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12TechnicalregulationsforproductionoffreshwaterChlorellasp.I1淡水小球藻生產技術規程原藻種theoriginalmicroalg4生產用水和設施設備4.1生產用水4.2設施設備4.2.1藻種保藏室4.2.2藻種培養室0.01g)、光學顯微鏡(1000×)、照度計(精度為0.1lx)超凈工作臺、高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫光照4.2.3規模生產車間25.1生產流程5.2藻種質量規模生產之前需檢測藻種的細胞密度和純度,不能有其他藻污染,藻細胞密度≥1×利用平板涂布法或計數框計數法測定藻細胞密度,計數框計5.3培養基小球藻液體培養基配方見附錄B。保種固體培養基和計數培養基為在液體培養基中加入20g/L瓊脂5.4滅菌消毒保種斜面培養基,生產液體藻種培養基以及計數培養基采用高壓蒸汽滅菌,滅菌條件為110℃~規模培養容器用10mg/L~20mg/L高錳酸鉀溶液或有效氯濃度為0.1‰~h~24h。消毒后,用清水洗凈。檢查無雜藻雜物后,加水和培養基。也可加入水和培養基后進行高壓蒸汽滅菌,滅菌條件為110℃~115℃,0.1MPa~0.15MPa,滅菌10min~15min。5.5液體藻種培養5.5.1容器從斜面培養基接種原藻種到液體培養基中,光照強度3000lx~5000lx,光照周期14L:10D,培配制計數培養基,利用平板涂布法測定小球藻細胞密度及5.6規模培養5.6.1容器容器容積控制在0.2m3~2m3,高度≤100cm。選用透光性強的塑料桶、塑料袋、玻璃缸等適合的5.6.2接種量35.6.3光照5.6.4溫度溫度為15℃~30℃,最適培養溫度為20℃~25℃。規模培養應適當補充空氣,充氣量應大于培養容5.7生長監測每天采樣監測,用計數框計數法或光密度法計算藻細胞密度,觀察污染動物或其他藻類污染,應終止培養,清洗消毒,重5.9質量檢測5.10后處理4(規范性)淡水小球藻生產流程圖淡水小球藻生產流程見圖A.1原藻種原藻種液體藻種規模培養合格出廠圖A.1淡水小球藻生產流程5——檸檬酸鐵銨0.006g;

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