臨床生物樣本庫運行質量技術要求2024-09-23發布2025-01-01北京市市場監督管理局發布I前言 12規范性引用文件 13術語、定義和縮略語 14基本要求 35保藏過程要求 36質量控制要求 5附錄A(資料性)常用關鍵設備及重要耗材要求 7附錄B(規范性)保藏過程技術要求 8附錄C(資料性)樣本報告模板 參考文獻 DH1/T2313—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件由北京市衛生健康委員會提出并歸口。本文件由北京市衛生健康委員會組織實施。本文件起草單位：首都醫科大學附屬北京安貞醫院、北京生命科學園生物科技研究院有限公司、中國計量科學研究院、中國醫學科學院北京協和醫院、北京大學腫瘤醫院、中國人民解放軍總醫院第五醫學中心、北京大學人民醫院、首都醫科大學附屬北京天壇醫院、首都醫科大學附屬北京地壇醫院、首都醫科大學附屬北京安定醫院、中國合格評定國家認可委員會。本文件主要起草人：曾小莉、張雷、王晶、郭丹、胡穎、劉妍、張育軍、林金嬉、劉順愛、王剛、李軍燕等。1臨床生物樣本庫運行質量技術要求1范圍本文件規定了臨床生物樣本庫運行質量技術的基本要求、保藏過程要求和質量控制要求。本文件適用于臨床生物樣本庫的運行活動。本文件不適用于含有高致病性或疑似高致病性病原微生物的樣本庫運行活動。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T5458液氮生物容器GB/T27025檢測和校準實驗室能力的通用要求GB/T37864生物樣本庫質量和能力通用要求GB/T38735人類尿液樣本采集與處理GB/T39767人類生物樣本管理規范GB/T40352.1人類組織樣本采集與處理第1部分：手術切除組織GB/T41908人類糞便樣本采集與處理GA/T148法醫學病理檢材的提取、固定、取材及保存規范JJF1366溫度數據采集儀校準規范JJF1664顯示儀校準規范JJG326轉速標準裝置WS/T224真空采血管的性能驗證WS/T661靜脈血液標本采集指南WS/T662臨床體液檢驗技術要求YY/T1540醫用Ⅱ級生物安全柜核查指南3術語、定義和縮略語3.1術語和定義下列術語和定義適用于本文件。臨床生物樣本庫clinicalbiobark開展臨床生物樣本保藏的合法實體或其部分。[來源：GB/T37864—2019,3.5,有修改]2保藏過程biobankingprocess將樣本輸入轉化為預期結果的相互關聯或相互作用的一系列(樣本庫)活動，包括樣本及相關數據的采集、接收、制備、保存、儲存、棄用、分發報告和包裝運輸等部分或全部活動，。[來源：GB/T37864—2019,3.6和3.39,有修改]防止或延緩生物樣本生物或物質特性退化的行為。將生物樣本保持在特定條件下以備將來使用。以標準確定評估一個程序或項目的品質和性能，驗證所規定的要求是否被滿足的技術操作系統。[來源：GB/T39767—2021,3.5,有修改]室內比對intralaboratarycarparison按照預先規定的條件，在同一實驗室內部對相同或類似的樣品進行測量或檢測的組織、實施和評室間比對interlaboratarycarparison按照預先規定的條件，由兩個或多個實驗室對相同或類似項目的樣品進行測量或檢測的組織、實施和評價。下列縮略語適用于本文件。cfDNA:細胞游離脫氧核糖核酸(Cell-freeDeoxyribonucleicAcid)DNA:脫氧核糖核酸(DeoxyribonucleicAcid)EDTA:乙二胺四乙酸(EthyleneDiamineTetraaceticAcid)FFPE:福爾馬林固定石蠟包埋(Formalin-fixedAndParaffin-enbedded)HIS:醫院信息系統(HospitalInformationSystem)3DH1/T2313—2024LIS:實驗室信息管理系統(LaboratoryInformationManagementSystem)PACS:影像存檔與通訊系統(PictureArchivingAndCommunicationSystems)PBMC:外周血單個核細胞(PeripheralBloodMononuclearCelI)RNA:核糖核酸(RibonucleicAcid)4基本要求4.1樣本庫應建立符合GB/T37864的質量管理制度和技術操作規范，運行中實施質量風險管理。4.2參與樣本保藏活動的人員應接受相關專業技術培訓、考核和授權，能力持續滿足相應技術崗位的要求。4.3樣本庫應根據日常工作需求設定不同區域，宜包括但不限于接收/分發區域、制備區域、冰箱儲存區域、液氮設備儲存區域、室溫儲存區域、檢測區域等。不同區域的環境條件應優先符合所在區域的設備要求和樣本儲存要求，其次應控制溫度在18℃~26℃、相對濕度在30%～70%。適用時，應建立環境實時監控系統。4.4樣本庫應采用性能驗證、檢定/校準或期間核查等適宜的方式保證關鍵設備及重要耗材符合質量技術要求，常用的關鍵設備及重要耗材的要求可參考附錄A。4.5樣本庫應在樣本保藏活動前確定樣本相關數據范圍、內容、標準以及質控規則，這些數據包括但不限于影響生物樣本質量的關鍵數據、書面協議或具有法律約束力文件所要求的數據。4.6樣本庫信息系統的功能應包括但不限于：a)具備完整、客觀記錄保藏過程(包括采集、運輸、接收、制備、保存、儲存、棄用、分發報告等)的關鍵過程信息，對保藏過程的任何偏離進行標記和糾偏，并可通過樣本標識進行追b)與外部信息系統進行數據交換時，應采取必要的身份鑒別、數據加密、容錯機制等保證交換數據的完整性、一致性和隱私安全，防止數據被非法獲取或篡改；c)宜連接其他信息系統例如HIS系統、LIS系統、PACS系統、電子病歷系統等。5保藏過程要求5.1樣本采集5.1.1血液樣本采集應考慮采集前準備、采集部位、采集管、采集順序、采血量、采集時間、采集后混勻等因素對樣本質量的影響，具體技術要求符合附錄B中B.1。5.1.2組織樣本采集應考慮采集部位、采集類型、采集量、采集時間、手術切除組織樣本的冷缺血時間等因素對樣本質量的影響，具體技術要求符合附錄B.1。5.1.3尿液樣本采集應考慮采集前準備、采集容器、采集類型、采集量、采集時間等因素對樣本質量的影響，具體技術要求符合附錄B中B.1。5.1.4腦脊液、糞便樣本采集應考慮采集容器、采集量、必要時抗凝劑的選擇、采集時間等因素對樣本質量的影響，具體技術要求符合附錄B.1。5.1.5采集容器上應有可識別的標識，如需使用手寫標識，應字跡清晰可辨，信息完整。5.1.6樣本庫應根據接收的不合格樣本信息，分析原因，采取措施控制樣本采集質量。5.2樣本接收5.2.1樣本庫應記錄樣本接收日期和時間，應根據樣本類型和預期用途制定文件化的樣本接收規則，包括但不限于：4d)樣本采集到接收的轉運時間和溫度符合附錄B中B.4中樣本運輸要求。5.2.2樣本庫應按照接收規則逐一核對接收的所有樣本，識別并暫存不符合接收規則的樣本。銷毀5.2.3特殊情況下接收不合格樣本，應記錄與接收規則的偏離，并在樣本分發報告中給出警示。5.3.1樣本庫應根據樣本的類型和預期用途確定制備和保存技術要求，原始樣本依據其預期用途可a)血液樣本，可制備為全血、血漿、血細胞、白膜層、血清和PBMC等，符合附錄B中B.2b)組織樣本，可制備為冷凍組織、FFPE組織、FFPE組織切片等，符合附錄B中B.2的要求；c)尿液樣本，可制備為全尿、尿上清、尿沉渣等，符合附錄B中B.2的要求；d)腦脊液樣本，可制備為全腦脊液、腦脊液上清、腦脊液沉渣等，符合附錄B中B.2的要求；e)糞便樣本，可制備為不含保存液的糞便、含保存液的糞便等，符合附錄B中B.2的要求。5.3.2樣本庫應按照6.2.3隨機抽樣檢測偏離附錄B中B.2制備和保存技術要求的樣本。5.3.3樣本制備后應按需分裝，5.4樣本儲存5.4.1樣本庫應根據樣本的類型和預期用途確定儲存技術要求，血液、組織、尿液、腦脊液和糞便5.4.2樣本庫應選擇6.2.2方法控制儲存過程的質量，應按照6.2.3隨機抽樣檢測偏離附錄B中B.35.5樣本棄用5.5.1樣本棄用條件應符合GB/T39767的要求。5.5.2樣本庫應記錄并定期抽查棄用樣本的信息，確保樣本棄用過程的可追溯性。5.6樣本分發5.6.1樣本及相關數據分發前，樣本庫應與使用申請人簽訂樣本及數據轉移協議(適用時),協議內容應符合GB/T39767的要求。5.6.2樣本庫應根據樣本的類型和預期用途制定樣本分發要求，包括但不限于樣本分發的時間、地5點和方式，分發樣本的包裝和運輸要求。5.6.3樣本庫應定期評價樣本分發使用后的樣本質量反饋。5.7樣本報告5.7.1報告的簽發和審核批準應由不同的授權人員執行，并簽字確認。5.7.2樣本報告內容應符合GB/T37864的要求，模板可參考附錄C,可以根據運輸方式、制備方法、儲存前周轉時間、儲存時長、儲存條件等內容給出樣本的建議預期用途或不適用情況的說明。5.8樣本包裝5.81樣本庫應根據樣本種類、用途、數量、保存條件、運輸時長、質量和安全風險等因素，制定與其相適宜的包裝要求。5.8.2樣本包裝應符合GB/T39767的要求。5.9樣本運輸5.9.1血液、組織、尿液、腦脊液和糞便樣本采集后的運輸技術要求應符合附錄B中B.3。5.9.2樣本制備后的運輸和樣本分發后的運輸應符合GB/T39767的要求。5.9.3樣本庫應按照6.2.3隨機抽樣檢測偏離運輸要求的樣本。5.9.4樣本庫應制定突發應急情況下儲存樣本的轉移運輸要求，包括但不限于：a)樣本轉移時機；b)樣本運輸流程；c)樣本的安全保障措施；d)記錄可能影響樣本質量的關鍵參數如樣本運輸持續時間、樣本運輸溫度等；e)若樣本需要運輸到其他具備資質和能力的樣本庫備用儲存時，雙方應簽訂書面協議。6質量控制要求6.1通用要求6.1.1樣本庫應建立、成文和實施質量控制程序，包括但不限于質控時機、質控方法、質控頻次、質控指標、預期結果、質控數據管理等。6.1.2樣本庫應建立、成文和實施室內比對程序，包括但不限于比對時機、比對方式(如人員比對、設備比對、方法比對等)、頻次、樣品類型及數量、比對項目、預期結果和分析總結等。6.1.3樣本庫應建立、成文和實施室間比對程序，包括但不限于比對計劃、頻次、樣品類型及數量、比對項目、預期結果和分析總結等。6.1.4樣本庫應優先參加能力驗證計劃，其次參加其他室間比對計劃。6.1.5當質量控制結果、室內比對結果或室間比對結果未達到設定的預期結果時，樣本庫應分析原因，對發現的問題采取措施并記錄。6.2質量控制方法6.2.1樣本庫應根據樣本的類型和預期用途識別影響樣本質量的關鍵保藏過程，并確定質量控制方法和指標。6.2.2依據樣本的類型和預期用途選擇適宜的質量控制標準或質控品，定期檢測相同條件下儲存的質控品的重要質量特性如穩定性、準確度/精密度等，達到控制儲存過程質量的目的。6.2.3依據樣本的類型和預期用途確定質量控制的指標，定期隨機抽樣檢測樣本的重要質量特性如6穩定性、準確度/精密度等，達到控制保藏過程質量的目的。抽樣質量控制的方法包括但不限于：a)用于組織學研究的樣本抽樣質控，應選擇組織形態類指標判斷樣本是否符合預期用途；b)用于細胞學研究的樣本抽樣質量控制，應選擇細胞數量、細胞活力和細胞污染率等指標判斷樣本是否符合預期用途；c)用于基因或轉錄研究的樣本抽樣質量控制，應選擇DNA或RNA的濃度、純度和完整度等指標判斷樣本是否符合預期用途；d)用于蛋白或代謝研究的樣本抽樣質量控制，應選擇蛋白或代謝類指標判斷樣本是否符合預期用途。7(資料性)常用關鍵設備及重要耗材要求樣本庫常用關鍵設備及重要耗材的質量技術要求，可參考表A.1。a)外觀結構完好，開關按鍵等操作靈活可靠，插頭無松動；b)安裝運行穩定后制冷溫度范圍和波動符合儲存要求；b)充氮運行穩定后制冷溫度范圍和波動應符合儲存要求；a)外觀結構完好，開關按鍵等操作靈活可靠，插座無松動；b)離心轉速和溫度能按說明書中的范圍進行調節；a)宜使用Ⅱ級生物安全柜；b)按照YY/T1540的要求實施驗收核查、巡查核查和年度核查；b)其他采集容器應符合制造商聲明的質量技術要求和性能參數。a)外觀完好無破損；c)密封性符合儲存條件；d)耐受溫度范圍符合儲存條件；e)可反復凍融；a)外觀完好無破損；b)可識別的標識；c)有效防水；8(規范性)樣本采集應符合表B.1的要求。a)采集前應確定供體的準備要求，如空腹、運動、情緒、用藥、體位等；b)單次采集多個血液樣本時，應遵循WS/T661的采集順序；c)根據所需血液樣本類型選擇合適的采血管；d)采血量應遵循采血管制造商的規定；e)采集后應立即按照采血管制造商要求，緩慢按翻轉次數進行徹底混勻；g)末梢血采集應選擇合適的穿刺部位如指尖、足跟，采血之前擦去第一滴血；c)宜避免采集出血和壞死部位；d)應記錄采集部位、采集類型(例如正常、病變旁、病變);e)應記錄采集日期時間和組織冷缺血持續時間，宜記錄組織a)采集前應確定供體的準備要求，如采集方法指導、生理性狀態、飲食、運動、用藥等；c)采集樣本類型包括晨尿、隨機尿、計時尿、無菌尿和特殊實驗尿；a)腦脊液樣本由臨床醫師采集，通常采用腰椎穿刺法，必要a)單次采集多個糞便樣本時，應遵循采集管制造商的操作說明；b)糞便采集容器根據預期用途選擇普通無菌采樣盒和含特定保存液的商品化采樣盒；9究2℃~8℃,最究采血管；2℃~8℃,最用于cfDNA研究2℃~8℃,最b)18℃~26℃,2000g,離心20min;c)吸出血漿后吸取白膜層或混勻后按需分裝血18℃~26℃,最好<2hr采血管；a)使用含RNA表達譜穩定劑的專用采血管；b)應遵循采血管制造商要求采集后立即混勻血樣和制備。a)使用PBMC制備管，應遵循制造商要求制備；b)使用PBMC分離液，應遵循制造商要求制備；組織a)用于蛋白研究；b)用于基因研究；c)用于轉錄研究宜采用液氮速凍-60℃及以下切片白、基因、轉錄研究；學研究c)固定時間越長，對核酸完整性、蛋白產量影響越大；d)應記錄固定持續時間和溫度；a)2℃~8℃,1000～3000g,離心5min;2℃~8℃,最好究18℃~26℃,最18℃~26℃,400g,離心10mina)2℃~8℃,1000～3000g,離心5min;2℃~8℃,最好液究18℃~26℃,最18℃~26℃,400g,離心10min用于宏基因、a)采集500～1000mg/管，宜液氮速凍；b)若采用含特定保存液的糞便采集管，遵循制造商-60℃及以下注：#指樣本制備后到儲存前的保存過程。樣本儲存和運輸應符合表B.3的要求。a)-60℃及以下，儲存時間增a)cfDNA專用采血管：6℃~35℃,最多檢測給出的最大儲存期限；b)若無上述儲存期限，則-20℃及以下儲存，避免反復凍融。白膜層/血a)-60℃及以下；濃度降低。a)18℃~26℃,至少2hr,最多72hr;究a)18℃~26℃,最好<2hr;a)-150℃及以下；因、轉錄研究2℃~8℃,最好30min內，置于干冰/液氮中a)-60℃及以下；/FFPE切片因、轉錄研究2℃~8℃,最好30min內，置于中性緩沖福爾馬林溶液中運輸，18℃~26℃,b)干燥儲存；-20℃及以下)儲存能減緩隨著時間推移產生的核酸和蛋白質降解。究a)2℃~8℃,最好<2hr;a)-60℃及以下，儲存時間增渣a)18℃~26℃,最好<4hr;a)-60℃及以下；濃度降低。注：*指樣本采集到樣本接收的運輸過程。表R3樣本儲存和運輸技術要求(續)a)-60℃及以下，儲存時間增a)-60℃及以下；究2℃~8℃,最好<2hra)-60℃及以下；a)-60℃及以下，儲存時間增注：*指樣本采集到樣本接收的運輸過程。 (資料性)頁眉：樣本庫名稱出庫時間出庫單號樣本來源項目口樣本提供者登記樣本源類型口樣本提供者提供病理報告□核酸鑒定法抽檢口細胞鑒定法抽檢生物樣本的質量信息采集/收集時間接收時間儲存時間出庫量□定期檢測相同條件下儲存的質控物，質控報告編口不涉及測試□未經過測試結論和說明樣本符合用戶保藏要求，予以出庫或給出樣本的建議預期用途或不適用情