ICS67.040

CCSX80

團體標準

T/XXXXXXX—XXXX

口服益生菌產品功效評價規范

Specificationforefficacyevaluationoforalprobioticproducts

XXXX-XX-XX發布XXXX-XX-XX實施

中國國際經濟技術合作促進會發布

T/XXXXXXX—XXXX

口服益生菌產品功效評價規范

1范圍

本文件規定了口服益生菌產品的術語和定義、原輔料要求、技術要求以及功效評價。

本文件適用于口服益生菌產品調節腸道菌群功效評價。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB4789.34食品安全國家標準食品微生物學檢驗雙歧桿菌檢驗

GB4789.35食品安全國家標準食品微生物學檢驗乳酸菌檢驗

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

口服益生菌產品oralbeautyproducts

添加了益生菌，且在保質期內益生菌數量符合一定要求的食品。

4原輔料要求

使用的益生菌菌株應滿足以下條件：

a)應明確菌株號和分離來源；

b)需由第三方機構進行鑒定、保藏和安全性評價；

c)需經過全基因組測序且有相關科學文獻支持；

d)有進行人體或臨床試驗研究的科學文獻支持其正面評價。

使用的益生菌菌種應符合國家衛生行政部門頒布的《可用于食品的菌種名單》、《可用于保健食

品的益生菌菌種名單》及有關公告的規定。名單及公告如規定了菌株的也應當符合其規定。

使用的其他食品配料、食品添加劑和食品營養強化劑應符合相應的要求。

5技術要求

口服益生菌產品在保質期內的活菌數量應符合表1的規定。

表1活菌數量

項目指標檢驗方法

保質期內益生菌活菌總數/(CFU/g)GB4789.35或GB4789.34或采用國內

1×107

或(CFU/mL)≥外認可的符合該菌種的相應檢測方法

口服益生菌產品其他技術指標應符合相應類別食品安全標準的規定。

6功效評價

試驗原則

6.1.1動物實驗和人體試食試驗所列指標均為必做項目。

6.1.2正常動物或腸道菌群紊亂模型動物任選其一。

1

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6.1.3受試樣品中含雙歧桿菌、乳桿菌以外的其它益生菌時，應在動物和人體試驗中加測該益生菌。

6.1.4在進行人體試食試驗時，應對受試樣品的食用安全性作進一步的觀察。

動物實驗

6.2.1實驗動物

推薦用近交系小鼠，18g～22g，單一性別，每組10～15只。

6.2.2劑量分組及受試樣品給予時間

實驗設三個劑量組和一個陰性對照組，以人體推薦量的10倍為其中的一個劑量組，另設二個劑量組，

必要時設陽性對照組。受試樣品給予時間14天，必要時可以延長至30天。

6.2.3實驗步驟

在給予受試樣品之前，無菌采取小鼠肛門內糞便0.1g，10倍系列稀釋，選擇合適的稀釋度分別接種

在各培養基上。培養后，以菌落形態、革蘭氏染色鏡檢、生化反應等鑒定計數菌落，計算出每克濕便中

的菌數，取對數后進行統計處理。最后一次給予受試樣品之后24h，與實驗前同樣方式取直腸糞便，檢

測腸道菌群，方法同上。

6.2.4觀察指標

體重、雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產氣莢膜梭菌。

6.2.5數據處理

資料可用方差分析，但需按方差分析的程序先進行方差齊性檢驗，方差齊，計算F值，F值＜F0.05，

結論：各組均數間差異無顯著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多個實驗組和一個對照組間均數的兩兩比較

方法進行統計；對非正態或方差不齊的數據進行適當的變量轉換，待滿足正態或方差齊要求后，用轉換

后的數據進行統計；若變量轉換后仍未達到正態或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統計。

6.2.6結果判定

比較實驗前后自身及組間雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產氣莢膜梭菌的變化情況，實驗組

實驗前后自身比較差異有顯著性，或實驗后實驗組與對照組組間比較差異有顯著性、且實驗組實驗前后

自身比較差異有顯著性，符合以下任一項，可以判定該受試樣品動物實驗結果陽性。

a)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌、腸球菌無明顯

變化；

b)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌和/或腸球菌明顯

增加，但增加的幅度低于雙歧桿菌/乳桿菌增加的幅度。

人體試食試驗

6.3.1受試者要求

6.3.1.1納入標準：

a)一個月內未患過胃腸疾病者；

b)一個月內未服用過抗生素者。

6.3.1.2受試者排除標準：

a)年齡在65歲以上者，妊娠或哺乳期婦女，過敏體質及對本保健食品過敏者；

b)合并有心血管、腦血管、肝、腎和造血系統等嚴重疾病及內分泌疾病，精神病患者；

c)停服受試樣品或中途加服其它藥物，無法判斷功效或資料不全者。

d)短期內服用與受試功能有關的物品，影響到對結果的判斷者。

6.3.2試驗設計及分組要求

2

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采用自身和組間兩種對照設計。按受試者的菌群狀況隨機分為試食和對照組，盡可能考慮影響結果

的主要因素如年齡、性別、飲食因素等，進行均衡性檢驗，以保證組間的可比性。每組受試者不少于50

例。

6.3.3受試樣品的劑量和使用方法

試食組按推薦服用方法、服用量服用受試產品，對照組可服用安慰劑或采用空白對照。受試樣品給

予時間14天，必要時可以延長至30天。試驗期間不改變原來的飲食習慣，正常飲食。

6.3.4觀察指標

6.3.4.1安全性指標：

a)一般狀況包括精神、睡眠、飲食、大小便、血壓等；

b)血、尿、便常規檢查；

c)肝、腎功能檢查（僅在試驗開始前檢查一次）；

d)胸片、心電圖、腹部B超檢查（僅在試驗開始前檢查一次）；

6.3.4.2功效性指標：雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、擬桿菌、產氣莢膜梭菌。

6.3.5試驗步驟

在給予受試樣品之前，無菌采取受試者糞便1.0g，10倍系列稀釋，選擇合適的稀釋度分別接種在各

培養基上。培養后，以菌落形態、革蘭氏染色鏡檢、生化反應等鑒定計數菌落，計算出每克濕便中的菌

數，取對數后進行統計處理。最后一次給予受試樣品之后24h，再次檢測，方法同上。

6.3.6數據處理

試驗數據為計量資料，可用t檢驗進行分析。凡自身對照資料可以采用配對t檢驗，兩組均數比較采

用成組t檢驗，后者需進行方差齊性檢驗，對非正態分布或方差不齊的數據進行適當的變量轉換，待滿

足正態方差齊后，用轉換的數據進行t檢驗；若轉換數據仍不能滿足正態方差齊要求，改用t’檢驗或秩

和檢驗；但變異系數太大（如CV＞50%）的資料應用秩和檢驗。

6.3.7結果判定

符合以下任一項，且試驗組試食前后自身比較及試食后試食組與對照組比較，差異均有顯著性，可

以判定該受試樣品具有有助于調節腸道菌群的作用。

a)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌、腸球菌、擬桿

菌無明顯變化；

b)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌和/或腸球菌、擬

桿菌明顯增加，但增加的幅度低于雙歧桿菌/乳桿菌增加的幅度。

3

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目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規范性引用文件.....................................................................1

3術語和定義.........................................................................1

4原輔料要求.........................................................................1

5技術要求...........................................................................1

6功效評價...........................................................................1

I

T/XXXXXXX—XXXX

口服益生菌產品功效評價規范

1范圍

本文件規定了口服益生菌產品的術語和定義、原輔料要求、技術要求以及功效評價。

本文件適用于口服益生菌產品調節腸道菌群功效評價。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB4789.34食品安全國家標準食品微生物學檢驗雙歧桿菌檢驗

GB4789.35食品安全國家標準食品微生物學檢驗乳酸菌檢驗

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

口服益生菌產品oralbeautyproducts

添加了益生菌，且在保質期內益生菌數量符合一定要求的食品。

4原輔料要求

使用的益生菌菌株應滿足以下條件：

a)應明確菌株號和分離來源；

b)需由第三方機構進行鑒定、保藏和安全性評價；

c)需經過全基因組測序且有相關科學文獻支持；

d)有進行人體或臨床試驗研究的科學文獻支持其正面評價。

使用的益生菌菌種應符合國家衛生行政部門頒布的