…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教新課標選擇性必修3生物上冊階段測試試卷905考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、甘草酸是中藥甘草中的主要活性成分。為了快速檢測甘草酸；科研人員利用細胞工程技術制備了抗甘草酸的單克隆抗體，其基本操作過程如圖。相關敘述正確的是。

A.過程①注射相應抗原后應立即從小鼠脾臟中提取細胞甲B.過程②誘導細胞融合，利用了細胞膜的選擇透過性C.過程③、④的篩選方法相同，細胞丙、丁遺傳物質相同D.過程⑤無論在體內還是體外進行，細胞丁都可大量增殖2、在動物細胞培養的過程中；貼壁的細胞不一定都能增殖并形成克隆（單個細胞繁殖形成的細胞群體），而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞，這一特點可用于測定動物細胞的增殖能力。大致流程如圖，相關敘述正確的是（）

A.出現接觸抑制后，細胞克隆停止增殖B.克隆細胞與接種的細胞的遺傳信息一定相同C.需采用固體培養基培養才能形成細胞克隆D.胰蛋白酶可使細胞分散成單層利于計數3、熒光定量PCR技術可定量檢測樣本中DNA含量；其原理是：在PCR反應體系中加入引物的同時，加入與某條模板鏈互補的熒光探針，當Taq酶催化子鏈延伸至探針處會水解探針，使熒光監測系統接受到熒光信號，即每擴增一次，就有一個熒光分子生成（如圖）。下列說法不正確的是（）

A.若循環次數相同，熒光值越高，證明新冠病毒感染程度越高B.該技術需要用到一對引物，且引物之間的堿基序列不能互補C.該技術中DNA聚合酶只能從引物的3'端開始延伸DNA鏈D.該技術的原理是DNA的體外復制，需要用到解旋酶和Taq酶4、生物武器種類多樣，下列不太可能用于制造生物武器的是（）A.病毒B.毒品C.致病菌D.生化毒劑5、產脂肪酶細菌可用于含油廢水處理。科研人員用射線照射從土壤中分離的菌株，反復篩選后獲得產酶能力提高的菌株，具體流程如圖。相關敘述正確的是（）

A.步驟①取土壤樣品溶于無菌水中制成菌懸液B.步驟②的固體平板可以是以脂肪為唯一氮源的培養基C.步驟②射線照射可引起細菌基因突變或染色體變異D.步驟③透明圈越大的菌落，其脂肪酶活性一定越高6、下列關于菊花組織培養的敘述，正確的是（）A.用自然生長的莖進行組培須用適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉的混合液消毒B.培養瓶用專用封口膜封口可防止外界雜菌侵入并阻止瓶內外的氣體交換C.組培苗鍛煉時采用蛭石作為栽培基質的原因是蛭石帶菌量低且營養豐富D.不帶葉片的菊花幼莖切段可以通過器官發生的途徑形成完整的菊花植株7、以下為形成cDNA過程和PCR擴增過程示意圖。據圖分析，下列說法正確的是（）

A.催化①過程的酶是RNA聚合酶B.④過程發生的變化稱為復性C.催化②⑤過程的酶都是DNA聚合酶，都必須能耐高溫D.如果RNA單鏈中A與U之和占該鏈堿基含量的40%，則一個雙鏈DNA中，A與U之和也占該DNA堿基含量的40%8、將誘導多能干細胞（iPSc）移植給急性心肌梗死小鼠，檢測發現小鼠心肌電生理指標逐漸恢復正常。下列說法合理的是（）A.該實驗中僅需正常小鼠作為對照組B.與高度分化的細胞相比，iPSc的分化潛能較弱C.選擇病鼠自身細胞獲得iPSc再移植可避免免疫排斥D.此結果說明可將iPSc移植用于治療人類缺血性心肌病評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)9、關于現代生物工程技術應用的安全性，下列說法正確的是（）A.對待生物武器的態度應明確而堅定，即堅決禁止生物武器B.中國對于克隆人的態度是不反對治療性克隆，但禁止生殖性克隆人C.對轉基因植物外源DNA要進行認真選擇，避免產生對人體有害的或過敏的蛋白質D.轉基因生物出現了安全性問題，不一定要馬上停止實驗10、良種試管牛的繁殖過程是用激素促進甲牛多排卵，然后把卵母細胞在體外與人工采集的乙牛的精子進行受精，在特定培養基上培育成胚胎，再把胚胎送入經過激素處理的丙牛的子宮內，孕育成試管牛。下列相關敘述正確的是（）A.“用激素促進甲牛多排卵”的激素是孕激素B.產生試管牛的生殖方式屬于有性生殖C.甲牛、乙牛對試管牛核基因的貢獻相同D.該技術可應用于加速優良種畜的繁殖11、生長圖形法是一種測定微生物營養需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類；研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養物質的培養基混合后倒成平板，然后在平板上劃分數區，將甲；乙、丙三種生長因子分別添加到不同區域，培養結果如圖所示，下列說法正確的是（）

A.倒成平板后直接培養可判斷有無污染B.倒成平板后需要進行滅菌處理C.圖示結果表明該菌需要生長因子乙或丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選12、下列關于植物基因工程應用的說法，正確的是（）A.將某種含必需氨基酸多的蛋白質導入植物體中以提高該植物體內氨基酸的含量B.植物基因工程可用來培育高產、穩產、品質優良和抗逆性強的作物C.利用基因工程可以改造植物細胞的基因，使其能夠生產人類所需要的藥物D.通過植物基因工程培育的抗蟲植物必然可以抗病毒13、下圖為某個基因的部分片段，關于該結構的敘述，錯誤的是（）

A.①所圈定的部位是腺嘌呤B.DNA連接酶作用于②處C.限制酶作用于③處D.解旋酶作用于④處14、將蘇云金桿菌的Bt基因導入棉花細胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉，其過程如圖所示(KanR為卡那霉素抗性基因)。下列相關敘述正確的是（）

A.可使用含卡那霉素的培養基來篩選含重組質粒的農桿菌B.過程①必須用同種限制酶切割含Bt基因的DNA和Ti質粒C.過程③將棉花細胞與農桿菌混合培養能使T-DNA進入棉花細胞D.過程④和過程⑤的培養基中添加的激素的濃度不同15、基因工程在農牧業、醫藥衛生和食品工業等多方面的應用發展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（）

A.若某基因是從人的細胞內提取mRNA經逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列B.擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進行子鏈合成C.導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞是乳腺細胞D.利用農桿菌轉化法可將含有目的基因的重組質粒整合到植物受體細胞的染色體DNA上16、自生固氮菌是土壤中能獨立固定空氣中N2的細菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產量并降低化肥的使用量。科研人員進行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測定的研究，部分實驗流程如圖。以下敘述正確的是（）

A.步驟①土樣應取自當地表層土壤；步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養型生物，不可用血細胞計數板來計數土壤懸浮液中的菌體數C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養基的特點是不添加氮源評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)17、醋酸菌是一種____________細菌。醋酸生成反應式是_____________________。18、酵母菌是______________微生物。酵母菌進行有氧呼吸的反應式如下：______________________；酵母菌進行無氧呼吸的反應式如下：_________________。19、_________℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發酵時一般將溫度控制在_______________℃。20、假設PCR反應中，只有一個DNA片段作為模板，請計算在30次循環后，反應物中大約有個這樣的_______個DNA片段，一共需要加入______________個引物。21、為了避免外源DNA等因素污染，PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行_____________。而使用的緩沖液并在__________℃存儲。22、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結構和功能很相似，只是前者熱穩定性較差，進入人體后容易失效。嘗試根據本節課所學知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。23、動物細胞培養的條件：_____、_____、_____、_____等。評卷人得分四、判斷題(共2題，共6分)24、雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯誤25、要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造氨基酸序列來完成。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共28分)26、甘蔗是華南地區一種重要的經濟作物。某研究團隊從甘蔗根際土壤中分離出了幾種固氮菌；實驗方案如下。

回答下列問題：

（1）Ashby培養基的營養成分主要包括水、無機鹽_________等。實驗中第一次在Ashby培養基上接種的方法是________，在Ashy平板上進行多次接種的目的是_________________________

（2）固氮菌能產生固氮酶。為評估固氮酶的活性，可以檢測____________．

（3）研究發現，上述固氮菌還能產生IAA。取一定體積的固氮菌菌液離心，獲得上清液，現欲測定上清液中IAA的含量，請利用以下試劑，寫出實驗思路。_______

供選試劑：標準的1g/L的IAA母液，蒸餾水，S試劑(與IAA反應顯紅色，且顏色深淺與IAA濃度成正相關）27、下圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實驗流程示意圖；請據圖回答：

（1）泡菜是乳酸菌發酵的產物，乳酸菌的代謝類型是___________________。制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜，原因是____________________________。

（2）將鹽與清水按照一定的比例配制鹽水，待鹽水煮沸冷卻后，注入裝好原料的泡菜壇中，同時加入一定量的“老汁”(陳泡菜水)。將鹽水煮沸冷卻的目的是____________________；加入“老汁”的作用是____________________________。

（3）測定亞硝酸鹽含量的方法是_________________。即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與____________________________發生重氮化反應后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結合后形成_______________色的染料，然后將顯色反應后的樣品與已知濃度的____________進行目測比較，大致估算出亞硝酸鹽的含量。28、玉米是重要的糧食作物；其葉片細胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長發育過程中對水分的吸收具有重要的調節功能。科研人員成功培育出超量表達P蛋白轉基因玉米，所用DNA片段和Ti質粒的酶切位點如圖所示，請回答下列問題：

(1)強啟動子是一段有特殊結構的DNA片段，能被_______識別并結合，驅動基因的持續轉錄，如將強啟動子插入到玉米葉綠體某基因內部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達，應優先選用_______酶組合，將Ti質粒切開后構建重組表達載體。T-DNA在該實驗中的作用是_______。

(2)將農桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進行組織培養，培養基中需加入_______進行篩選，此物質屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對沒有分化的_______團，經液體懸浮培養叮以分散成胚性細胞，在適宜的培養基中，這種單細胞可以發育成_______；再繼續發育成轉基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數以及_______等。目前，組織培養過程中培養瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。29、有研究表明CDKN2B基因與小鼠的壽命有關；科學家將該基因導入小鼠體內，統計其壽命是否高于正常小鼠。圖1表示CDKN2B基因與相關限制酶酶切位點，該基因轉錄出的mRNA堿基序列與A鏈的堿基序列相同（T；U視為相同的堿基），圖2為質粒簡圖，請回答下列有關問題：

（1）科學家首先采用PCR技術對目的基因進行擴增。PCR過程中每一循環有兩次升溫一次降溫，其中降溫的目的是_______________________________________________________。

（2）科學家在構建基因表達載體過程時，目的基因應插在___________和___________之間才能正常表達。單獨使用限制酶HindⅢ分別切割目的基因和載體后產生黏性末端。攜帶CDKN2B基因的重組質粒成功導入細胞后，發現約一半的細胞中沒有檢測到CDKN2B蛋白，原因是___________。為了避免這種現象的發生，應對以上方法進行改進，改進措施為___________。

（3）若想讓一個轉入了目的基因的受精卵發育成多個個體，可以采用___________技術，操作時應注意做到_______________________________________________________。評卷人得分六、綜合題(共3題，共12分)30、紙片擴散法（K-B法）是藥敏試驗的一種常用方法；其原理是將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上，培養一段時間后在紙片周圍會形成透明的抑菌圈。請回答下列問題：

(1)藥敏試驗的目的是_______，因變量是________。

(2)K-B法接種測試菌的方法是______，獲得純培養物的關鍵是_____。接種后的平板在培養時倒置的原因是______。

(3)某研究小組將含有相同濃度抗生素Ⅰ~Ⅳ的四個紙片分別貼放在生長有測試菌的瓊脂平板上，在合適的溫度條件下孵育16h，結果如圖所示。

MIC是藥敏試驗中評價抗生素藥效的常用指標，其定義為某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度。對該測試菌而言，抗生素Ⅰ的MIC______（選填“大于”“小于”或“等于”）抗生素Ⅲ的MIC；在相關實驗操作均嚴謹規范的情況下，在含有抗生素Ⅳ的紙片周圍出現了較大的抑菌圈，但抑菌圈中存在有個別菌落。試對上述現象的成因做出分析：_____。31、水稻根部一般沒有根瘤菌；在種植時常需要施加氮肥。科學家想利用基因工程技術來減少施用氮肥的生產成本及可能造成的環境污染，他們提出了以下兩種方案。

方案一把根瘤菌的固氮相關基因導入水稻根系微生物中；使微生物能在根系處固氮，從而減少氮肥的施用量。

方案二直接將固氮相關基因導入水稻細胞中；建立水稻的“小型化肥廠”，讓水稻直接固氮，這樣就可以免施氮肥了。

(1)請評估這兩種方案哪種更容易實現。______

(2)如果兩個方案都實現的話，你認為哪種更值得推廣？請說出你的理由______。32、新冠肺炎疫情暴發以來；在黨中央的關懷下，全國人民共同努力，疫情防控取得重大戰略成果，很多新冠肺炎患者康復，這些康復者的血清中含有相應的抗體，可幫助患者更快地清除病毒，是治療新冠肺炎的有效方法。但目前康復者的血清來源較少，不能滿足臨床需求，理論上可采用基因工程或動物細胞工程的方法獲得相應抗體。請回答下列有關問題：

（1）傳統抗體的制備是向生物體內反復注射某種抗原；使生物體產生抗體，從動物的__________中分離所需抗體，但用這種方法提取的抗體，具有_______________（至少寫出兩點）等缺點，現在逐步被單克隆抗體取代。

（2）單克隆抗體制備時需要從康復者的脾臟中分離出B淋巴細胞；在體外將其與_________細胞進行融合，常見的融合方法有電激；聚乙二醇、______________等，然后再經篩選、培養等步驟大量獲得。

（3）科學家不斷探索尋求制備新冠病毒抗體的方法；某科研小組欲利用基因工程技術制備新冠病毒抗體，其大致流程如下圖：

①抗體基因確定后；可通過PCR技術特異性地快速擴增，PCR技術擴增目的基因的前提條件是________________________。基因表達載體的組成除了目的基因外，還必須有______________以及標記基因等。

②人體合成的抗體需要膜系統加工形成正確的空間結構才能有活性，與大腸桿菌作為受體細胞相比，選擇酵母菌作為受體細胞的優勢是_____________________________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、D【分析】【詳解】

A.過程①注射相應抗原后應經過一段時間；使小鼠產生漿細胞，再從小鼠脾臟中提取細胞甲，A項錯誤；

B.過程②誘導細胞融合；利用了細胞膜的流動性，B項錯誤；

C.過程③篩選雜交瘤細胞；過程④篩選能產生單一抗體的雜交瘤細胞，二者方法不同，C項錯誤；

D.過程⑤無論在體內還是體外進行；細胞丁都可大量增殖，D項正確；

因此，本題答案選D。2、A【分析】【分析】

動物細胞培養的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液中（原代培養）→放入二氧化碳培養箱培養→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞；制成細胞懸液→轉入培養液（傳代培養）→放入二氧化碳培養箱培養。

【詳解】

A；在動物細胞培養的過程中；當出現接觸抑制后，細胞克隆停止增殖，A正確；

B；克隆細胞與接種的細胞的遺傳信息不一定相同；B錯誤；

C；需采用液體培養基培養才能形成細胞克隆；C錯誤；

D；胰蛋白酶可使細胞分散成單個；從而利于計數，D錯誤。

故選A。3、D【分析】【分析】

PCR技術：

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

（2）原理：DNA復制。

（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

（4）條件：模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）。

（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；循環次數相同時；熒光值越高證明感染的新冠病毒越多，感染程度越高，A正確。

B；PCR技術用到的引物之間的堿基序列不能互補；以免影響引物與模板鏈的結合，B正確；

C；DNA聚合酶只能從引物的3'端開始延伸DNA鏈；C正確；

D；PCR技術用的原理是DNA的體外復制；其中雙鏈分開靠的是加熱，不需要解旋酶，D錯誤；

故選D

【點睛】4、B【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經過基因重組的致病菌等．把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規模殺傷后果。

【詳解】

由分析可知：生物武器的種類有病毒；致病菌、生化毒劑等；不包括毒品。

B錯誤；ACD正確。

故選B。5、A【分析】【分析】

碳源的作用：①構成生物體細胞的物質和一些代謝產物；②既是碳源又是能源（有機碳源）。無機碳源：CO2、NaHCO3；有機碳源：糖類；脂肪酸、花生餅粉、石油等。

【詳解】

A；土壤樣品中包含目的菌株；可取土壤樣品溶于無菌水中制成菌懸液，再通過平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固定培養基上進行篩選，A正確；

B；組成脂肪的化學元素有C、H、O；要篩選可以產生脂肪酶的細菌，需要用以脂肪作為唯一碳源的固體培養基，B錯誤；

C；細菌是原核生物；沒有成形的細胞核和染色體，不會發生染色體變異，C錯誤；

D；透明圈大的菌落；酶活性不一定大，因此對初篩選的透明圈大的菌落要進行發酵培養，進一步對發酵液進行酶活性檢測，D錯誤。

故選A。

【點睛】6、D【分析】【分析】

植物組織培養技術：1；過程：離體的植物組織；器官或細胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）．2、原理：植物細胞的全能性．3、條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環境等）；②一定的營養（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。

【詳解】

A；自然生長莖段的消毒屬于外植體消毒；先用70%酒精，再用無菌水清洗，再用5%次氯酸鈉消毒處理，最后再用無菌水清洗，A錯誤；

B；培養瓶用專用封口膜封口的目的是防止雜菌污染；并不影響氣體交換，B錯誤；

C；組培苗鍛煉時采用蛭石作為栽培基質的原因是蛭石比較松軟；持水性也較好，有利于幼苗的生根和葉片的生長，C錯誤；

D；不帶葉片的菊花莖的切段可通過植物組織培養分化出芽和根這種器官發生的途徑形成完整的菊花植株；D正確。

故選D。7、B【分析】【分析】

根據題意和圖示分析可知：①是由RNA形成單鏈DNA的過程；為逆轉錄過程，②是以單鏈DNA合成雙鏈DNA的過程，是DNA分子復制過程；③④⑤是多聚酶鏈式反應擴增DNA片段，③是變性；④是復性、⑤是延伸階段；RNA單鏈A+U的堿基比例與逆轉錄形成的DNA分子中A+T的堿基比例相同。

【詳解】

A；①過程為逆轉錄過程；故催化①過程的酶是逆轉錄酶，A錯誤；

B；④為復性過程；發生的變化是引物與互補DNA鏈結合，B正確；

C；催化②過程（DNA復制）需要的酶是DNA聚合酶；催化⑤過程（DNA單鏈延伸）的酶是耐高溫DNA聚合酶--Taq酶，⑤過程進行的溫度是70℃，因此催化⑤過程的DNA聚合酶耐高溫，C錯誤；

D；根據堿基互補原則A-T；U-A，如果RNA單鏈中A與U之和占該鏈堿基含量的40%，則一個雙鏈DNA中，A與T之和也占該DNA堿基含量的40%，DNA中不含有U，D錯誤。

故選B。8、C【分析】【分析】

誘導多能干細胞（iPSc）是類似胚胎干細胞的一種細胞；是具有分化為成年動物體內的任何一種類型的細胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體的潛能。

誘導多能干細胞（iPSc）來源于生物自身的體細胞的誘導；誘導過程無需破壞胚胎，不會因為倫理問題限制在醫學上的應用，再移植回可生物體內，可避免免疫排斥反應。

【詳解】

A；為了說明誘導多能干細胞（iPSc）移植給急性心肌梗死小鼠的影響；該實驗需正常小鼠作為對照組，也需要急性心肌梗死小鼠為對照，A錯誤；

B；誘導多能干細胞可分化形成多種組織細胞；與高度分化的細胞相比，iPSc的分化潛能較強，B錯誤；

C；誘導多能干細胞（iPSc）來源于病鼠自身的體細胞的誘導；再移植回可病鼠體內可避免免疫排斥，C正確；

D；誘導多能干細胞（iPSc）可分化為心肌細胞；從而使急性心肌梗死小鼠的心肌電生理指標逐漸恢復正常，缺血性心肌病和急性心肌梗病因不同，不能通過增加心肌細胞得以治療，D錯誤。

故選C。二、多選題(共8題，共16分)9、A:B:C【分析】【分析】

1.生物武器是利用生物戰劑殺傷人員；牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構成了嚴重威脅。

2.轉基因生物的安全性問題包括食物安全；生物安全和環境安全。

3.“治療性克隆”將使人胚胎干細胞（簡稱ES細胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細胞移植到去核卵母細胞中構建形成重組胚胎；體外培養到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞（如神經細胞；肌肉細胞和血細胞），用于治療。

【詳解】

A；對待生物武器的態度應明確而堅定；即在任何情況下都不發展、不生產、不儲存生物武器，堅決禁止生物武器，A正確；

B；中國對于克隆人的態度是禁止生殖性克隆人；但不反對治療性克隆，B正確；

C；對轉基因植物外源DNA要進行認真選擇；避免產生對人體有害的或過敏的蛋白質，C正確；

D；一旦發現轉基因生物出現了安全性問題；要馬上停止實驗，并銷毀重組生物，D錯誤。

故選ABC。10、B:C:D【分析】【分析】

良種試管牛的繁殖過程：對供體和受體的選擇和處理（同期發情處理；超數排卵處理）；配種或進行人工授精、對胚胎的收集檢查培養或保存、進行胚胎移植。

【詳解】

A；處理供體甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超數排卵，A錯誤；

B；產生試管牛的過程中經過了兩性生殖細胞的融合過程；因此試管牛產生的生殖方式屬于有性生殖，B正確；

C；母本甲牛提供卵細胞、父本乙牛提供精子；試管牛細胞核中基因一半來源于父方，一半來源于母方，C正確；

D；體外受精和早期胚胎發育、胚胎移植等技術可以縮短繁殖周期；增加一生繁殖的后代數量，即該技術可充分發揮優良雌性個體的繁殖潛力，D正確。

故選BCD。

【點睛】11、A:D【分析】【分析】

培養基的概念及營養構成。

（1）概念：人們按照微生物對營養物質的不同需求；配制出的供其生長繁殖的營養基質。

（2）營養構成：各種培養基一般都含有水；碳源、氮源、無機鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求．例如，培養乳酸桿菌時需要在培養基中添加維生素，培養霉菌時需將培養基的pH調至酸性，培養細菌時需將pH調至中性或微堿性，培養厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。

【詳解】

A；平板上不含任何生長因子；若倒成平板后直接培養，出現菌落說明已被雜菌感染，因為該嗜熱菌不能在缺乏生長因子的培養基中生長，A正確；

B；制備平板時；先滅菌再倒平板，B錯誤；

C；圖中菌落生活在乙丙區域之間；說明同時需要乙和丙，C錯誤；

D；不同菌種所需生長因子不同；可利用生長圖形法篩選菌種，D正確。

故選AD。12、B:C【分析】【分析】

基因工程是指按人們的意愿；進行嚴格的設計，并通過體外重組DNA分子和轉基因技術，獲得人們需要的新的生物類型和生物產品。其基因改變的方向是認為決定的。

【詳解】

A；科學家將必需氨基酸含量多的的蛋白質相關基因導入植物中；或者改變這些氨基酸合成途徑中某種關鍵酶的活性，以提高氨基酸的含量，A錯誤；

B；可以將某些比如抗逆性、高產等基因導入植物體內；培育出高產、穩產、品質優良和抗逆性強的作物，B正確；

C；利用基因工程可以改造植物細胞的基因；使其能夠生產人類所需要的藥物，比如紫草寧等藥品，C正確；

D；用基因工程培育的抗蟲植物只含有抗蟲特性；但不能抗病毒，D錯誤。

故選BC。13、A:C:D【分析】【分析】

題圖分析：該圖為某個基因的部分片段；①不但包括腺嘌呤．還包括側鏈上的磷酸的脫氧核糖，為腺嘌呤脫氧核苷酸；②是磷酸和脫氧核糖之間的磷酸二酯鍵；③是堿基之間的氫鍵；④是含氮堿基和脫氧核糖之間的化學鍵。

【詳解】

A；圖示為DNA結構模式圖；圖中①所圈定的部位是腺嘌呤脫氧核苷酸，A錯誤；

B；DNA連接酶能使兩個脫氧核苷酸之間的化學鍵②磷酸二酯鍵形成；B正確；

C；刪去；圖中沒有⑤，限制酶作用于磷酸二酯鍵。

D；解旋酶作用于堿基對之間的氫鍵③處；使氫鍵斷開，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】14、A:C:D【分析】【分析】

據圖分析，過程①表示基因表達載體的構建過程，需用DNA連接酶將目的基因和運載體（質粒）連接形成重組Ti質粒。過程②表示將目的基因導入微生物細胞（農桿菌），需要用Ca2+處理；使其成為感受態細胞，使其易吸收周圍環境中的DNA分子。農桿菌侵染棉花后，將自身的Ti質粒上的T-DNA整合到棉花細胞的DNA上，然后利用棉花細胞進行植物組織培養，獲得抗蟲棉。

【詳解】

A、KanR為卡那霉素抗性基因；成功導入質粒的農桿菌具有卡那霉素抗性而普通農桿菌沒有，因此可使用含卡那霉素的培養基來篩選含重組質粒的農桿菌，A正確；

B；為使目的基因DNA片段和質粒DNA片段在切口處的黏性末端匹配；需要選擇能切出相同黏性末端的限制酶來進行切割，可以是同種限制酶，也可以是不同限制酶，但是必須要能產生相同黏性末端，B錯誤；

C；棉花細胞與農桿菌混合后；農桿菌在侵染棉花細胞時，可將自身的Ti質粒上的T-DNA整合到棉花細胞的DNA上，C正確；

D；植物組織培養時；培養基中生長素濃度高于細胞分裂素，可以誘導根的分化；若是細胞分裂素高于生長素濃度，則誘導芽的分化，從圖上可知，④過程分化出芽，⑤過程分化形成根，繼而形成試管苗，因此④和⑤中的培養基用到的激素的濃度不同，D正確。

故選ACD。15、C:D【分析】【分析】

將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法；農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可整合到受體細胞的染色體DNA上。基因表達載體常包括目的基因；啟動子、終止子、標記基因。標記基因是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

【詳解】

A；啟動子是位于DNA上RNA聚合酶的結合部位；mRNA是由基因啟動子后面的序列編碼而來的，若某基因是從人的細胞內提取mRNA經逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列，A正確；

B、引物的延伸方向為3'端，擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進行子鏈合成；B正確；

C；導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞不是乳腺細胞；而是受精卵或早期胚胎細胞，C錯誤；

D；農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞；并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據農桿菌的這一特點，將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物細胞中染色體的DNA上，D錯誤。

故選CD。16、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法。

（1）平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

【詳解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步驟①土樣應取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；

B；自生固氮菌是異養型生物；可用血細胞計數板或稀釋涂布平板法來計數土壤懸浮液中的菌體數，B錯誤；

C；步驟②需充分振蕩20min；主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中，C正確；

D；步驟④為稀釋涂布平板法接種；所用的接種工具是涂布器，該選擇培養基的特點是不添加氮源，利用的是空氣中的氮氣，D正確。

故選ACD。三、填空題(共7題，共14分)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】好氧C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO219、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2018～2520、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－221、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】高壓滅菌—2022、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩定性，可采用蛋白質工程技術替換少數氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質。【解析】采用蛋白質工程技術替換少數氨基酸，提高該酶的熱穩定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質。23、略

【分析】略【解析】營養無菌、無毒的環境適宜的溫度、pH和滲透壓氣體環境四、判斷題(共2題，共6分)24、A【分析】【詳解】

雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。25、B【分析】【詳解】

要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造基因中的堿基序列來完成，因為基因能指導蛋白質的生物合成，故說法錯誤。五、實驗題(共4題，共28分)26、略

【分析】【分析】

培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養基質，培養基中一般含有水；碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物種和氧氣的要求。固氮微生物可利用空氣中的氮氣，故培養基無需再加入氮源。純化微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）固氮菌可利用空氣中的氮氣作為氮源，所以Ashby培養基的營養成分主要包括水；無機鹽、碳源等；不需要額外加入氮源。將土壤稀釋液進行梯度稀釋后再接種的方法為稀釋涂布平板法，在Ashy平板上進行多次接種的目的是提高固氮菌的純度。

（2）固氮酶的活性越大；單位時間內的固氮量越大，所以為評估固氮酶的活性，可以檢測單位時間內的固氮量。

（3）S試劑可與IAA反應顯紅色；且顏色深淺與IAA濃度成正相關，所以可用蒸餾水對IAA母液進行梯度稀釋，加入S試劑制成標準顯色液，往上清液中加入S試劑，與標準顯示液進行比色，與上清液顏色相近的標準顯示液中IAA的濃度計為上清液中IAA的濃度。

【點睛】

本題考查固氮菌的培養和篩選，意在考查考生對所學知識的靈活應用能力。【解析】碳源稀釋涂布平板法提高固氮菌的純度單位時間內的固氮量用蒸餾水對IAA母液進行梯度稀釋，加入S試劑制成標準顯色液，往上清液中加入S試劑，與標準顯示液進行比色，與上清液顏色相近的標準顯示液中IAA的濃度計為上清液中IAA的濃度27、略

【分析】【分析】

1；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代謝類型是異養厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠將蔬菜中的葡萄糖氧化為乳酸。

2；泡菜的制作過程：按照清水與鹽的質量比為4：1的比例配制鹽水；將鹽、水煮沸冷卻。將經過預處理的新鮮蔬菜混合均勻，裝入泡萊壇內，裝至半壇時，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，繼續裝至八成滿，再徐徐注入配制好的鹽水，使鹽水沒過全部菜料，蓋好壇蓋。向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內乳酸菌發酵所需的無氧環境。在發酵過程中要注意經常向水槽中補充水。發酵時間長短受室內溫度的影響。

3；泡菜中的亞硝酸鹽含量可以用比色法測定；即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應生成重氮鹽，重氮鹽與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料。

（1）

乳酸菌的代謝類型是異養厭氧型；制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料；這是因為新鮮的蔬菜亞硝酸鹽的含量低。

（2）

將鹽水煮沸冷卻的目的是煮沸的目的是除去鹽水中的空氣和殺菌；冷卻的目的是防止高溫殺死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活動不受影響）；加入“老汁”的作用是“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短時間內成為優勢菌。

（3）

測定亞硝酸鹽含量的方法是比色法。即在鹽酸酸化條件下；亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結合后形成玫瑰紅色的染料，然后將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準顯色液進行目測比較，大致估算出亞硝酸鹽的含量。

【點睛】

本題考查制作泡菜，要求考生識記制作泡菜的原理和過程，理解用比色法測定亞硝酸鹽的含量，意在考查考生的識記能力和分析能力。【解析】（1）異養厭氧型亞硝酸鹽的含量低。

（2）煮沸的目的是除去鹽水中的空氣和殺菌；冷卻的目的是防止高溫殺死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活動不受影響）“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短時間內成為優勢菌。

（3）比色法對氨基苯磺酸玫瑰紅標準顯色液28、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質——抗原—抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動子是RNA聚合酶識別并結合的位點；能驅動基因的轉錄；如將強啟動子插入到玉米葉綠體某基因內部，則會破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達，則需要強啟動子和P基因不被破壞，因此應優先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質粒切開后構建重組表達載體。農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實驗中的作用是將強啟動子和P基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細胞染色體DNA上，因此將農桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進行植物組織培養，培養基中需加入G418進行篩選，此物質屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場所，線粒體是細胞有氧呼吸的主要場所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對沒有分化的薄壁細胞團；經液體懸浮培養可以分散成胚性單細胞，在適宜的培養基中，這種單細胞可以發育成胚狀體，再繼續發育成轉基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數以及玉米的基因型等。目前，組織培養過程中培養瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染。【解析】(1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強啟動子和P基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染29、略

【分析】【分析】

1；PCR擴增的過程是：目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈；引物與單鏈相應互補序列結合，然后在DNA聚合酶作用下進行延伸，如此重復循環多次。

2；構建基因表達載體過程時；目的基因應插在啟動子和終止子之間才能正常表達。

【詳解】

（1）PCR過程中每次循環兩次升溫（變性和延伸）和一次降溫（復性）；其中降溫（復性）的目的是讓兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。

（2）基因表達載體包括標記基因；目的基因；啟動子和終止子，科學家在構建基因表達載體過程時，目的基因應插在啟動子和終止子之間才能正常表達。單獨使用限制酶HindⅢ切割目的基因和載體后，由于部分基因反向連接，導致攜帶CDKN2B基因的重組質粒成功導入細胞后，約一半的細胞中沒有檢測到CDKN2B蛋白。為了避免這種現象的發生，可以同時用兩種酶進行切割，由于SmaⅠ會破壞CDKN2B基因，不能選用該酶切割，HindⅢ會破壞質粒的兩種標記基因，不能選用該酶切，PstⅠ和EcoRⅠ能切下完整的CDKN2B基因，并不會破壞抗四環素基因基因，因此為了避免這種現象的發生，可以同時用PstⅠ、EcoRⅠ分別對目的基因和載體進行酶切。

（3）來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質；因此要讓一個受精卵發育成多個個體，可采用胚胎分割技術，然后經移植獲得多胎。分割時應注意將囊胚的內細胞團均等分割。

【點睛】

本題考查基因工程和胚胎分隔技術相關知識，掌握基因工程和胚胎分割操作步驟是解決本題的關鍵。【解析】讓兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合啟動子終止子部分基因反向連接同時用PstⅠ、EcoRI分別對目的基因和載體進行酶切胚胎分割將囊胚的內細胞團均等分割六、綜合題(共3題，共12分)30、略

【分析】【分析】

平板劃線法操作過程：①將接種環放在火焰上灼燒；直到接種環燒紅。②在火焰旁冷卻接種環，并打開棉塞。③將試管口通過火焰。④將已冷卻的接種環伸入菌液中蘸取一環菌液。⑤將試管通過火焰，并塞上棉塞。⑥左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養皿。⑦灼燒接種環，待其冷卻后，從第一區域劃線的末端開始往第二區域內劃線。重復以上操作，在三；四、五區域內劃線。注意不要將最后一區的劃線與第一區相連。⑧將平板倒置放入培養箱中培養。

【詳解】

（1）結合題干；將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上，培養一段時間后在紙片周圍會形成透明的抑菌圈，根據抑菌圈的大小可以檢測測試菌對抗菌藥物的敏感程度，以指導臨床合理選用抗菌藥物，故藥敏試驗的目的是檢測測試菌對抗菌藥物的敏感程度，以指導臨床合理選用抗菌藥物，因變量是抑菌圈的大小。

（2）據圖可知K-B法接種測試菌的方法是稀釋涂布平板法；獲得純培養物的關鍵是防止雜菌污染。接種后的平板在培養時需要倒置，原因是既可以減少培養基中的水分過快地蒸發，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養基，造成污染。

（3）MIC是某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度，抑菌圈越大，MIC越小，對圖中測試菌而言，抗生素Ⅰ的抑菌圈較小，其MIC大于抗生素Ⅲ的MIC．在相關實驗操作均嚴謹規范的情況下，在含有抗生素Ⅳ的紙片周圍出現了較大的抑菌圈，但抑菌圈中存在有個別菌落，原因可能是抗生素Ⅳ對于野生型測試菌具有較強的抑制作用，但測試