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文檔簡介

試驗6

酵母菌大小測定

一、試驗目標和內容目標：學會測微尺使用和計算方法及對單細胞微生物測量。內容：1.學會并掌握測微尺使用。

2．測定釀酒酵母菌體大小。二、試驗材料和用具

釀酒酵母菌懸液

顯微鏡、目鏡測微尺、鏡臺測微尺、擦鏡紙。

第1頁鏡臺測微尺目鏡測微尺第2頁目鏡測微尺每格實際代表長度隨物鏡放大倍數而改變，也會因使用不一樣顯微鏡而產生誤差，所以在使用前必須用鏡臺測微尺進行校正。第3頁目鏡測微尺校正第4頁三、操作步驟l．目鏡測微尺標定把目鏡上透鏡旋開，將目鏡測微尺輕輕放在目鏡隔板上，使有刻度一面朝下。將鏡臺測微尺放在顯微鏡載物臺上，使有刻度一面朝上。先用低倍鏡觀察，調焦距，待看清鏡臺測微尺刻度后，轉動目鏡，使目鏡測微尺刻度與鏡臺測微尺刻度相平行，并使兩尺左邊一條線重合，向右尋找另外一條兩尺相重合直線。2．標定公式：計算兩刻度間目鏡測微尺格數和鏡臺測微尺格數。因為鏡臺測微尺刻度每格長10μm，所以可得：

目鏡測微尺每格長（μm）=

兩條重合線間鏡臺測微尺格數×10兩條重合線間目鏡測微尺格數

第5頁三、操作步驟3．菌體大小測定將鏡臺測微尺取下，換上釀酒酵母玻片標本，分別在低倍鏡和高倍鏡下找到目標物，測量10～20個菌體長和寬占目鏡測微尺格數，再以目鏡測微尺每格長度計算出菌體長和寬。統計結果,求出平均值。鏡臺測微尺玻片很薄，如需標定油鏡頭時，要格外注意，以免壓碎鏡臺測微尺或損壞鏡頭。思索題為何不一樣放大倍數目鏡和物鏡必須分別進行標定？第6頁酵母菌數量測定

一、目標要求1．明確血球計數板計數原理。2．掌握使用血球計數板進行微生物計數方法。二、基本原理用血球計數板在顯微鏡下直接計數是一個慣用微生物計數方法。該計數板是一塊特制載玻片，其上由四條槽組成三個平臺；中間較寬平臺又被一短橫槽隔成兩半，各列有一個方格網，中間大方格即為計數室。計數室刻度普通有兩種規格，一是大方格分成25個中格，而每個中格又分成16個小格；另一個是大格分成16個中格，而每個中格又分成25個小格，每個大格中小格都是400個。每一個大格邊長為lmm，面積為lmm2，蓋玻片與載玻片之間高度為0.lmm，故計數室容積為0.lmm3。

第7頁第8頁血球計數板計數第9頁

計數時，通常數五個中格總菌數，然后求得每個中格平均值，然后再換算成lml菌液中總菌數。假如是25個中方格計數板,1mL菌液中總菌數=A/5×25×104×B=50000A·B（個）

A為五個中方格中總菌數，B為菌液稀釋倍數.假如是16個中方格計數板，1mL菌液中總菌數=A/5×16×104×B=3A·B（個）第10頁（三）器材1．菌種釀酒酵母2．儀器或其它用具血球計數板，顯微鏡，蓋玻片，無菌毛細滴管。（四）操作步驟l．菌懸液制備以無菌生理鹽水將釀酒酵母制成濃度適當菌懸液。2．鏡檢計數室在加樣前，先對計數室進行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進行計數。3．加樣品將清潔干燥血細胞計數板蓋上蓋玻片，再用無菌毛細滴管將搖勻釀酒酵母菌懸液由蓋玻片邊緣凹槽滴加

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