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34DB34/T4315—2022甜葉菊組培快繁技術規程TechnicalregulationsfortissuecultureandrapidpropagationofSteviarebaudiana2022-10-26發布2022-11-26實施安徽省市場監督管理局發布I1本文件規定了甜葉菊[Steviarebaudiana（Bertoni）Hemsl.]組培快繁的組培設施、培養基配4.2準備室4.2.2配置高壓蒸汽滅菌鍋、微波爐、托盤、水浴鍋、蒸餾水器、冰箱、培養箱、電子分析天平、電4.3接種室4.3.2配置超凈工作臺、雙筒實體顯微鏡、空調、紫外燈、空氣凈化裝置、組培滅菌器、鑷子、剪刀4.4培養室24.5溫室溫室建造按JB/T10594的規定執行。可選擇玻璃溫室或薄膜溫室，溫度可控范圍15℃~32℃,5.1培養基類型5.2培養基配制6.2接種工具滅菌6.3超凈工作臺滅菌將滅菌的培養基和接種工具放置在超凈工作臺上，接通電源，打開超凈工作臺上的紫外燈滅菌min～30min，先啟動風機，再關閉紫3將選取的外植體用2‰～5‰洗衣粉溶液清洗莖段表面污垢后，在超凈工作臺上，用無菌濾紙吸干外植體表面水分，浸入70％乙醇中消乙醇倒去，用無菌水沖洗2次后，再浸入有效氯濃度27.4外植體接種將已消毒的外植體切除下端部分及上端幼葉，留取長1.5cm～2.0cm帶側芽莖段備用。培養溫度為23℃~27℃,光照強度2000lx～3000lx，連續定時光照時間12h/d。7.6培養時間培養25d～30d。8.2培養條件8.3培養時間培養25d～30d。8.4培養代數4選取生長健壯、長勢均勻，苗高2.0cm～3.0cm的繼代培養苗，轉接到生根培養基中。9.2培養條件9.3培養時間培養18d～20d。10.1煉苗時期培養瓶內組培苗長出4～5條長2.0cm～5.0cm不定根時，便可煉苗。10.2煉苗條件培養瓶放置在遮光率為7075％、相對濕度為7090％、溫度為20℃~30℃的溫室中，打10.3煉苗時長煉苗2d～3d。用自來水將煉苗后的組培苗基部的培養基沖

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