DB32T 3205-2017 飼料中雪腐鐮刀菌烯醇(NIV)的測定 免疫親和柱凈化-高效液相色譜法　　_第1頁
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文檔簡介

江DB32Determinationofnivalenol(NIV)infeed--Highperformanceliquidchromatographymethodwithimmunoaffinitycolumn江蘇省質量技術監督局發布本標準主要起草人：張海彬、吳文達、施志玉、鄭亞婷、賈惠、李榮佳、張杰、趙飼料中雪腐鐮刀菌烯醇（NIV）的測定免疫親和柱凈化-高效液相色譜法本標準規定了飼料中雪腐鐮刀菌烯醇檢測的制樣、免疫親和柱凈化和高效液相色譜檢測本標準的檢測限為2μg/kg，定量限為10是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB/T6682分析實驗室用水規單個組份，再通過檢測器進行檢測，通過對比與分析即可定性定量地鑒定樣品中的各個未知本檢測方法所用試劑，凡未指明規格者，均為4.6雪腐鐮刀菌烯醇標準溶液:準確稱儲備液，避光儲存于4℃冰箱中，用于制備標準5.3旋轉蒸發儀。26.3毒素提取稱取試樣10.0g置于150mL具塞錐形瓶中，加入30mL乙腈-水(84:16,V/V)振蕩30min,過濾。再加入30mL乙腈-水(84:16,V/V)振蕩提取30min,收集濾液至干凈的容器中。6.4樣品提取液的凈化移取上述濾液8mL,過Mycosep@227免疫親和柱進行凈化。收集凈化液4mL于圓底燒瓶中，在旋轉蒸發儀上60℃蒸發至干。加入400μL乙醇于燒瓶中，超聲溶解，將溶液轉移至干凈的進樣瓶中。進孔濾膜后待測。6.4.1色譜條件a)色譜柱：ODS色譜柱(4.6mm×250mm,粒度5μm);b)流動相：甲醇-0.1%乙酸銨水溶液(20:80,VV);6.4.2色譜測定根據樣液中雪腐鐮刀菌烯醇的含量，選定濃度相近的標準工作液。標準工作液和樣液中雪腐鐮刀菌烯醇響應值均應在儀器檢測線性范圍內，色譜圖見附錄A。對標準工作液和樣液等體積參差進樣進行測定，確定保留時間，計算出標準工作液與樣液的峰面積，根據標準溶液所測得的峰面積和對應的量，以峰面積為縱坐標、濃度為橫坐標繪制標準曲線。根據標準曲線和樣液的峰面積，得到樣液中雪腐鐮刀菌烯醇的含量(計算結果保留到小數點后一位有效數字)。6.4.3空白試驗除不加試樣外，空白試驗應與測定平行進行，并采用上述相同的分析步驟。6.4.4平行試驗按以上步驟，對同一試樣進行平行試驗測定。6.4.5計算所得實驗數據按式(1)計算：(1)式中：X——試樣中雪腐鐮刀菌烯醇的含量，單位為微克每克(μgC——標準工作液中雪腐鐮刀菌烯醇的濃度，單位為微克每毫升(μg/mV——樣液最終定容體積，單位為毫升(mL);m——最終樣液所代表的試樣量，單位為克(g);6.5重復

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