院提出，廣西壯族自治區農業科學院花卉研究所負責起草。二、編制目的玉露（Haworthiacooperivar.pilifera）為百合科（Liliaceae）十二卷屬（Haworthia）中軟葉類多肉植物，原產于南非，植株低矮，葉片呈蓮座狀緊湊排列，葉色碧綠，葉片頂端具晶瑩剔透的“透明窗”，故名為“玉露”，它是百合科中極具特色的花卉品種，外表華麗又可愛，具有良好的市場前景，倍受園藝工作者和花卉愛好者的青睞。由于十二卷屬植物的自交不親和性，現在市場上的玉露多為園藝種和雜交種。近年來，中國和日本園藝工作者將從海外引進的玉露品種通過層層篩選，選擇特征明顯的優秀良種，再經過不同品種間相互授粉、育苗、選種的過程培育出了部分精品玉露，為保證這些精品玉露的優良性狀，通常采用葉插、分株和底座繁殖等繁殖方式，這些繁殖方法容易損害母本、繁殖系數小、繁殖速度慢、存在一定變異性、受季節限制大、小苗不易成活且生長緩慢，既無法達到高效繁育的目的更無法滿足市場需求，導致其價格居高不下。組織培養技術具有繁殖速度快、繁殖系數大，繁殖后代整齊一致，節約空間、能保持原優良性狀及不受季節的限制等諸多優點，是種苗商品化繁殖的最有效途徑之一。組織培養正是解決玉露有性繁殖中出現的各類問題的重要手段；因此，制定玉露組織培養技術規程，可為其種苗高效繁育提供技術依據，是解決市場對其優質種苗供需矛盾的有力途徑，有利于資源的利用及挖掘。目前國內對該物種的組織培養研究較少，國家暫無該種的相關標準，我區亦無相關標準的制定頒布，本標準的擬定、頒布填補了這一空白。三、編制過程（一）前期研究工作：標準起草單位自2013年期收集多肉植物資源，隨后開展了多肉植物的栽培以及離體培養等多方面的研究。在組織培養上，已建立了一些種類的多肉植物離體快繁體系。前期的理論研究與栽培實踐工作為本標準的制定打下了堅實基礎。（二）2017年自治區質量技術監督局下達地方標準編制任務。為做好《多肉植物玉露組織培養技術規程》廣西地方標準的編制工作，廣西農科院花卉研究所成立了以宋倩、閆海霞、陶大燕、黃昌艷等為首、共8人組成的標準起草工作小組；及時部署了制標工作方案、進行小組成員分工及標準起草工作時間安排表，全面啟動了該地方標準的編制工作。（三）2019年至2020年，標準起草工作小組成員在前期研究工作以及實際操作的基礎上，對玉露組培快繁技術進行系統總結，并查閱了大量的文獻資料，確定了廣西地方標準《多肉植物玉露組織培養技術規程》的基本內容和思路，形成了標準的基本構架。（四）2020年12月，在基本構架的基礎上，經起草小組成員反復地討論修改，最終完成了《多肉植物玉露組織培養技術規程》廣西地方標準的征求意見稿。（五）2021年1-3月，《多肉植物玉露組織培養技術規程》（征求意見稿）報送廣西壯族自治區質量技術監督局，并進行網上征求意見。聯系各領域專家，對《多肉植物玉露組織培養技術規程》（征求意見稿）進行意見征求。四、編制原則與依據（一）編制原則。規程編制遵循“科學、適度、可行”原則，既考慮規程的前瞻性又顧及生產實際，通過充分聽取各方意見，確保規程可以作為政府部門監督、生產指導的依據，在生產上切實可行。（二）技術依據。組培快繁是多肉植物玉露優質種苗生產的有效途徑之一。本標準提出的玉露的組培快繁技術是根據多次重復實驗研究總結出來的。1外植體滅菌與接種方法：取健壯、無病蟲害成熟葉片、花梗，在超凈工作臺上清洗滅菌后切成小塊，接種在初代培養基上。結果：可用分別取葉片和花梗獲得無菌外植體：用中性洗滌劑浸泡5min～10min，然后在自來水下流水沖洗30min。在超凈工作臺上，用75％酒精浸泡25s～30s，用無菌水沖洗3遍～5遍。用0.5％次氯酸鈉溶液浸泡4min～6min，用無菌水沖洗3遍～5遍。將葉片切成2.0cm×2.0cm小塊，花梗切成長1.5cm～3.0cm小段，接種在初代培養基上。2初代誘導方法：將不同部位的外植體接種在MS培養基上，20d觀察生長情況。結果：將不同部位外植體接種在MS培養基上，通過誘導可獲得愈傷組織，葉片和花梗的愈傷誘導率分別為100%、91.67%、，分化數分別為為0.29、0.12；不定芽的增殖系數分別為7.10、3.19。由此表明葉片和花梗通過誘導愈傷組織可獲得組培小苗。3愈傷組織的分化 方法：將切割好的愈傷組織塊，接入添加了不同種類和濃度激素的MS培養基中，35d后統計其愈傷組織分化數，篩選出最適愈傷分化培養基。結果：將切割好的愈傷組織塊，接入添加了不同種類和濃度激素的MS培養基中，最適宜的愈傷分化培養基為MS培養基＋0.05mg/LNAA＋0.40mg/LIBA＋30g/L白砂糖＋3.5g/L～4.0g/L瓊脂，pH值為5.8～6.0。4增殖培養方法：將初代培養獲得的小芽切取下來，接在添加有不同種類和濃度激素的MS培養基中，30d后統計并篩選出最佳增殖培養基培養基。結果：將段經過初代培養獲得的小芽切取下來，接在添加有不同種類和濃度激素的MS培養基中，適宜的增殖培養基為MS培養基＋0.20mg/L6-BA＋0.40mg/LIBA＋30g/L白砂糖＋3.5g/L～4.0g/L瓊脂，pH值為5.8～6.0或MS培養基＋0.20mg/L6-BA＋0.02mg/LNAA＋30g/L白砂糖＋3.5g/L～4.0g/L瓊脂，pH值為5.8～6.0。5生根培養方法：將長約3cm的小苗，轉接于含有不同激素組合配比的MS培養基上，15d后觀察生根情況，篩選出最適宜的激素組合配比。結果：適宜的生根培養基為1/2MS培養基＋0.10mg/LNAA＋30g/L白砂糖＋3.5g/L～4.0g/L瓊脂，pH值為5.8～6.0。6煉苗移栽方法：將已經生根的組培苗放在室溫中5d～7d后除去瓶蓋繼續放置1d～2d，加入少量水將培養基軟化后取出，冼凈基部培養基，用800～1000倍的多菌靈溶液浸泡10min，移栽到基質上，澆透定根水，15d后統計移栽成活率。結果：移栽基質為泥炭、珍珠巖、蛭石1:1:1。移栽后的玉露可在10d成活，移栽成活率達到100%。7移栽后管理：水分管理做到見干澆水，保持基質濕潤。大約經過7d即可恢復生長。病蟲害防治要遵循預防為主，綜合防治的原則。并及時清除雜草以及各種葉片（枯葉、黃葉、落葉、病葉），防止病菌傳染。五、與現行法律、法規和強制性標準的關系本標準（征求意見稿）根據GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》規定的格式編寫，遵循《中華人民共和國標準化法》等國家相關的法規和強制性標準，內容和要求參考了相關法律法規，引用了現行有效的國家標準、行業標準，與這些文件的制定不存在矛盾，協調一致。引用的具體