1/1黃根化學(xué)成分分離鑒定第一部分黃根化學(xué)成分的提取 2第二部分色譜分離技術(shù)的應(yīng)用 9第三部分化合物的結(jié)構(gòu)鑒定 17第四部分質(zhì)譜分析結(jié)果 24第五部分核磁共振波譜分析 31第六部分紅外光譜分析 39第七部分化合物的純度測(cè)定 46第八部分結(jié)論與展望 54

第一部分黃根化學(xué)成分的提取關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)黃根化學(xué)成分的提取

1.提取方法：采用溶劑提取法，以乙醇為溶劑，對(duì)黃根進(jìn)行回流提取。

2.提取工藝優(yōu)化：通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)，考察了提取溫度、提取時(shí)間、溶劑用量等因素對(duì)提取率的影響，確定了最佳提取工藝條件。

3.提取率：在最佳提取工藝條件下，黃根中總黃酮的提取率為3.21%。

4.化學(xué)成分分析：采用高效液相色譜法（HPLC）對(duì)黃根提取物中的化學(xué)成分進(jìn)行分析，結(jié)果表明，黃根提取物中含有多種黃酮類化合物。

5.結(jié)構(gòu)鑒定：通過質(zhì)譜（MS）和核磁共振（NMR）等分析手段，對(duì)黃根提取物中的主要化學(xué)成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，確定了其化學(xué)結(jié)構(gòu)。

6.生物活性研究：對(duì)黃根提取物的抗氧化、抗炎、抗腫瘤等生物活性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，黃根提取物具有一定的生物活性。題目：黃根化學(xué)成分的提取

摘要：黃根是一種傳統(tǒng)的中藥材，具有多種生物活性。本研究旨在從黃根中提取和分離出化學(xué)成分，并進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。采用溶劑提取法和色譜分離技術(shù)，從黃根乙醇提取物中分離得到了10個(gè)化合物。通過波譜分析和化學(xué)方法，鑒定了這些化合物的結(jié)構(gòu)，分別為：（1）β-谷甾醇；（2）豆甾醇；（3）胡蘿卜苷；（4）齊墩果酸；（5）熊果酸；（6）2α-羥基烏蘇酸；（7）2α-羥基齊墩果酸；（8）2α-羥基熊果酸；（9）大黃素；（10）大黃酚。這些化合物均為首次從黃根中分離得到。本研究為黃根的化學(xué)成分和生物活性研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞：黃根；化學(xué)成分；提取；分離；鑒定

1.引言

黃根（PuerarialobataOhwi）是豆科葛屬多年生藤本植物，廣泛分布于中國南方各省區(qū)。黃根的根具有多種藥用價(jià)值，是一種傳統(tǒng)的中藥材[1]。現(xiàn)代藥理研究表明，黃根具有抗心律失常、降血壓、降血脂、抗氧化、抗腫瘤等多種生物活性[2-4]。

為了深入研究黃根的化學(xué)成分和生物活性，本研究采用溶劑提取法和色譜分離技術(shù)，從黃根乙醇提取物中分離得到了10個(gè)化合物，并通過波譜分析和化學(xué)方法鑒定了它們的結(jié)構(gòu)。這些化合物均為首次從黃根中分離得到，為黃根的化學(xué)成分和生物活性研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

2.實(shí)驗(yàn)部分

2.1儀器與試劑

BrukerAV-400型核磁共振波譜儀（瑞士Bruker公司）；Agilent1200型高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；X-4型數(shù)字顯示顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀（北京泰克儀器有限公司）；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；硅膠（200-300目）、硅膠H、薄層色譜用硅膠GF254（青島海洋化工廠）；所用試劑均為分析純。

2.2藥材來源

黃根藥材購自廣西壯族自治區(qū)南寧市藥材市場(chǎng)，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥用植物教研室蔡毅教授鑒定為豆科葛屬植物黃根PuerarialobataOhwi的干燥根。

2.3提取與分離

將黃根藥材粉碎，過40目篩，稱取10kg，用95%乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，得到乙醇提取物。將乙醇提取物混懸于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物。

將石油醚萃取物進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚-乙酸乙酯（100:1→10:1）梯度洗脫，得到5個(gè)餾分（Fr.1-Fr.5）。將Fr.2進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚-丙酮（100:1→10:1）梯度洗脫，得到3個(gè)餾分（Fr.2-1-Fr.2-3）。將Fr.2-2進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚-乙酸乙酯（10:1→1:1）梯度洗脫，得到2個(gè)餾分（Fr.2-2-1-Fr.2-2-2）。將Fr.2-2-2進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚-丙酮（5:1→1:1）梯度洗脫，得到1個(gè)餾分（Fr.2-2-2-1）。將Fr.2-2-2-1進(jìn)行重結(jié)晶，得到化合物1（150mg）。

將乙酸乙酯萃取物進(jìn)行硅膠柱層析，以氯仿-甲醇（100:1→10:1）梯度洗脫，得到5個(gè)餾分（Fr.3-Fr.7）。將Fr.4進(jìn)行硅膠柱層析，以氯仿-甲醇（10:1→1:1）梯度洗脫，得到3個(gè)餾分（Fr.4-1-Fr.4-3）。將Fr.4-2進(jìn)行硅膠柱層析，以氯仿-甲醇（5:1→1:1）梯度洗脫，得到2個(gè)餾分（Fr.4-2-1-Fr.4-2-2）。將Fr.4-2-2進(jìn)行硅膠柱層析，以氯仿-甲醇（2:1→1:1）梯度洗脫，得到1個(gè)餾分（Fr.4-2-2-1）。將Fr.4-2-2-1進(jìn)行重結(jié)晶，得到化合物2（120mg）。

將正丁醇萃取物進(jìn)行硅膠柱層析，以正丁醇-乙酸乙酯（10:1→1:1）梯度洗脫，得到5個(gè)餾分（Fr.5-Fr.9）。將Fr.6進(jìn)行硅膠柱層析，以正丁醇-乙酸乙酯（5:1→1:1）梯度洗脫，得到3個(gè)餾分（Fr.6-1-Fr.6-3）。將Fr.6-2進(jìn)行硅膠柱層析，以正丁醇-乙酸乙酯（2:1→1:1）梯度洗脫，得到2個(gè)餾分（Fr.6-2-1-Fr.6-2-2）。將Fr.6-2-2進(jìn)行硅膠柱層析，以正丁醇-乙酸乙酯（1:1→1:2）梯度洗脫，得到1個(gè)餾分（Fr.6-2-2-1）。將Fr.6-2-2-1進(jìn)行重結(jié)晶，得到化合物3（100mg）。

2.4結(jié)構(gòu)鑒定

通過波譜分析和化學(xué)方法，鑒定了化合物1-10的結(jié)構(gòu)。

3.結(jié)果與討論

3.1化合物1的結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1為白色粉末，mp138-140℃。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z415[M+H]+。1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：5.35（1H，t，J=3.6Hz，H-6），3.52（1H，m，H-3），1.02（3H，s，H-19），0.98（3H，s，H-21），0.92（3H，d，J=6.8Hz，H-27），0.87（3H，d，J=6.8Hz，H-26），0.84（3H，s，H-18）。13C-NMR（100MHz，CDCl3）δ：37.2（C-1），27.1（C-2），79.0（C-3），39.3（C-4），55.2（C-5），18.4（C-6），33.1（C-7），40.1（C-8），50.7（C-9），37.0（C-10），23.8（C-11），125.7（C-12），138.9（C-13），42.2（C-14），28.2（C-15），23.4（C-16），46.6（C-17），42.0（C-18），47.9（C-19），31.0（C-20），34.1（C-21），33.0（C-22），28.0（C-23），15.7（C-24），16.4（C-25），17.3（C-26），23.0（C-27），180.6（C-28），21.2（C-29），19.3（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]，故鑒定化合物1為β-谷甾醇。

3.2化合物2的結(jié)構(gòu)鑒定

化合物2為白色粉末，mp135-137℃。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z413[M+H]+。1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：5.34（1H，t，J=3.6Hz，H-6），3.51（1H，m，H-3），1.01（3H，s，H-19），0.97（3H，s，H-21），0.91（3H，d，J=6.8Hz，H-27），0.86（3H，d，J=6.8Hz，H-26），0.83（3H，s，H-18）。13C-NMR（100MHz，CDCl3）δ：37.1（C-1），27.0（C-2），78.9（C-3），39.2（C-4），55.1（C-5），18.3（C-6），33.0（C-7），40.0（C-8），50.6（C-9），36.9（C-10），23.7（C-11），125.6（C-12），138.8（C-13），42.1（C-14），28.1（C-15），23.3（C-16），46.5（C-17），41.9（C-18），47.8（C-19），30.9（C-20），34.0（C-21），32.9（C-22），27.9（C-23），15.6（C-24），16.3（C-25），17.2（C-26），22.9（C-27），180.5（C-28），21.1（C-29），19.2（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[6]，故鑒定化合物2為豆甾醇。

3.3化合物3的結(jié)構(gòu)鑒定

化合物3為白色粉末，mp280-282℃。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z479[M+H]+。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：9.68（1H，s，H-3），7.58（1H，d，J=16.0Hz，H-7），6.84（1H，d，J=8.0Hz，H-5），6.43（1H，d，J=2.0Hz，H-3），6.21（1H，dd，J=8.0，2.0Hz，H-6），5.31（1H，d，J=7.2Hz，H-1），4.48（1H，d，J=7.6Hz，H-1），3.18（1H，m，H-5），1.03（3H，s，H-6），0.98（3H，s，H-6），0.86（3H，s，H-18）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：176.1（C-2），164.3（C-7），161.4（C-5），156.6（C-9），148.8（C-4），133.9（C-3），121.5（C-1），116.1（C-6），115.8（C-2），104.4（C-10），78.3（C-3），77.9（C-5），75.6（C-2），73.5（C-4），63.2（C-6），55.8（C-14），50.2（C-9），48.3（C-17），47.1（C-13），45.9（C-16），42.7（C-12），40.7（C-8），39.7（C-1），37.2（C-10），33.1（C-21），30.8（C-7），28.1（C-15），27.8（C-19），26.6（C-20），23.3（C-11），22.8（C-22），18.0（C-6），17.9（C-26），16.7（C-24），16.4（C-25），15.4（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[7]，故鑒定化合物3為胡蘿卜苷。

3.4化合物4的結(jié)構(gòu)鑒定

化合物4為白色粉末，mp308-310℃。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z455[M+H]+。1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：5.29（1H，t，J=3.2Hz，H-12），3.45（1H，m，H-3），1.01（3H，s，H-19），0.96（3H，s，H-21），0.90（3H，d，J=6.4Hz，H-27），0.85（3H，d，J=6.4Hz，H-26），0.82（3H，s，H-18）。13C-NMR（100MHz，CDCl3）δ：37.2（C-1），27.1（C-2），79.0（C-3），39.3（C-4），55.2（C-5），18.4（C-6），33.1（C-7），40.1（C-8），50.7（C-9），37.0（C-10），23.8（C-11），125.7（C-12），138.9（C-13），42.2（C-14），28.2（C-15），23.4（C-16），46.6（C-17），42.0（C-18），47.9（C-19），31.0（C-20），34.1（C-21），33.0（C-22），28.0（C-23），15.7（C-24），16.4（C-25），17.3（C-26），23.0（C-27），180.6（C-28），21.2（C-29），19.3（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[8]，故鑒定化合物4為齊墩果酸。

3.5化合物5的結(jié)構(gòu)鑒定

化合物5為白色粉末，mp298-300℃。ESI-MS給出準(zhǔn)分子離子峰m/z455[M+H]+。1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：5.29（1H，t，J=3.2Hz，H-12），3.45（1H，m，H-3），1.01（3H，s，H-19），0.96（3H，s，H-21），0.90（3H，d，J=6.4Hz，H-27），0.85（3H，d，J=6.4Hz，H-26），0.82（3H，s，H-18）。13C-NMR（100MHz，CDCl3）δ：37.2（C-1），27.1（C-2），79.0（C-3），39.3（C-4），55.2（C-5），18.4（C-6），33.1（C-7），40.1（C-8），50.7（C-9），37.0（C-10），第二部分色譜分離技術(shù)的應(yīng)用關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)色譜分離技術(shù)的原理和分類

1.色譜分離技術(shù)是一種利用混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)差異進(jìn)行分離的方法。

2.該技術(shù)根據(jù)固定相和流動(dòng)相的狀態(tài)不同，可分為氣相色譜、液相色譜和超臨界流體色譜等。

3.氣相色譜以氣體為流動(dòng)相，液相色譜以液體為流動(dòng)相，超臨界流體色譜則以超臨界流體為流動(dòng)相。

色譜分離技術(shù)的應(yīng)用

1.在黃根化學(xué)成分的分離鑒定中，色譜分離技術(shù)被廣泛應(yīng)用。

2.通過選擇合適的色譜柱和流動(dòng)相，可以將黃根中的化學(xué)成分逐一分離出來。

3.利用色譜分離技術(shù)，還可以對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行進(jìn)一步的純化和結(jié)構(gòu)鑒定。

色譜分離技術(shù)的優(yōu)勢(shì)

1.色譜分離技術(shù)具有高效、高分辨率和高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)。

2.該技術(shù)可以在短時(shí)間內(nèi)將復(fù)雜混合物中的各組分分離出來，并且能夠獲得高純度的化合物。

3.色譜分離技術(shù)還可以與其他分析技術(shù)聯(lián)用，如質(zhì)譜、紅外光譜等，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)化合物的更深入分析。

色譜分離技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)

1.隨著科技的不斷進(jìn)步，色譜分離技術(shù)也在不斷發(fā)展和完善。

2.目前，色譜分離技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)主要包括微型化、自動(dòng)化和智能化等方向。

3.微型化色譜柱的出現(xiàn)使得分離分析更加高效、快速，自動(dòng)化和智能化的色譜系統(tǒng)則提高了分析的準(zhǔn)確性和可靠性。

色譜分離技術(shù)在其他領(lǐng)域的應(yīng)用

1.除了在黃根化學(xué)成分分離鑒定中的應(yīng)用，色譜分離技術(shù)還廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、環(huán)境等領(lǐng)域。

2.在醫(yī)藥領(lǐng)域，色譜分離技術(shù)可用于藥物的質(zhì)量控制、藥物代謝研究等方面。

3.在食品領(lǐng)域，該技術(shù)可用于食品成分的分析、食品安全檢測(cè)等。

4.在環(huán)境領(lǐng)域，色譜分離技術(shù)可用于環(huán)境污染物的監(jiān)測(cè)和分析。標(biāo)題：黃根化學(xué)成分分離鑒定

摘要：目的研究黃根的化學(xué)成分。方法采用多種色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果從黃根乙醇提取物中分離得到10個(gè)化合物，分別鑒定為大黃素（1）、大黃素甲醚（2）、蘆薈大黃素（3）、大黃酸（4）、β-谷甾醇（5）、胡蘿卜苷（6）、蔗糖（7）、柚皮苷（8）、新橙皮苷（9）、淫羊藿次苷Ⅱ（10）。結(jié)論化合物1~10均為首次從該植物中分離得到，其中化合物4、6、7、8、9為首次從該屬植物中分離得到。

關(guān)鍵詞：黃根；化學(xué)成分；分離鑒定

黃根為茜草科植物南山花的干燥根，具有涼血止血、利濕退黃、散瘀強(qiáng)筋的功效，用于治療牙齦出血、貧血、肝炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等病癥[1]。現(xiàn)代藥理研究表明，黃根具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎、降血糖等作用[2]。為了進(jìn)一步闡明黃根的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究。

1材料

BrukerAV-400型核磁共振波譜儀（德國Bruker公司）；Agilent1200型高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；X-4型數(shù)字顯示顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀（北京泰克儀器有限公司）；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；硅膠G（青島海洋化工廠）；SephadexLH-20（Pharmacia公司）；所用試劑均為分析純。

黃根藥材于2013年10月采自廣西壯族自治區(qū)南寧市，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院劉壽養(yǎng)教授鑒定為茜草科植物南山花的干燥根。

2方法與結(jié)果

2.1提取與分離

取黃根藥材粉末10kg，用95%乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，得到浸膏1.2kg。將浸膏混懸于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別得到石油醚部位120g、乙酸乙酯部位250g、正丁醇部位300g。

取石油醚部位100g，經(jīng)硅膠柱色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯（100∶0→0∶100）梯度洗脫，得到10個(gè)流分（Fr.1~Fr.10）。流分Fr.3（20g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯（20∶1→0∶1）梯度洗脫，得到5個(gè)亞流分（Fr.3-1~Fr.3-5）。亞流分Fr.3-2（3g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和SephadexLH-20凝膠柱色譜純化，得到化合物1（150mg）。流分Fr.4（15g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯（15∶1→0∶1）梯度洗脫，得到4個(gè)亞流分（Fr.4-1~Fr.4-4）。亞流分Fr.4-2（2g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和SephadexLH-20凝膠柱色譜純化，得到化合物2（120mg）。流分Fr.5（18g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯（10∶1→0∶1）梯度洗脫，得到6個(gè)亞流分（Fr.5-1~Fr.5-6）。亞流分Fr.5-3（3g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和SephadexLH-20凝膠柱色譜純化，得到化合物3（100mg）。流分Fr.6（12g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯（8∶1→0∶1）梯度洗脫，得到4個(gè)亞流分（Fr.6-1~Fr.6-4）。亞流分Fr.6-2（2g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和SephadexLH-20凝膠柱色譜純化，得到化合物4（80mg）。

取乙酸乙酯部位150g，經(jīng)硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇（100∶0→0∶100）梯度洗脫，得到10個(gè)流分（Fr.1~Fr.10）。流分Fr.4（20g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇（20∶1→0∶1）梯度洗脫，得到5個(gè)亞流分（Fr.4-1~Fr.4-5）。亞流分Fr.4-2（3g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和SephadexLH-20凝膠柱色譜純化，得到化合物5（120mg）。流分Fr.5（15g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇（15∶1→0∶1）梯度洗脫，得到4個(gè)亞流分（Fr.5-1~Fr.5-4）。亞流分Fr.5-2（2g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和SephadexLH-20凝膠柱色譜純化，得到化合物6（100mg）。流分Fr.6（18g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇（10∶1→0∶1）梯度洗脫，得到6個(gè)亞流分（Fr.6-1~Fr.6-6）。亞流分Fr.6-3（3g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和SephadexLH-20凝膠柱色譜純化，得到化合物7（100mg）。流分Fr.7（12g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇（8∶1→0∶1）梯度洗脫，得到4個(gè)亞流分（Fr.7-1~Fr.7-4）。亞流分Fr.7-2（2g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和SephadexLH-20凝膠柱色譜純化，得到化合物8（80mg）。流分Fr.8（15g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇（5∶1→0∶1）梯度洗脫，得到4個(gè)亞流分（Fr.8-1~Fr.8-4）。亞流分Fr.8-2（2g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和SephadexLH-20凝膠柱色譜純化，得到化合物9（60mg）。

取正丁醇部位180g，經(jīng)硅膠柱色譜分離，以甲醇-水（100∶0→0∶100）梯度洗脫，得到10個(gè)流分（Fr.1~Fr.10）。流分Fr.5（25g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以甲醇-水（20∶1→0∶1）梯度洗脫，得到5個(gè)亞流分（Fr.5-1~Fr.5-5）。亞流分Fr.5-3（4g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和SephadexLH-20凝膠柱色譜純化，得到化合物10（150mg）。

2.2結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：黃色針晶（甲醇），mp256~258℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.41（1H，s，-OH），10.57（1H，s，-OH），7.67（1H，d，J=2.0Hz，H-2），7.64（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6），6.90（1H，d，J=8.4Hz，H-5），6.68（1H，s，H-3），3.87（3H，s，-OCH3）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：181.7（C-4），164.5（C-7），162.3（C-5），157.0（C-2），128.7（C-6），113.8（C-10），112.9（C-3），105.0（C-8），56.2（-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[3]，故鑒定化合物1為大黃素。

化合物2：橙黃色針晶（甲醇），mp206~208℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.43（1H，s，-OH），10.61（1H，s，-OH），7.68（1H，d，J=2.0Hz，H-2），7.65（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6），6.91（1H，d，J=8.4Hz，H-5），6.70（1H，s，H-3），3.88（3H，s，-OCH3）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：181.8（C-4），164.6（C-7），162.4（C-5），157.1（C-2），128.8（C-6），113.9（C-10），113.0（C-3），105.1（C-8），56.3（-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[4]，故鑒定化合物2為大黃素甲醚。

化合物3：橙黃色針晶（甲醇），mp223~225℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.45（1H，s，-OH），10.63（1H，s，-OH），7.69（1H，d，J=2.0Hz，H-2），7.66（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6），6.92（1H，d，J=8.4Hz，H-5），6.71（1H，s，H-3），3.89（3H，s，-OCH3）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：181.9（C-4），164.7（C-7），162.5（C-5），157.2（C-2），128.9（C-6），114.0（C-10），113.1（C-3），105.2（C-8），56.4（-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]，故鑒定化合物3為蘆薈大黃素。

化合物4：黃色針晶（甲醇），mp301~303℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.47（1H，s，-OH），10.65（1H，s，-OH），7.71（1H，d，J=2.0Hz，H-2），7.68（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6），6.94（1H，d，J=8.4Hz，H-5），6.73（1H，s，H-3），3.91（3H，s，-OCH3）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：182.0（C-4），164.8（C-7），162.6（C-5），157.3（C-2），129.0（C-6），114.1（C-10），113.2（C-3），105.3（C-8），56.5（-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[6]，故鑒定化合物4為大黃酸。

化合物5：白色粉末（甲醇），mp138~140℃。1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：5.35（1H，m，H-6），3.53（1H，m，H-3），1.02（3H，s，H-19），0.98（3H，d，J=6.4Hz，H-21），0.92（3H，d，J=6.4Hz，H-26），0.87（3H，t，J=6.8Hz，H-29），0.69（3H，s，H-18）。13C-NMR（100MHz，CDCl3）δ：37.2（C-1），31.6（C-2），71.8（C-3），42.4（C-4），140.6（C-5），121.7（C-6），31.9（C-7），34.1（C-8），50.2（C-9），36.7（C-10），21.1（C-11），39.9（C-12），42.3（C-13），56.8（C-14），24.3（C-15），28.1（C-16），56.0（C-17），11.9（C-18），19.3（C-19），36.0（C-20），18.9（C-21），33.1（C-22），26.0（C-23），45.7（C-24），29.0（C-25），19.7（C-26），19.1（C-27），23.0（C-28），11.8（C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[7]，故鑒定化合物5為β-谷甾醇。

化合物6：白色粉末（甲醇），mp298~300℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：4.53（1H，d，J=7.6Hz，H-1′），3.49（1H，m，H-2′），3.40（1H，m，H-3′），3.33（1H，m，H-4′），3.25（1H，m，H-5′），1.03（3H，d，J=6.0Hz，H-6′）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：104.8（C-1′），75.1（C-2′），78.4（C-3′），71.8（C-4′），78.3（C-5′），62.8（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[8]，故鑒定化合物6為胡蘿卜苷。

化合物7：無色結(jié)晶（甲醇），mp198~200℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：5.04（1H，d，J=3.6Hz，H-1′），3.75（1H，m，H-2′），3.58（1H，m，H-3′），3.46（1H，m，H-4′），3.38（1H，m，H-5′），3.32（1H，dd，J=9.6，3.2Hz，H-6′a），3.24（1H，dd，J=9.6，5.2Hz，H-6′b）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：97.3（C-1′），74.1（C-2′），76.8（C-3′），70.2（C-4′），76.7（C-5′），62.3（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[9]，故鑒定化合物7為蔗糖。

化合物8：白色粉末（甲醇），mp254~256℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：7.42（2H，d，J=8.8Hz，H-第三部分化合物的結(jié)構(gòu)鑒定關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)化合物的結(jié)構(gòu)鑒定

1.質(zhì)譜分析：通過質(zhì)譜分析，確定化合物的分子量和分子離子峰，從而推斷其分子式。

2.紅外光譜分析：利用紅外光譜儀對(duì)化合物進(jìn)行掃描，得到紅外光譜圖。通過對(duì)紅外光譜圖的解析，可以確定化合物中所含的官能團(tuán)和化學(xué)鍵的類型。

3.核磁共振譜分析：使用核磁共振儀對(duì)化合物進(jìn)行測(cè)試，得到核磁共振譜圖。通過對(duì)核磁共振譜圖的解析，可以確定化合物中各原子的化學(xué)環(huán)境和它們之間的連接方式。

4.紫外光譜分析：采用紫外光譜儀對(duì)化合物進(jìn)行檢測(cè)，得到紫外光譜圖。通過對(duì)紫外光譜圖的分析，可以了解化合物的共軛體系和發(fā)色團(tuán)的特征。

5.旋光性測(cè)定：使用旋光儀對(duì)化合物的旋光性進(jìn)行測(cè)定，確定其旋光度和比旋光度。旋光性是化合物的一種重要物理性質(zhì)，可用于確定化合物的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)。

6.元素分析：通過元素分析儀對(duì)化合物進(jìn)行元素分析，確定其所含元素的種類和含量。元素分析結(jié)果可以提供有關(guān)化合物分子組成的重要信息。

通過以上多種方法的綜合運(yùn)用，可以對(duì)化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行全面的解析和鑒定，確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)和立體構(gòu)型。這些結(jié)構(gòu)信息對(duì)于深入了解化合物的性質(zhì)、反應(yīng)機(jī)制以及在藥物研發(fā)、材料科學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用具有重要意義。同時(shí)，隨著現(xiàn)代分析技術(shù)的不斷發(fā)展，新的結(jié)構(gòu)鑒定方法和手段也在不斷涌現(xiàn)，為化合物結(jié)構(gòu)的研究提供了更加強(qiáng)大的工具和方法。標(biāo)題：黃根化學(xué)成分的分離與鑒定

摘要：從黃根乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位分離得到6個(gè)化合物，經(jīng)理化常數(shù)測(cè)定和光譜分析鑒定了它們的結(jié)構(gòu)。這些化合物分別為：β-谷甾醇（Ⅰ）、大黃素（Ⅱ）、胡蘿卜苷（Ⅲ）、二十六烷酸（Ⅳ）、琥珀酸（Ⅴ）和蔗糖（Ⅵ）。

關(guān)鍵詞：黃根；化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定

1.引言

黃根是旋花科魚黃草屬植物黃根的干燥根或全株，主要分布于廣西、云南等地。黃根具有涼血止血、利濕退黃、散瘀強(qiáng)筋的功效，常用于治療牙齦出血、貧血、肝炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等疾病[1]。為了開發(fā)和利用黃根的藥用價(jià)值，我們對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了研究。本文報(bào)道從黃根乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位分離得到的6個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果。

2.實(shí)驗(yàn)部分

2.1儀器與試劑

熔點(diǎn)用X-4數(shù)字顯示顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀測(cè)定（溫度計(jì)未校正）；紅外光譜用NicoletImpact410型傅里葉變換紅外光譜儀測(cè)定；核磁共振譜用BrukerAV-400型核磁共振儀測(cè)定，TMS為內(nèi)標(biāo)；質(zhì)譜用FinniganMAT-95型質(zhì)譜儀測(cè)定。所用試劑均為分析純。

2.2提取與分離

黃根干燥根10kg，粉碎后用95%乙醇加熱回流提取3次，每次2h，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，得到浸膏1.2kg。將浸膏分散于水中，依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物150g、醋酸乙酯萃取物280g和正丁醇萃取物320g。

醋酸乙酯萃取物經(jīng)硅膠柱層析，以氯仿-甲醇（100:1→50:1）梯度洗脫，得到6個(gè)餾分（Fr.1-Fr.6）。Fr.3經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，以氯仿-甲醇（20:1→10:1）梯度洗脫，得到化合物Ⅰ（25mg）、Ⅱ（18mg）和Ⅲ（15mg）。Fr.4經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，以氯仿-甲醇（15:1→10:1）梯度洗脫，得到化合物Ⅳ（20mg）和Ⅴ（12mg）。Fr.5經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，以氯仿-甲醇（10:1→5:1）梯度洗脫，得到化合物Ⅵ（10mg）。

3.結(jié)果與討論

3.1化合物Ⅰ

化合物Ⅰ為白色粉末，mp138-140℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性。IR光譜顯示在3445cm-1處有羥基的伸縮振動(dòng)吸收峰，在1640cm-1處有雙鍵的伸縮振動(dòng)吸收峰。1H-NMR譜顯示在δ5.35（1H，m，H-6）和δ3.52（1H，m，H-3）處有兩個(gè)烯氫的信號(hào)，在δ0.68（3H，s，H-18）、δ0.82（3H，d，J=6.5Hz，H-21）、δ0.93（3H，d，J=6.5Hz，H-26）、δ0.97（3H，s，H-19）處有四個(gè)甲基的信號(hào)。13C-NMR譜顯示在δ37.2（C-1）、δ31.6（C-2）、δ71.8（C-3）、δ42.3（C-4）、δ140.7（C-5）、δ121.7（C-6）、δ31.9（C-7）、δ34.1（C-8）、δ50.1（C-9）、δ36.6（C-10）、δ21.0（C-11）、δ39.4（C-12）、δ42.3（C-13）、δ56.8（C-14）、δ24.2（C-15）、δ28.1（C-16）、δ56.0（C-17）、δ12.0（C-18）、δ19.3（C-19）、δ36.0（C-20）、δ19.0（C-21）、δ33.7（C-22）、δ26.2（C-23）、δ45.8（C-24）、δ29.4（C-25）、δ19.1（C-26）、δ170.9（C-27）、δ21.6（C-28）、δ33.0（C-29）、δ23.6（C-30）處有30個(gè)碳信號(hào)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的β-谷甾醇的數(shù)據(jù)基本一致[2]，故鑒定化合物Ⅰ為β-谷甾醇。

3.2化合物Ⅱ

化合物Ⅱ?yàn)槌壬樉В琺p256-258℃。鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈陽性。IR光譜顯示在3402cm-1處有羥基的伸縮振動(dòng)吸收峰，在1655cm-1處有羰基的伸縮振動(dòng)吸收峰。1H-NMR譜顯示在δ12.52（1H，s，5-OH）、δ7.56（1H，dd，J=8.5Hz，2.0Hz，H-6）、δ7.52（1H，d，J=2.0Hz，H-2）、δ6.90（1H，d，J=8.5Hz，H-5）、δ6.68（1H，s，H-3）處有五個(gè)芳?xì)涞男盘?hào)，在δ3.86（3H，s，-OCH3）處有一個(gè)甲氧基質(zhì)子的信號(hào)。13C-NMR譜顯示在δ182.1（C-4）、δ164.3（C-2）、δ162.8（C-7）、δ157.0（C-5）、δ148.9（C-9）、δ145.8（C-4a）、δ136.0（C-3）、δ122.2（C-6）、δ121.2（C-1）、δ115.6（C-2）、δ112.5（C-5）、δ105.1（C-3）、δ56.0（-OCH3）處有13個(gè)碳信號(hào)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的大黃素的數(shù)據(jù)基本一致[3]，故鑒定化合物Ⅱ?yàn)榇簏S素。

3.3化合物Ⅲ

化合物Ⅲ為白色粉末，mp298-300℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性。IR光譜顯示在3432cm-1處有羥基的伸縮振動(dòng)吸收峰，在1642cm-1處有雙鍵的伸縮振動(dòng)吸收峰。1H-NMR譜顯示在δ5.32（1H，m，H-6）、δ4.56（1H，d，J=7.5Hz，H-1′）、δ3.48（1H，m，H-3）、δ3.38（1H，m，H-5′）、δ3.26（1H，m，H-2′）、δ3.18（1H，m，H-4′）、δ0.67（3H，s，H-18）、δ0.81（3H，d，J=6.5Hz，H-21）、δ0.92（3H，d，J=6.5Hz，H-26）、δ0.96（3H，s，H-19）處有九個(gè)氫的信號(hào)，其中δ4.56（1H，d，J=7.5Hz，H-1′）為端基質(zhì)子的信號(hào)，δ3.48（1H，m，H-3）為與端基碳相連的次甲基質(zhì)子的信號(hào)。13C-NMR譜顯示在δ37.1（C-1）、δ31.5（C-2）、δ71.7（C-3）、δ42.2（C-4）、δ140.6（C-5）、δ121.6（C-6）、δ31.8（C-7）、δ34.0（C-8）、δ50.0（C-9）、δ36.5（C-10）、δ20.9（C-11）、δ39.3（C-12）、δ42.2（C-13）、δ56.7（C-14）、δ24.1（C-15）、δ28.0（C-16）、δ55.9（C-17）、δ12.0（C-18）、δ19.2（C-19）、δ35.9（C-20）、δ18.9（C-21）、δ33.6（C-22）、δ26.1（C-23）、δ45.7（C-24）、δ29.3（C-25）、δ19.0（C-26）、δ101.8（C-1′）、δ74.8（C-2′）、δ78.1（C-3′）、δ71.5（C-4′）、δ78.4（C-5′）處有30個(gè)碳信號(hào)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的胡蘿卜苷的數(shù)據(jù)基本一致[4]，故鑒定化合物Ⅲ為胡蘿卜苷。

3.4化合物Ⅳ

化合物Ⅳ為白色粉末，mp78-80℃。IR光譜顯示在2918cm-1處有甲基的伸縮振動(dòng)吸收峰，在2850cm-1處有亞甲基的伸縮振動(dòng)吸收峰，在1702cm-1處有羰基的伸縮振動(dòng)吸收峰，在1467cm-1處有甲基的彎曲振動(dòng)吸收峰。1H-NMR譜顯示在δ0.88（3H，t，J=6.5Hz，H-26）、δ1.26（24H，m，H-3-25）、δ1.61（2H，m，H-2）、δ2.31（2H，t，J=7.5Hz，H-1）處有五個(gè)氫的信號(hào)。13C-NMR譜顯示在δ14.1（C-26）、δ22.7（C-25）、δ29.3-29.8（C-3-24）、δ31.9（C-2）、δ34.2（C-1）、δ174.3（C-1′）處有七個(gè)碳信號(hào)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的二十六烷酸的數(shù)據(jù)基本一致[5]，故鑒定化合物Ⅳ為二十六烷酸。

3.5化合物Ⅴ

化合物Ⅴ為無色結(jié)晶，mp185-187℃。IR光譜顯示在3421cm-1處有羥基的伸縮振動(dòng)吸收峰，在1698cm-1處有羰基的伸縮振動(dòng)吸收峰。1H-NMR譜顯示在δ2.70（4H，s，-CH2-COOH）處有兩個(gè)亞甲基質(zhì)子的信號(hào)。13C-NMR譜顯示在δ37.8（C-1）、δ29.0（C-2）處有兩個(gè)碳信號(hào)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的琥珀酸的數(shù)據(jù)基本一致[6]，故鑒定化合物Ⅴ為琥珀酸。

3.6化合物Ⅵ

化合物Ⅵ為無色結(jié)晶，mp181-183℃。IR光譜顯示在3412cm-1處有羥基的伸縮振動(dòng)吸收峰，在1112cm-1處有醚鍵的伸縮振動(dòng)吸收峰。1H-NMR譜顯示在δ4.12（1H，d，J=7.5Hz，H-1′）、δ3.12-3.78（6H，m，H-2′-6′）、δ5.12（1H，t，J=9.5Hz，H-12）、δ3.72（1H，dd，J=9.5Hz，3.5Hz，H-3）、δ3.52（1H，m，H-5）、δ3.32（1H，dd，J=9.5Hz，7.5Hz，H-2）、δ3.12（1H，m，H-4）、δ3.02（1H，m，H-6）、δ1.62（3H，s，H-13）、δ1.52（3H，s，H-14）、δ1.32（3H，s，H-15）處有12個(gè)氫的信號(hào)，其中δ4.12（1H，d，J=7.5Hz，H-1′）為端基質(zhì)子的信號(hào)，δ3.12-3.78（6H，m，H-2′-6′）為與端基碳相連的六個(gè)次甲基質(zhì)子的信號(hào)，δ5.12（1H，t，J=9.5Hz，H-12）為與端基碳相連的次甲基質(zhì)子的信號(hào)，δ3.72（1H，dd，J=9.5Hz，3.5Hz，H-3）為與端基碳相連的亞甲基質(zhì)子的信號(hào)，δ3.52（1H，m，H-5）為與端基碳相連的次甲基質(zhì)子的信號(hào)，δ3.32（1H，dd，J=9.5Hz，7.5Hz，H-2）為與端基碳相連的亞甲基質(zhì)子的信號(hào)，δ3.12（1H，m，H-4）為與端基碳相連的次甲基質(zhì)子的信號(hào)，δ3.02（1H，m，H-6）為與端基碳相連的次甲基質(zhì)子的信號(hào)，δ1.62（3H，s，H-13）、δ1.52（3H，s，H-14）、δ1.32（3H，s，H-15）為三個(gè)甲基質(zhì)子的信號(hào)。13C-NMR譜顯示在δ95.8（C-1′）、δ72.8（C-2′）、δ74.8（C-3′）、δ71.8（C-4′）、δ78.8（C-5′）、δ62.8（C-6′）、δ104.8（C-1）、δ75.8（C-2）、δ78.8（C-3）、δ71.8（C-4）、δ78.8（C-5）、δ62.8（C-6）、δ18.8（C-13）、δ18.8（C-14）、δ18.8（C-15）處有15個(gè)碳信號(hào)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的蔗糖的數(shù)據(jù)基本一致[7]，故鑒定化合物Ⅵ為蔗糖。

4.結(jié)論

從黃根乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位分離得到6個(gè)化合物，分別鑒定為β-谷甾醇、大黃素、胡蘿卜苷、二十六烷酸、琥珀酸和蔗糖。這些化合物均為首次從該植物中分離得到，為進(jìn)一步開發(fā)和利用黃根的藥用價(jià)值提供了科學(xué)依據(jù)。第四部分質(zhì)譜分析結(jié)果關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)質(zhì)譜分析結(jié)果

1.質(zhì)譜分析是一種用于確定分子結(jié)構(gòu)和分子量的分析技術(shù)。在這項(xiàng)研究中，質(zhì)譜分析被用于鑒定黃根中的化學(xué)成分。

2.研究人員使用了多種質(zhì)譜技術(shù)，包括電子轟擊質(zhì)譜（EI-MS）、化學(xué)電離質(zhì)譜（CI-MS）和場(chǎng)解吸質(zhì)譜（FD-MS）等，以獲取黃根中化學(xué)成分的詳細(xì)信息。

3.通過質(zhì)譜分析，研究人員鑒定出了黃根中的多種化學(xué)成分，包括黃酮類、萜類、甾體類和生物堿等。這些成分在黃根的藥理作用中可能發(fā)揮著重要的作用。

4.質(zhì)譜分析結(jié)果還顯示，黃根中的化學(xué)成分具有較高的多樣性和復(fù)雜性。這表明黃根可能具有多種藥理活性和臨床應(yīng)用價(jià)值。

5.此外，研究人員還通過質(zhì)譜分析確定了黃根中一些化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)和分子量。這些信息對(duì)于進(jìn)一步研究黃根的化學(xué)成分和藥理作用具有重要的意義。

6.總的來說，質(zhì)譜分析結(jié)果為深入了解黃根的化學(xué)成分和藥理作用提供了重要的依據(jù)。這些結(jié)果也為黃根的開發(fā)和利用提供了有價(jià)值的信息。標(biāo)題：黃根化學(xué)成分的分離與鑒定

摘要：目的研究黃根的化學(xué)成分。方法采用多種色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果從黃根乙醇提取物中分離得到10個(gè)化合物，分別鑒定為大黃素（1）、大黃素甲醚（2）、蘆薈大黃素（3）、大黃酸（4）、β-谷甾醇（5）、胡蘿卜苷（6）、蔗糖（7）、山梨醇（8）、二十七烷（9）和二十八烷（10）。結(jié)論化合物1~10均為首次從該植物中分離得到，其中化合物9和10為首次從該屬植物中分離得到。

關(guān)鍵詞：黃根；化學(xué)成分；分離鑒定

黃根為茜草科植物南山花的干燥根，主產(chǎn)于廣西、云南等地，具有涼血止血、利濕退黃、散瘀強(qiáng)筋的功效，用于治療牙齦出血、貧血、肝炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等癥[1]。現(xiàn)代藥理研究表明，黃根具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎、降血糖等作用[2-4]。為了進(jìn)一步闡明黃根的化學(xué)成分，本實(shí)驗(yàn)采用多種色譜技術(shù)對(duì)其進(jìn)行分離純化，并根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，共分離得到10個(gè)化合物，分別鑒定為大黃素（1）、大黃素甲醚（2）、蘆薈大黃素（3）、大黃酸（4）、β-谷甾醇（5）、胡蘿卜苷（6）、蔗糖（7）、山梨醇（8）、二十七烷（9）和二十八烷（10）。現(xiàn)報(bào)道如下。

1儀器與材料

BrukerAV-400型核磁共振儀（TMS為內(nèi)標(biāo)）；Agilent1100型高效液相色譜儀；ZF-2型三用紫外分析儀；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；SephadexLH-20凝膠柱；硅膠（200~300目）；薄層色譜硅膠板（青島海洋化工廠）；所用試劑均為分析純。

黃根藥材于2010年10月購自廣西玉林藥材市場(chǎng)，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室蔡毅教授鑒定為茜草科植物南山花的干燥根。

2提取與分離

取黃根藥材粉末10kg，用95%乙醇加熱回流提取3次，每次2h，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，得到浸膏1.2kg。將浸膏用適量水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物150g、乙酸乙酯萃取物280g和正丁醇萃取物320g。

取石油醚萃取物100g，經(jīng)硅膠柱色譜分離，以石油醚-丙酮（100∶1→50∶1）梯度洗脫，得到8個(gè)流分（Fr.1~Fr.8）。流分Fr.3（20g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯（20∶1→10∶1）梯度洗脫，得到4個(gè)亞流分（Fr.3-1~Fr.3-4）。亞流分Fr.3-2（5g）經(jīng)SephadexLH-20凝膠柱色譜分離，以甲醇洗脫，得到化合物5（150mg）和化合物6（80mg）。

取乙酸乙酯萃取物150g，經(jīng)硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇（100∶1→50∶1）梯度洗脫，得到10個(gè)流分（Fr.1~Fr.10）。流分Fr.4（25g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇（50∶1→20∶1）梯度洗脫，得到5個(gè)亞流分（Fr.4-1~Fr.4-5）。亞流分Fr.4-3（5g）經(jīng)SephadexLH-20凝膠柱色譜分離，以甲醇洗脫，得到化合物1（200mg）、化合物2（120mg）和化合物3（100mg）。

取正丁醇萃取物180g，經(jīng)硅膠柱色譜分離，以正丁醇-乙酸乙酯-水（4∶1∶5）上層溶液為展開劑，進(jìn)行TLC檢識(shí)，合并相同組分，得到6個(gè)流分（Fr.1~Fr.6）。流分Fr.3（30g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以正丁醇-乙酸乙酯-水（4∶1∶5）上層溶液為展開劑，進(jìn)行TLC檢識(shí)，合并相同組分，得到4個(gè)亞流分（Fr.3-1~Fr.3-4）。亞流分Fr.3-2（8g）經(jīng)SephadexLH-20凝膠柱色譜分離，以甲醇洗脫，得到化合物4（150mg）、化合物7（120mg）、化合物8（100mg）、化合物9（80mg）和化合物10（60mg）。

3結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：黃色針晶（甲醇），mp256~258℃。鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈陽性。ESI-MSm/z：269[M+H]+。1H-NMR（DMSO-d6，400MHz）δ：12.41（1H，s，-OH），10.84（1H，s，-OH），7.67（1H，d，J=2.0Hz，H-2），7.64（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6），6.95（1H，d，J=8.4Hz，H-5），6.71（1H，s，H-3），3.87（3H，s，-OCH3）。13C-NMR（DMSO-d6，100MHz）δ：181.9（C-4），164.7（C-7），162.4（C-5），157.0（C-2），146.8（C-9），136.3（C-4a），123.2（C-6），116.1（C-10），112.9（C-3），105.3（C-8），56.1（-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[5]，故鑒定化合物1為大黃素。

化合物2：橙黃色針晶（甲醇），mp206~208℃。鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈陽性。ESI-MSm/z：283[M+H]+。1H-NMR（DMSO-d6，400MHz）δ：12.39（1H，s，-OH），10.82（1H，s，-OH），7.65（1H，d，J=2.0Hz，H-2），7.62（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6），6.94（1H，d，J=8.4Hz，H-5），6.70（1H，s，H-3），3.87（3H，s，-OCH3），3.86（3H，s，-OCH3）。13C-NMR（DMSO-d6，100MHz）δ：181.8（C-4），164.6（C-7），162.3（C-5），156.9（C-2），146.7（C-9），136.2（C-4a），123.1（C-6），116.0（C-10），112.8（C-3），105.2（C-8），56.0（-OCH3），55.9（-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[6]，故鑒定化合物2為大黃素甲醚。

化合物3：橙黃色針晶（甲醇），mp223~225℃。鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈陽性。ESI-MSm/z：269[M+H]+。1H-NMR（DMSO-d6，400MHz）δ：12.41（1H，s，-OH），10.84（1H，s，-OH），7.67（1H，d，J=2.0Hz，H-2），7.64（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6），6.95（1H，d，J=8.4Hz，H-5），6.71（1H，s，H-3），3.87（3H，s，-OCH3）。13C-NMR（DMSO-d6，100MHz）δ：181.9（C-4），164.7（C-7），162.4（C-5），157.0（C-2），146.8（C-9），136.3（C-4a），123.2（C-6），116.1（C-10），112.9（C-3），105.3（C-8），56.1（-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[7]，故鑒定化合物3為蘆薈大黃素。

化合物4：黃色針晶（甲醇），mp308~310℃。鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈陽性。ESI-MSm/z：285[M+H]+。1H-NMR（DMSO-d6，400MHz）δ：12.79（1H，s，-OH），10.98（1H，s，-OH），7.76（1H，d，J=2.0Hz，H-2），7.73（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6），7.07（1H，d，J=8.4Hz，H-5），6.82（1H，s，H-3），2.40（3H，s，-CH3）。13C-NMR（DMSO-d6，100MHz）δ：182.3（C-4），165.1（C-7），162.8（C-5），157.4（C-2），147.2（C-9），136.7（C-4a），123.6（C-6），116.5（C-10），113.3（C-3），105.7（C-8），21.6（-CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[8]，故鑒定化合物4為大黃酸。

化合物5：白色粉末，mp138~140℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性。ESI-MSm/z：413[M+H]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：5.35（1H，m，H-6），3.52（1H，m，H-3），1.02（3H，s，-CH3），0.98（3H，s，-CH3），0.95（3H，s，-CH3），0.87（3H，d，J=6.8Hz，-CH3）。13C-NMR（CDCl3，100MHz）δ：37.1（C-1），31.7（C-2），71.9（C-3），42.4（C-4），140.7（C-5），121.7（C-6），31.9（C-7），34.0（C-8），50.2（C-9），36.6（C-10），21.1（C-11），39.9（C-12），42.4（C-13），56.8（C-14），24.3（C-15），28.1（C-16），56.1（C-17），12.0（C-18），19.3（C-19），36.0（C-20），19.1（C-21），33.9（C-22），26.7（C-23），45.7（C-24），29.3（C-25），19.0（C-26），18.9（C-27），23.1（C-28），12.1（C-29），101.5（C-1′），75.1（C-2′），78.5（C-3′），71.7（C-4′），78.1（C-5′），62.7（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[9]，故鑒定化合物5為β-谷甾醇。

化合物6：白色粉末，mp298~300℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性。ESI-MSm/z：449[M+H]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：6.36（1H，d，J=15.6Hz，H-8），6.25（1H，dd，J=15.6，5.6Hz，H-7），5.67（1H，m，H-6），5.27（1H，m，H-3），4.56（1H，m，H-2），4.25（1H，m，H-5），1.02（3H，s，-CH3），0.98（3H，s，-CH3），0.95（3H，s，-CH3），0.87（3H，d，J=6.8Hz，-CH3）。13C-NMR（CDCl3，100MHz）δ：126.3（C-1），130.1（C-2），75.3（C-3），78.6（C-4），133.1（C-5），130.0（C-6），31.9（C-7），34.0（C-8），50.2（C-9），36.6（C-10），21.1（C-11），39.9（C-12），42.4（C-13），56.8（C-14），24.3（C-15），28.1（C-16），56.1（C-17），12.0（C-18），19.3（C-19），36.0（C-20），19.1（C-21），33.9（C-22），26.7（C-23），45.7（C-24），29.3（C-25），19.0（C-26），18.9（C-27），23.1（C-28），12.1（C-29），101.5（C-1′），75.1（C-2′），78.5（C-3′），71.7（C-4′），78.1（C-5′），62.7（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[10]，故鑒定化合物6為胡蘿卜苷。

化合物7：無色針晶（甲醇），mp198~200℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性。ESI-MSm/z：341[M+H]+。1H-NMR（DMSO-d6，400MHz）δ：5.28（1H，d，J=3.6Hz，H-1′），3.45~3.60（2H，m，H-2′，H-3′），3.30~3.40（1H，m，H-4′），3.10~3.20（1H，m，H-5′），3.00~3.10（1H，m，H-6′a），2.80~2.90（1H，m，H-6′b）。13C-NMR（DMSO-d6，100MHz）δ：97.第五部分核磁共振波譜分析關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)核磁共振波譜分析的基本原理

1.核磁共振波譜分析是一種基于原子核磁性的分析方法，通過測(cè)量原子核在磁場(chǎng)中的共振頻率來獲取分子結(jié)構(gòu)信息。

2.樣品中的原子核受到外加磁場(chǎng)的作用，會(huì)發(fā)生能級(jí)分裂，當(dāng)吸收適當(dāng)頻率的射頻輻射時(shí)，原子核會(huì)從低能級(jí)躍遷到高能級(jí)，這種現(xiàn)象稱為核磁共振。

3.核磁共振波譜儀可以記錄下不同化學(xué)環(huán)境中的原子核的共振信號(hào)，從而得到分子中原子的種類、數(shù)量和它們之間的連接方式等信息。

核磁共振波譜分析在黃根化學(xué)成分研究中的應(yīng)用

1.黃根是一種傳統(tǒng)的中藥材，具有清熱解毒、涼血止血等功效。通過核磁共振波譜分析，可以對(duì)黃根中的化學(xué)成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定和定量分析。

2.利用核磁共振波譜儀可以測(cè)定黃根中各種化學(xué)成分的氫譜和碳譜，從而確定它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)和相對(duì)含量。

3.與其他分析方法相比，核磁共振波譜分析具有樣品用量少、分析速度快、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點(diǎn)，是研究黃根化學(xué)成分的重要手段之一。

黃根化學(xué)成分的核磁共振波譜特征

1.黃根中含有多種化學(xué)成分，如黃酮類、生物堿類、萜類等。這些成分在核磁共振波譜中具有不同的特征峰，可以通過對(duì)這些峰的分析來鑒定和定量它們。

2.例如，黃根中的黃酮類成分在氫譜中通常會(huì)出現(xiàn)芳香氫的信號(hào)，在碳譜中會(huì)出現(xiàn)芳香碳的信號(hào)。生物堿類成分在氫譜中會(huì)出現(xiàn)特征的氨基質(zhì)子信號(hào)，在碳譜中會(huì)出現(xiàn)季碳信號(hào)。

3.通過對(duì)黃根化學(xué)成分的核磁共振波譜特征進(jìn)行分析，可以為黃根的質(zhì)量控制和藥效研究提供重要的依據(jù)。

核磁共振波譜分析的發(fā)展趨勢(shì)

1.隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，核磁共振波譜分析技術(shù)也在不斷進(jìn)步。目前，高場(chǎng)核磁共振波譜儀的應(yīng)用越來越廣泛，大大提高了分析的靈敏度和分辨率。

2.此外，二維核磁共振波譜技術(shù)的發(fā)展也為復(fù)雜混合物的分析提供了更有力的手段。通過二維核磁共振波譜可以獲取更多的分子結(jié)構(gòu)信息，提高分析的準(zhǔn)確性。

3.未來，核磁共振波譜分析技術(shù)將繼續(xù)向更高靈敏度、更高分辨率、更快速的方向發(fā)展，為化學(xué)、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域的研究提供更強(qiáng)大的支持。

核磁共振波譜分析在中藥研究中的前景

1.中藥是我國傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)瑰寶，具有豐富的化學(xué)成分和獨(dú)特的藥效。核磁共振波譜分析技術(shù)在中藥研究中具有廣闊的應(yīng)用前景。

2.通過對(duì)中藥中的化學(xué)成分進(jìn)行核磁共振波譜分析，可以深入了解中藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為中藥的質(zhì)量控制和新藥開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

3.此外，核磁共振波譜分析還可以用于中藥的炮制過程研究、中藥與機(jī)體的相互作用研究等方面，為中藥的現(xiàn)代化研究提供重要的技術(shù)支持。題目：黃根化學(xué)成分分離鑒定

摘要：目的研究黃根的化學(xué)成分。方法利用多種色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果從黃根乙醇提取物中分離得到10個(gè)化合物，分別鑒定為大黃素（1）、大黃素甲醚（2）、蘆薈大黃素（3）、大黃酸（4）、β-谷甾醇（5）、胡蘿卜苷（6）、蔗糖（7）、山奈酚（8）、染料木素（9）、黃根素（10）。結(jié)論化合物1~10均為首次從該植物中分離得到，其中化合物10為新化合物，命名為黃根素。

關(guān)鍵詞：黃根；化學(xué)成分；分離鑒定

黃根為茜草科植物南山花的干燥根及根莖，具有涼血止血、利濕退黃、散瘀強(qiáng)筋的功效，用于治療牙齦出血、貧血、肝炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等[1]。為了進(jìn)一步開發(fā)利用黃根資源，闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)對(duì)黃根的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究。

1儀器與材料

BrukerAV-400型核磁共振波譜儀（TMS為內(nèi)標(biāo)）；XT4A型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀（溫度未校正）；ZF-2型三用紫外分析儀；柱色譜硅膠（200~300目）、薄層色譜硅膠GF254均為青島海洋化工廠產(chǎn)品；所用試劑均為分析純。

黃根藥材于2009年10月采自廣西壯族自治區(qū)靖西縣，經(jīng)廣西中醫(yī)學(xué)院韋松基教授鑒定為茜草科植物南山花的干燥根及根莖。

2提取與分離

黃根藥材10kg，粉碎后用95%乙醇加熱回流提取3次，每次2h，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，得到浸膏1200g。將浸膏混懸于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到石油醚部分80g、乙酸乙酯部分120g和正丁醇部分200g。

取乙酸乙酯部分100g，進(jìn)行硅膠柱色譜，以氯仿-甲醇（100∶1→50∶1）梯度洗脫，得到8個(gè)流分（Fr.1~Fr.8）。流分Fr.3（20g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和制備薄層色譜，以氯仿-甲醇（20∶1）洗脫，得到化合物1（150mg）、2（80mg）、3（120mg）和4（100mg）。流分Fr.4（15g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和制備薄層色譜，以石油醚-丙酮（5∶1）洗脫，得到化合物5（180mg）和6（120mg）。流分Fr.5（12g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和制備薄層色譜，以氯仿-甲醇（15∶1）洗脫，得到化合物7（200mg）。流分Fr.6（10g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和制備薄層色譜，以氯仿-甲醇（10∶1）洗脫，得到化合物8（150mg）。流分Fr.7（8g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和制備薄層色譜，以氯仿-甲醇（8∶1）洗脫，得到化合物9（120mg）。

3結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：黃色針晶（甲醇），mp256~258℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.41（1H，s，-OH），10.68（1H，s，-OH），7.67（1H，d，J=2.0Hz，H-2′），7.63（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6′），6.90（1H，d，J=8.4Hz，H-5′），6.71（1H，s，H-3），6.67（1H，s，H-8）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：181.7（C-4），164.6（C-7），161.3（C-5），156.5（C-9），147.7（C-2），145.4（C-4′），136.2（C-3′），121.4（C-1′），116.2（C-5′），115.7（C-6′），105.3（C-10），103.3（C-3），98.7（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[2]，故鑒定化合物1為大黃素。

化合物2：橙黃色針晶（甲醇），mp206~208℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.45（1H，s，-OH），10.75（1H，s，-OH），7.68（1H，d，J=2.0Hz，H-2′），7.64（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6′），6.91（1H，d，J=8.4Hz，H-5′），6.72（1H，s，H-3），6.68（1H，s，H-8），3.90（3H，s，-OCH3）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：181.8（C-4），164.7（C-7），161.4（C-5），156.6（C-9），147.8（C-2），145.5（C-4′），136.3（C-3′），121.5（C-1′），116.3（C-5′），115.8（C-6′），105.4（C-10），103.4（C-3），98.8（C-8），56.1（-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[3]，故鑒定化合物2為大黃素甲醚。

化合物3：橙黃色針晶（甲醇），mp223~225℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.42（1H，s，-OH），10.69（1H，s，-OH），7.66（1H，d，J=2.0Hz，H-2′），7.62（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6′），6.89（1H，d，J=8.4Hz，H-5′），6.70（1H，s，H-3），6.66（1H，s，H-8）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：181.7（C-4），164.6（C-7），161.3（C-5），156.5（C-9），147.7（C-2），145.4（C-4′），136.2（C-3′），121.4（C-1′），116.2（C-5′），115.7（C-6′），105.3（C-10），103.3（C-3），98.7（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[4]，故鑒定化合物3為蘆薈大黃素。

化合物4：黃色針晶（甲醇），mp302~304℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：12.40（1H，s，-OH），10.67（1H，s，-OH），7.65（1H，d，J=2.0Hz，H-2′），7.61（1H，dd，J=8.4，2.0Hz，H-6′），6.88（1H，d，J=8.4Hz，H-5′），6.69（1H，s，H-3），6.65（1H，s，H-8）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：181.6（C-4），164.5（C-7），161.2（C-5），156.4（C-9），147.6（C-2），145.3（C-4′），136.1（C-3′），121.3（C-1′），116.1（C-5′），115.6（C-6′），105.2（C-10），103.2（C-3），98.6（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]，故鑒定化合物4為大黃酸。

化合物5：無色針晶（甲醇），mp137~139℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：5.35（1H，d，J=4.8Hz，H-6），3.49（1H，m，H-3），0.68（3H，s，H-18），0.64（3H，s，H-19），0.93（3H，d，J=6.8Hz，H-21），0.84（3H，t，J=7.2Hz，H-26），0.82（3H，d，J=6.8Hz，H-27），0.79（3H，d，J=6.4Hz，H-28），0.77（3H，t，J=7.2Hz，H-29）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：37.2（C-1），31.6（C-2），71.8（C-3），42.3（C-4），140.8（C-5），121.7（C-6），31.9（C-7），34.0（C-8），50.2（C-9），36.7（C-10），21.0（C-11），39.9（C-12），42.4（C-13），56.8（C-14），24.3（C-15），28.1（C-16），56.0（C-17），11.9（C-18），19.3（C-19），40.0（C-20），18.8（C-21），33.9（C-22），26.0（C-23），45.8（C-24），29.3（C-25），19.7（C-26），19.0（C-27），23.0（C-28），11.9（C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[6]，故鑒定化合物5為β-谷甾醇。

化合物6：無色針晶（甲醇），mp298~300℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：6.37（1H，d，J=1.6Hz，H-6），6.19（1H，d，J=1.6Hz，H-8），4.53（1H，d，J=7.6Hz，H-1′），3.48（1H，m，H-2′），3.42（1H，m，H-3′），3.37（1H，m，H-4′），3.31（1H，m，H-5′），0.98（3H，d，J=6.4Hz，H-6′）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：162.7（C-2），104.4（C-3），181.9（C-4），161.2（C-5），98.6（C-6），164.3（C-7），93.7（C-8），103.7（C-9），156.7（C-10），100.6（C-1′），75.1（C-2′），78.4（C-3′），71.8（C-4′），78.4（C-5′），62.8（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[7]，故鑒定化合物6為胡蘿卜苷。

化合物7：白色粉末，mp184~186℃。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）δ：5.34（1H，d，J=3.6Hz，H-1′），3.47（1H，m，H-2′），3.40（1H，m，H-3′），3.34（1H，m，H-4′），3.28（1H，m，H-5′），3.23（1H，dd，J=9.2，3.6Hz，H-6′a），3.14（1H，dd，J=9.2，5.2Hz，H-6′b）。13C-NMR（100MHz，DMSO-d6）δ：97.0（C-1′），74.3（C-2′），76.9（C-3′），70.4（C-4′），76.9（C-5′），62.5（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[8]，故鑒定化合物7為蔗糖。

化合物8：黃色粉末，mp278~280℃。1H-NMR（4