行業標準《洗滌用纖維素酶》編制說明一、任務來源1、任務來源本項目為xxx，項目編號xxx。主要起草單位：xxx，項目實施周期xxx個月。2、主要工作過程起草階段：征求意見階段：3、主要參加單位和工作組成員二、標準編制原則和主要內容1、標準編制原則本標準的修訂符合產業發展的原則，本著先進性、科學性、合理性、可操作性等原則以及標準的目標、統一性、協調性、適用性、一致性和規范性原則來進行本標準的修訂工作。本標準按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的要求進行編寫。方法建立過程中盡量采用目前酶制劑生產廠商以及洗滌劑生產廠商檢測實驗室普遍采用的分析技術及儀器，選擇準確、可行、便于操作的分析條件，保證檢測方法的可操作性和可重復性。該標準制定過程中主要參考了以下標準或文件：GB/T191包裝儲運圖示標志GB/T4789.2食品安全國家標準食品微生物學檢驗菌落總數測定GB/T4789.3食品安全國家標準食品微生物學檢驗大腸菌群計數GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方法GB/T603化學試劑試驗方法中所用制劑及制品的制備（GB/T603-2002，ISO6353-1：1982，NEQ）GB15258化學品安全標簽編寫規定GB/T9721-2006

化學試劑分子吸收分光光度法通則

(紫外和可見光部分)GB/T42239.1-2022洗滌用酶制劑第1部分：堿性蛋白酶2、標準主要內容纖維素酶目前已在洗滌劑中廣泛使用，纖維素酶它能將棉纖維上的蠟質剝離下來，同時纖維素酶能擴大織物纖維中的空穴，使內嵌在纖維內部的頑固污漬得到更好的去除。目前，立白、納愛斯等國內外知名洗滌劑生產商都有纖維素酶的應用。本標準規定了洗滌劑用纖維素酶的術語和定義、產品分類、技術要求、試驗方法、檢驗規則以及標志、包裝、運輸、貯存和保質期。本標準適用于經微生物發酵、提純等工藝制得的適用于洗滌劑工業的纖維素酶。2.1、產品分類本標準按照纖維素酶的形態分為兩類：液體劑型酶制劑和固體劑型酶制劑。2.2、要求2.2.1、感官要求本標準從色澤、氣味、狀態等方面對感官要求進行了規定。發酵產品由于生產過程比較復雜，每一批產品的顏色會有區別，但是產品顏色的深淺與酶活力的高低沒有任何關系，所以在標準中規定了顏色是一個過渡色；同時產品會有一些特殊的“發酵”氣味，經常會有客戶詢問廠家氣味的問題，所以在標準中規定了產品可能有發酵氣味。同時根據洗滌劑產品行業的特點，固體產品可以根據客戶的要求，制成多種顏色。2.2.2、理化要求酶活力是產品的一個重要的理化指標，但同時酶活力也是一個商業指標，廠家可以根據客戶的要求，生產出各種酶活力的產品。所以在標準中沒有規定酶活力具體的數值。建議這個數值在合同中規定。對于固體產品，規定了產品最小顆粒度指標。參照GB/T42239.1-2022洗滌用酶制劑第1部分：堿性蛋白酶，數值定為粒度<150μm≤0.5%。2.3、試驗方法本標準包括了纖維素酶酶活力，水分，粒度的檢測方法。與現有的纖維素酶活力檢測方法QB2583-2003《纖維素酶制劑》有較大差別，在對纖維素酶活力檢測方法不斷完善的過程中形成了新版本；對于顆粒產品，水分含量即干燥失重參照GB/T42239.1-2022洗滌用酶制劑第1部分：堿性蛋白酶6.5干燥失重。粒度檢測參照GB/T42239.1-2022洗滌用酶制劑第1部分：堿性蛋白酶附錄3粒度的測定篩分法進行。2.4、檢驗規則檢驗規則包括批次的確定、取樣規則、型式檢驗、出廠檢驗、判定規則等內容，對其都做了具體說明。2.5、標志、包裝、運輸、貯存和保質期產品的外包裝宜使用符合GB/T191要求的標志。關于產品標簽，規定了一些通用要求：如產品名稱、凈含量、生產者和（或）經銷者的名稱、地址和聯系方式、生產日期和保質期、貯存條件、批號及其他需要標示的內容。同時化學品應該有安全標簽，建議安全標簽的內容應該符合GB15258《化學品安全標簽編寫規定》的要求。產品保質期由廠家根據穩定性數據決定。三、主要試驗（或驗證）情況1、酶活力檢測方法1.1、方法介紹該標準在纖維素酶檢測方法多年運用的經驗和不斷完善的過程中提出。考察了不同廠家底物羧甲基纖維素鈉和DNS試劑對試驗的影響，不同試驗步驟對試驗結果的影響。本方法重點提出的地方：——對纖維素酶活力定義——羧甲基纖維素鈉溶液的配制——DNS試劑的配制——葡萄糖標準液及標曲的繪制——待測酶液吸光度范圍——操作程序——活力計算1.2、主要指標（1）不同廠家底物羧甲基纖維素鈉CMC和DNS對試驗的影響CMC：光復（天津市光復精細化工研究所）的試劑溶解后有少量雜質，沒有沉淀。sigma-C5678的試劑溶解后無雜質和沉淀。恒興（天津市恒興化學試劑制造有限公司）的試劑溶解后無雜質和沉淀。河北業之源化工有限公司的試劑溶解后無雜質和沉淀。結果差別較大，因此在提供酶活力數據時要注明廠家。原因是羧甲基纖維素鈉在中性或堿性時，溶液呈高粘度液，實驗中易造成誤差，且粘度不同所測活力不同。表1同一個樣品不同底物對比底物活性(u/g)活性平均值(u/g)新配光復10mg/mLCMC281828222826新配sigma-C567810mg/mLCMC830784188528新配國藥10mg/mLCMC599161606328新配恒興10mg/mLCMC205720241990新配河北10mg/mLCMC312430713017DNS：不同廠家的DNS試劑對纖維素酶活力的測試影響不大。表2同一個樣品同一底物不同DNS試劑對比DNS標曲活性(u/g)活性平均值(u/g)光復y=0.0026x-0.0628281828222826國藥y=0.0024x-0.0965267227062739（2）不同試驗步驟對試驗的影響對于檢測步驟，在與各單位的交流中發現爭議較大的是對于空白樣的處理，經過系列試驗證明，采用方法一無論怎么稀釋，樣品吸光度都達不到檢測要求，而采用我們的方法測試穩定性較好。表3同一樣品同一底物同一DNS不同測試方法方法一方法二稀釋倍數吸光度酶活力稀釋倍數吸光度酶活力稀釋250倍0.1793216稀釋130倍0.2452096稀釋200倍0.1822602稀釋120倍0.2962237稀釋125倍0.1931694稀釋110倍0.3142148稀釋100倍0.2261519稀釋100倍0.3372067注：方法一空白樣先加酶液再煮沸顯色，方法二為我們的檢測方法（3）吸光度在0.29-0.33區間時纖維素酶酶活力數值更穩定。表4吸光度區間測定樣品1樣品2樣品3稀釋倍數吸光度酶活力稀釋倍數吸光度酶活力稀釋倍數吸光度酶活力稀釋180倍0.1922433稀釋250倍0.2454637稀釋450倍0.2397127稀釋150倍0.2652568稀釋220倍0.2984125稀釋420倍0.2907709稀釋120倍0.2962238稀釋210倍0.3224187稀釋410倍0.3137991稀釋110倍0.3142149稀釋170倍0.3583691稀釋400倍0.3298112稀釋100倍0.3372068稀釋160倍0.3543443稀釋350倍0.36974441.3、方法精密度根據統計學計算，方法精密度小于6.0%（實驗數據見表4不同實驗室驗證結果）1.4、方法學驗證本方法經方法學研究，驗證如下：——不同廠家底物對試驗影響顯著——不同DNS試劑無顯著影響。——測試步驟對結果影響顯著。1.5、不同實驗室驗證結果實驗介紹實驗數據收集主要在山西勇寧記科技有限公司與山西大學化學化工學院兩個實驗室進行，根據實驗指導，各實驗室數據收集已經完成，經分析報告以下部分會展示不同實驗室之間和不同樣品之間的對比情況。表4樣品活性均值表樣品活性（U/g）勇寧記山西大學樣品132573203樣品225342608樣品331203082樣品412491233樣品528353007樣品662776069樣品781348094四、標準中如果涉及專利，應有明確的知識產權說明未涉及專利等知識產權問題。五、產業化情況、推廣應用論證和預期達到的經濟效果等情況洗滌行業是酶制劑最重要應用領域之一，在全球范圍內，每年所生產的酶制劑中，有三分之一被應用于洗滌行業。在發達國家，洗滌用品加酶已逐漸成為新產品開發的標準配置。從最新發布的中國洗滌用品行業發展十三五規劃中可以看出，目前我國洗衣粉加酶比例已高達80%。行業協會也在積極引導國內洗滌用品往液體化、濃縮化、綠色化的方向創新發展。但是缺乏統一的洗滌用酶制劑標準，使得傳統的加酶洗衣粉和新興的加酶洗滌劑都缺乏權威的檢測方法和監管依據，很容易被不良企業拿來作為概念炒作并用劣質產品低價競爭，從而破壞新興產品市場，打擊消費者信任度，壓抑業內優秀企業的積極性，阻礙行業規劃的發展進程。在此背景下，制定和推出洗滌用酶制劑質量規格及測試方法，對于我國洗滌行業規范含酶類洗滌用品細分領域的市場，指導行業內企業創新開發新產品，杜絕不良企業用假冒偽劣產品欺騙消費者，促進洗滌行業快速、良性、正常發展有重要的意義，同時標準的出臺對于監管和規范含纖維素酶的洗滌用品的上市也具有重要指導意義。六、采