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文檔簡介
鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺尿檢陽性原因分析研發中心一、β-興奮劑類物質的簡介二、β2-腎上腺素受體激動的作用機理三、主要檢測方法的優缺點比較四、出現假陽性的原因分析五、客戶投訴的處理主要內容目前已發現以下九種腎上腺素受體亞型:α1Αα1Β、α1D、α2A、α2Β、α2C、β1、β2、β3、β4.β-興奮劑即腎上腺素β受體激動劑。這些受體亞型在機體的共存使得對器官功能的調節更加精細。腎上腺素激動劑就是一類專門作用于腎上腺素受體的物質,是一類苯乙胺類藥物,是天然兒茶酚胺類化學合成的衍生物。一、β-興奮劑簡介腎上腺素激動劑的作用相似,僅在作用強度、作用時間和作用受體的選擇性上有差別。
去甲腎上腺素主要激動α1受體,對β1的作用弱,對β2幾乎無作用。
多巴胺主要針對β1受體和α1受體,對β2作用較小。
異丙腎上腺素主要作用于β受體,鹽酸克倫特羅就是主要針對β2受體起作用的。
β2受體激動劑,屬苯乙醇胺類,為兒茶酚胺、腎上腺素和去甲腎上腺素的化學類似物。一般可分為含取代基的苯胺型(如克倫特羅)、苯酚型(如沙丁胺醇)、苯二酚型(如特布他林)等三大類。2002年3月農業部發布了《食品動物禁用的獸藥及其它化合物清單》明確規定β2激動劑被禁止所有用途,禁用于所有食品動物。2003年12月,農業部、衛生部和國家藥品監督管理局又聯合發布了《禁止在飼料和動物飲用水中使用的藥物品種目錄》,β2激動劑被列在頭條。β2受體激動劑是通過興奮氣道平滑肌和肥大細胞膜表面的β2受體,舒張氣道平滑肌、減少肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒及其介質的釋放、降低微血管的通透性、增加氣道上皮纖毛的擺動等緩解哮喘癥狀。除松弛支氣管平滑肌外,該藥也激動機體其他部位的β2受體,如子宮、骨骼肌和血管平滑肌起作用。
二、β2-腎上腺素受體激動的作用機理
作用模型其造成的對代謝的影響:耗氧量增加20%~30%,糖原分解,血糖增高,脂肪分解,血液中的游離脂肪酸升高同時可致血鉀增加長期使用后易引發肌肉震顫、四肢和面部肌肉最為明顯,其他癥狀有心動過快,心率失常,腹痛,肌肉疼痛,惡心、暈眩等。人吃了殘留的豬肉組織后可能會出現的中毒癥狀有:面部潮紅、頭痛、頭暈、胸悶、心悸、四肢麻木等。長期使用的中毒癥狀:三、主要檢測方法及優缺點比較
測定β2受體激動劑殘留量方法的有很多,主要為確證法和篩選法。確證法中有氣相色譜-質譜聯用法(GC/MS)和液相色譜-質譜聯用法。篩選法有免疫分析法(有放射免疫分析技術(RIA)和酶免疫分析技術(EIA)
)、液相色譜法、薄層色譜法。ELA方法:是檢測CL、萊克多巴胺等較高效的方法,是用酶標記的抗體或抗抗體來進行的抗原-抗體反應。ELISA檢測限可達0.05ng/g。優點:快速、操作簡單、費用低、靈敏度較高,缺點:只能檢查出克倫特羅及其同類藥物(β-腎上腺受體激活劑)的存在,不能確定其各自化學本質,假陽性率高。HPLC法:鹽酸克倫特羅做HPLC分析時不需要衍生,是利用β-腎上腺素能激動劑分子可與C18或C8固定相分子相互作用,應用反相柱檢測β激動劑類物質。優點:檢測精確度高,其最低檢測限范圍為1~15ng/g,而且假陽性率低,與GC-MS法相比樣品不必衍生;缺點:檢測過程煩瑣、檢測時間長,需貴重儀器、難于操作、價格昂貴。GC-MS法優點是能在多種殘留物同時存在情況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析。與HPLC相比,GC-MS法靈敏度更高,假陽性率更低,其缺點也同HPLC法一樣。我國已將HPLC法作為檢測飼料中CLB殘留的半確證法,將GC-MS法定為確證性方法,主要用于最后確認和仲裁。四、出現假陽性的原因分析
由于目前大部分質檢部門均以ELISA試紙檢測方法作為前期的篩選方法。而ELISA方法中的抗原抗體結合的非特異性,使得其檢測結果假陽性率很高。就像之前講的α受體激動劑也可能會影響其檢測結果。與克侖特羅具有相同的苯乙胺醇結構的物質或代謝后產生類似結構的物質均可能使產生假陽性。與萊克多巴胺的體內代謝產物有同樣或類似結構的物質會導致萊克多巴胺的檢測出現假陽性。其他的β-興奮劑物質也是一樣。因為飼料組成成分復雜,而動物體內代謝產物的結構種類也很多,所以還有很多物質也有報道會對萊克多巴胺、鹽酸克倫特羅的尿檢有影響,但是具體造成的原因還不是很清楚。比如飼料中硫酸鋅、有機鉻添加量較大。或者有使用以下藥物的:泰樂菌素、鹽酸四環素(四環素類藥)、海達(
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