DB12T 652-2016 轉基因耐除草劑大豆DAS-68416-4及其衍生品種定性檢測 實時熒光PCR法　　_第1頁
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B23DB12Detectionofgeneticallymodifiedplantsandderivedproducts—QualitativePCRmethodforherbicide-resistantsoybeanDAS-68416-4天津市市場和質量監督管理委員會發布I本標準起草單位：天津市農業質量標準與檢測技術研究所、中國農業科學院生物技術研究所、天轉基因耐除草劑大豆DAS-68416-4及其衍生品種定性檢測實時熒光PCR法本標準規定了轉基因耐除草劑大豆DAS-684本標準適用于轉基因耐除草劑大豆DAS-68416-4及其衍下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版GB/T6682分析實驗室用水規格和農業部2031號公告—8—2013轉基因植物及其NY/T672轉基因植物及其產品檢測通用要求Lectin基因LectingeneDAS-68416-4轉化體特異性序列event-specificsequenceofDAS-68416-4根據轉基因耐除草劑大豆DAS-68416-5.1.2.2DAS-68416-4轉化分析天平感量0.1g和0.1mg熒光定量PC5.3.5.1標準樣品和試樣實時熒光P）；31×—10μmol/LDAS-68416-4-F2.0μL10μmol/LDAS-68416-4-R2.0μL10μmol/LDAS-68416-4-P2.0μL 25.0μL表2Lectin內標基因PCR反應體系1× 0.5μL0.5μL0.5μL2.0μL—25.0μL的基因組DNA（或采用大豆DAS-68416-4與非轉基因大豆基因組相比的拷貝數分數為0.1%~1.0%的DNA溶液）作為陽性對照；以水作為空白對照。6.1Lectin內標準基因無典型擴增曲線，表明樣品中未檢出大豆成分，結果表述為“樣品中未檢測出6.2Lectin內標準基因出現典型擴增曲線，因耐除草劑大豆DAS-68416-4轉化體成分，檢測結果為陽性”。46.3Lectin內標準基因出現典型擴增曲線，擴增曲線，表明樣品中未檢測出DAS-68416-4轉化體成分，結果表述為“樣品中未檢測出轉基因耐除草劑大豆DAS-68416-4轉化體成分，檢測結果為之間，進行重復實驗。如重復實驗結果符合6.1～6.3的情形，依照6.1～6.3進行化體特異性序列，根據檢出參數情況，參照6.1～6.3對樣品進行判定。A.1Lectin基因實時熒光PCR擴增產物核苷酸序列（AccCTTCTATGCCCCTGACACAAAAAGGCTTGCA1GCCCTCTACTCCACCCCCATCCACATTTGGGACAAAGAAACCGGTAGCGCTTCTATGCCCCTGACACAAAAAGGCTTGCA61TAATTTAGT

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