高級中學名校試卷PAGEPAGE1天津市部分學校2023-2024學年高二下學期綜合實踐練習（二）一、選擇題：（每題只有一個最佳選項，每題4分，共48分）1.某公司發現了一種源自松露的甜味蛋白，隨后他們利用酵母菌通過發酵工程來生產該甜味蛋白。關于此技術，下列敘述錯誤的是（）A.為保證發酵過程的正常進行，可在發酵液中加入適量抗生素防止雜菌污染B.發酵過程中適當提高葡萄糖溶液濃度有利于酵母菌的生長繁殖C.借助轉基因技術選育高產甜味蛋白的酵母菌菌種是發酵工程的中心環節D.發酵結束后，可破碎細胞，采用鹽析、離心等方法從發酵液中提取甜味蛋白〖答案〗C〖祥解〗發酵工程是指采用現代工程技術手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產有用的產品，或直接把微生物應用于工業生產過程的一種新技術。發酵工程的內容包括菌種的選育、培養基的配制、滅菌、擴大培養和接種、發酵過程和產品的分離提純等方面?！驹斘觥緼、抗生素能殺死細菌，但不能殺死真菌，因此為保證發酵過程的正常進行，可在發酵液中加入適量抗生素防止雜菌污染，A正確；B、發酵過程中適當提高葡萄糖溶液濃度有利于酵母菌的生長繁殖，B正確；C、發酵工程的中心環節是發酵過程，C錯誤；D、發酵結束后，可破碎細胞，采用鹽析、離心等方法從發酵液中提取甜味蛋白，D正確。故選C。2.發酵產品的使用深入生活的方方面面。發酵工程可對細胞和細胞代謝產物進行工業化生產，傳統發酵技術大大豐富了食物的品種，充分體現了勞動人民的智慧。下列關于發酵工程和傳統發酵技術的說法，正確的是（）A.用發酵工程生產青霉素時，若發酵罐和培養基滅菌不徹底污染了雜菌，會因為某些雜菌分泌酶將青霉素分解掉而降低產量B.家庭制泡菜和變酸的葡萄酒表面長的菌膜分別是由酵母菌和醋酸菌形成，它們都是需氧型的原核生物C.發酵工程往往采用液體培養基進行發酵，發酵結束后會通過提取、分離和純化的措施來獲得單細胞蛋白產品D.與發酵工程相比，傳統發酵技術中菌種來源于多種天然微生物，發酵過程經過嚴格滅菌，所以產品質量較高且品質穩定〖答案〗A〖祥解〗發酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現代工程技術，規模化生產人類所需的產品，一般包括菌種的選育和培養、產物的分離和提純等方面。發酵工程在食品工業、醫藥工業及其他工農業生產上有重要的應用價值?！驹斘觥緼、用發酵工程生產青霉素時，若發酵罐和培養基滅菌不徹底污染了雜菌，會因為某些雜菌分泌酶將青霉素分解掉而降低產量，需要嚴格滅菌，A正確；B、家庭制泡菜和變酸的葡萄酒表面長的菌膜分別是由酵母菌和醋酸菌形成，但是酵母菌是兼性厭氧的真核生物，B錯誤；C、發酵工程往往采用液體培養基進行發酵，發酵結束后會通過提取、分離和純化的措施來獲得細胞代謝物，單細胞蛋白指微生物菌體，可通過過濾、沉淀方法獲得，C錯誤；D、傳統發酵技術的微生物是天然微生物，并未經過嚴格滅菌，D錯誤。故選A。3.猴痘是一種病毒性人畜共患病，在人類中出現的癥狀與過去在天花患者身上所看到的癥狀相似，B6R蛋白是猴痘病毒的抗原。為制備抗B6R蛋白的單克隆抗體，研究人員進行了相關實驗，如圖所示，其中①~④表示細胞。下列敘述正確的是（）A.細胞①含有從小鼠的脾中得到的能產生特定抗體的B淋巴細胞B.誘導細胞①②融合的常用方法與誘導原生質體融合的方法相同C.可將抗體檢測呈陰性的雜交瘤細胞在體外條件下大規模培養D.圖中的培養瓶需要置于含有95%CO2和5%O2的混合氣體中培養〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斘觥緼、單克隆抗體制備過程中需要將產生特定抗體的漿細胞與骨髓瘤細胞融合，給小鼠注射B6R蛋白的目的是使小鼠針對該抗原產生特異性免疫，從而使體內出現能產生抗B6R蛋白抗體的漿細胞，因此從小鼠脾臟提取的細胞①含有能產生特定抗體的B淋巴細胞，A正確；B、誘導動物細胞融合特有的方法是滅活的病毒，因此誘導細胞①②融合的常用方法與誘導原生質體融合的方法不完全相同，B錯誤；C、抗體檢測呈陰性的雜交瘤細胞說明其產生的抗體不是所需的抗體，因此不能培養該雜交瘤細胞，應將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞在體外條件下大規模培養或注射到小鼠的腹腔內大量培養，C錯誤；D、圖中的培養瓶需要置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體中培養，D錯誤。故選A。4.為加速我國北方冬春季秸稈原位還田的腐化過程，研究人員以凍牛糞為材料篩選出耐低溫（10℃）的纖維素降解菌。已知剛果紅染料能與培養基中的纖維素形成紅色復合物，下列相關敘述中正確的是（）A.初篩菌種前，要利用固體培養基在37℃條件下擴大培養目標菌種B.應選擇菌落直徑與周圍透明圈直徑比值大的菌落進行純化C.用于篩選的培養基是加入剛果紅染料的牛肉膏蛋白胨培養基D.選用凍牛糞為材料與其富含纖維素及含耐低溫微生物有關〖答案〗D〖祥解〗剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不與水解后的纖維二糖、葡萄糖等發生這種反應。當我們在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時，剛果紅與纖維素形成紅色復合物；而當纖維素被纖維素分解菌分解后，復合物就無法形成，培養基中會出現以這些菌為中心的透明圈?！驹斘觥緼、初篩菌種前，要利用液體培養基在10℃條件下擴大培養目標菌種，A錯誤；B、由于剛果紅染料與纖維素形成紅色復合物，因此出現以因纖維素降解菌為中心的透明圈，菌落直徑與透明圈直徑比值越小，分解纖維素的能力越強，B錯誤；C、用于篩選的培養基以纖維素為唯一的碳源的固體培養基，加入剛果紅染料是鑒別作用，C錯誤；D、篩選耐低溫的纖維素降解菌需要到其所生活的環境中尋找，凍牛糞中富含纖維素，有很多微生物，凍牛糞因溫度低，故其內的微生物是耐低溫微生物，D正確。故選D。5.P蛋白是非洲豬瘟病毒（ASFV）的重要抗原。為了能夠快速診斷ASFV，研究者制備相應的雜交瘤細胞R3E9。有關敘述合理的是（）A.B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合獲得的都是雜交瘤細胞B.雜交瘤細胞在培養過程中需要加入95%的O2和5%的CO2C.經過克隆化培養和抗體檢測可篩選出能夠產生P蛋白的R3E9D.體外培養R3E9可以獲得針對P蛋白的單克隆抗體〖答案〗D〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內產生具有免疫能力的B淋巴細胞；利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，用特定的選擇培養基進行篩選，得到雜交瘤細胞；再進行克隆化培養和抗體檢測，多次篩選后得到足夠數量的能分泌所需抗體的細胞；最后將所需的雜交瘤細胞在體外或小鼠腹腔內培養，從細胞培養液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。【詳析】A、若只考慮細胞的兩兩融合，B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后可得到雜交瘤細胞、B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞3種融合細胞，A錯誤；B、雜交瘤細胞在傳代培養中需要加入95%的空氣和5%的CO2，B錯誤；C、克隆化培養和抗體檢測可篩選出能夠產生抗P蛋白抗體的R3E9，C錯誤；D、通過體外培養雜交瘤細胞可獲得特定的單克隆抗體，D正確。故選D。6.關于制備單克隆抗體的過程，下列敘述錯誤的是（）A.為獲得足量相應的B細胞，可多次給小鼠注射特定抗原B.細胞融合前，已免疫的脾細胞不需要經過原代培養擴大C.用PEG誘導細胞融合后，可加入過量培養基終止融合D.雜交瘤細胞在體外培養時，常會發生接觸抑制現象〖答案〗D〖祥解〗制備的抗人絨毛膜促性腺激素（HCG）單克隆抗體，可用于早孕檢測，其制備過程：提取HCG→將HCG注射至小鼠體內→獲取B淋巴細胞→B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合→篩選出雜交瘤細胞→克隆上述雜交瘤細胞，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞→體外或體內培養→單克隆抗體?！驹斘觥緼、制備單克隆抗體的過程中，需反復向小鼠體內注射特定抗原，刺激相應B淋巴細胞的產生，A正確；B、一般認為，已免疫的脾細胞(含漿細胞)中已含足夠數量的能產生特異性抗體的細胞，不需要通過原代培養擴大細胞數量，高度分化的細胞也不能通過原代培養擴大細胞數量，B正確；C、通過添加適宜濃度的PEG進行融合，在原生質體融合一定時間后，加入過量的培養基進行稀釋，稀釋的目的是降低PEG濃度，使其失去融合作用，C正確；D、雜交瘤細胞培養時不會出現接觸抑制現象，D錯誤。故選D。7.目前肺類器官主要有兩種培養方式：其一是誘導多能干細胞(iPS細胞)生成；其二是將肺上皮干細胞與篩選后的體細胞進行共培養(過程如圖所示)。下列敘述錯誤的是（）A.iPS細胞具有組織特異性，只能分化成特定的細胞或組織B.肺類裝配體的培養需要適宜的營養、溫度、pH等基本條件C.培養肺類裝配體時需定期更換培養液以便清除代謝廢物等D.肺類器官A和B細胞中的DNA相同，RNA和蛋白質存在差異〖答案〗A〖祥解〗胚胎干細胞必須從胚胎中獲取，這涉及倫理問題，因而限制了它在醫學上的應用。2006年，科學家通過體外誘導小鼠成纖維細胞，獲得了類似胚胎干細胞的一種細胞，將它稱為誘導多能干細胞(簡稱iPS細胞)，并用iPS細胞治療了小鼠的鐮狀細胞貧血?，F在，用iPS細胞治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領域的研究也取得了新進展。因為誘導過程無須破壞胚胎，而且iPS細胞可以來源于病人自身的體細胞，將它移植回病人體內后，理論上可以避免免疫排斥反應，所以科學家普遍認為iPS細胞的應用前景優于胚胎干細胞?！驹斘觥緼、成體干細胞具有組織特異性，只能分化成特定的細胞或組織，iPS細胞類似胚胎干細胞，可以分化成各種細胞或組織，A錯誤；B、在體外培養動物細胞，需要滿足相應的條件，所以肺類裝配體的培養需要適宜的營養、溫度、pH等基本條件，B正確；C、培養肺類裝配體時需定期更換培養液以便清除代謝廢物等，防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害，C正確；D、由題圖可知，肺類器官A和B細胞是由肺上皮干細胞分化而來，細胞分化的實質是基因的選擇性表達，所以肺類器官A和B細胞中的DNA相同，RNA和蛋白質存在差異，D正確。故選A。8.細胞融合技術在植物、動物、微生物領域都取得了一系列成果，如白菜一甘藍、單克隆抗體、利用光合細菌與嗜熱菌選育出了耐高溫的光合細菌等。下列有關敘述正確的是（）A.兩種細胞完成細胞融合的標志是細胞核的融合B.在制備原生質體時，細胞培養液的滲透壓應等于或略高于細胞內滲透壓C.將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經誘導后融合的細胞即為雜交瘤細胞D.植物體細胞雜交技術屬于有性雜交，包括細胞融合和植物組織培養技術〖答案〗B〖祥解〗細胞融合的理論基礎是細胞膜具有一定的流動性，動物細胞融合特有的方法是用滅活的病毒誘導融合?！驹斘觥緼、植物細胞和細菌細胞融合完成的標志是新細胞壁的形成，A錯誤；B、在制備原生質體時，處于高滲或等滲溶液中，可以保護原生質體不因吸水過多而漲破，B正確；C、將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經誘導后融合的細胞有多種類型，可經過篩選獲得雜交瘤細胞，C錯誤；D、植物體細胞雜交技術是一項無性繁殖技術，D錯誤。故選B9.大花蕙蘭花色艷美，花期較長，且多在春節期間開放，具有極高的觀賞價值。大花蕙蘭多為雜交品種，種子繁殖無法保持其品種特性。使用組織培養技術將獲取的大花蕙蘭莖尖在短期內大量繁殖并保持其優良特性。下列敘述正確的是（）A.對莖尖進行植物組織培養，可獲得抗病毒的試管苗B.誘導愈傷組織形成時需要每日給予適當時間的光照C.脫分化和再分化階段需改變培養基中植物激素的比例D.進行組織培養前需要用纖維素酶和果膠酶處理莖尖〖答案〗C【詳析】A、對莖尖進行植物組織培養，可獲得不含有病毒的脫毒苗，該試管苗不能抗病毒，A錯誤；B、誘導愈傷組織形成時一般不需要光照，B錯誤；C、生長素與細胞分裂素的濃度、比例等都會影響植物細胞的發育方向，C正確；D、進行組織培養前需要對莖尖消毒處理，D錯誤。故選C。10.Cre酶是一種重組酶，LoxP是能被Cre酶識別的特異DNA序列。Cre/LoxP重組酶系統能夠實現特異位點的基因敲除、基因插入等操作。一般而言，當一條DNA鏈上存在兩個相同的LoxP序列且方向相同時，Cre酶能有效切除兩個位點間的DNA序列，如圖所示。下列說法正確的是（）A.Cre酶能將兩個核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開B.無Cre酶存在的細胞因STOP的作用而無法發出熒光C.當有兩個相同的LoxP序列時Cre酶就能有效切除一個D.啟動子能啟動綠色熒光基因翻譯熒光蛋白的過程〖答案〗B〖祥解〗基因的表達包括轉錄和翻譯兩個步驟，轉錄是指以DNA的一條鏈為模板，按照堿基互補配對原則，合成RNA的過程。翻譯是指以mRNA為模板，合成具有一定氨基酸排列順序的蛋白質的過程?！驹斘觥緼、結合題意可知，Cre酶能將特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，A錯誤；B、題意顯示，當一條DNA鏈上存在兩個相同的LoxP序列且方向相同時，Cre酶能有效切除兩個位點間的DNA序列，圖中的終止子會被切除，若無Cre酶存在，則圖中STOP的作用會導致熒光蛋白基因不能表達，進而無法發出熒光，B正確；C、當有兩個相同的LoxP序列且方向相同時，Cre酶就能有效切除兩個位點間的DNA序列，包括其中的一個LoxP，C錯誤；D、啟動子能啟動綠色熒光基因的轉錄過程，D錯誤。故選B。11.施一公院士團隊因對“剪接體的結構與分子機理研究”的突出貢獻獲得陳嘉庚生命科學獎。剪接體主要是由RNA和蛋白質組成，其作用是對最初轉錄產物加工，除去一些片段，并將剩余片段連接起來，形成成熟RNA。真核細胞中的基因表達過程為①轉錄②剪接③翻譯三步，具體過程如下圖所示。據圖分析下列說法錯誤的是（）A.剪接體發揮作用的過程中涉及磷酸二酯鍵的斷裂和形成B.剪接體剪接位置出現錯誤，不會導致基因序列發生改變C.圖中③翻譯時，核糖體在信使RNA上從左向右移動D.剪接體具有限制性核酸內切酶和DNA連接酶的雙重功能〖答案〗D〖祥解〗DNA連接酶作用于磷酸二酯鍵，作用對象為DNA分子片段，形成重組DNA分子；DNA聚合酶作用于磷酸二酯鍵，作用對象為脫氧核苷酸，形成子代DNA分子。【詳析】A、RNA的核糖核苷酸之間由磷酸二酯鍵連接，剪接體發揮作用的過程中涉及磷酸二酯鍵的斷裂和形成，A正確；B、剪接體剪接的是RNA，剪接位置出現錯誤，不會導致基因序列發生改變，B正確；C、根據核糖體上的兩個tRNA可知，核糖體在信使

RNA

上從左向右移動，C正確；D、限制性核酸內切酶和

DNA

連接酶的作用對象是DNA，剪接體剪接的是RNA，D錯誤。故選D。12.下圖為數字PCR技術的原理示意圖，下列相關敘述錯誤的是（）A.PCR每一循環包括變性、復性（退火）和延伸三步B.每個反應單位中都含有耐高溫的RNA聚合酶C.每個反應單位有無熒光取決于是否含有靶分子D.數字PCR技術有利于提高病原體檢測的靈敏度〖答案〗B【詳析】A、PCR技術中的每個循環由變性、退火（復性）、延伸三個基本反應步驟構成，A正確；B、每個反應單位中都含有耐高溫的DNA聚合酶，催化子鏈的延伸過程，B錯誤；C、熒光的出現是熒光探針水解導致的，熒光探針將首先與模板DNA的相應區段結合（靶分子），隨著DNA復制延伸至熒光探針部位，導致熒光探針的水解進而產生熒光，顯然，每個反應單位有無熒光取決于是否含有靶分子，C正確；D、根據熒光是否出現能檢測目標DNA的存在，因此數字PCR技術更有利于提高病原體檢測的靈敏度，D正確。故選B。二、綜合題（每空2分，共52分）13.對廚余垃圾正確分類是減少細菌滋生污染環境的重要保障。某研究小組從一餐廚垃圾處理廠分離了能高效降解淀粉、脂肪等的細菌菌株并進行擴大培養和篩選，部分操作流程如下，請分析回答：（1）該研究小組從餐廚垃圾處理廠分離出目的菌種說明___________。（2）實驗室中，配置好的培養基通常采取___________方式進行滅菌；倒平板時，防止雜菌污染的操作有___________（寫出兩點）。（3）若以上流程圖是篩選降解淀粉的微生物的培養基，則應___________（加入/不加入）葡萄糖為微生物提供能源物質。鑒別降解脂肪的微生物的培養基中可以加入___________作為指示劑。（4）進行擴大培養的培養基與培養皿中的培養基，成分上的主要區別是___________。（5）經過步驟③，培養皿中出現了3種形態、顏色不一的菌落，這些菌落可以在此培養基上生長的重要因素之一是___________,這些菌落之間存在___________的種間關系。（6）菌落甲與乙周圍都產生了透明圈（白色表示無藍色，深色表示藍色），產生透明圈的原因是___________?！即鸢浮剑?）尋找目的菌種要根據它對生存環境的要求到相應的環境中去尋找（2）①.高壓蒸汽滅菌（濕熱滅菌）②.在超凈工作臺中操作；拔掉棉塞后，錐形瓶口通過酒精燈火焰進行灼燒滅菌；左手將培養皿打開一條縫，右手倒培養基，及時蓋上培養皿皿蓋；在酒精燈火焰旁倒平板（3）①.不加入②.蘇丹Ⅲ染液（4）培養皿中是固體培養基，需要加入瓊脂（5）①.可以獲得生存必需的碳源（有機物）或可以分解淀粉、脂肪②.種間競爭（6）淀粉被細菌分解后，不能被碘液染色，從而形成透明圈【小問1詳析】尋找目的菌種要根據它對生存環境的要求到相應的環境中去尋找，廚余垃圾富含淀粉、脂肪等物質，因此可從餐廚垃圾處理廠分離出目的菌種（高效降解淀粉、脂肪等的細菌菌株）?！拘?詳析】配置好的培養基通常采取高壓蒸汽滅菌（濕熱滅菌）；倒平板時，為防止雜菌污染，可在超凈工作臺中操作；拔掉棉塞后，錐形瓶口通過酒精燈火焰進行灼燒滅菌；左手將培養皿打開一條縫，右手倒培養基，及時蓋上培養皿皿蓋；在酒精燈火焰旁倒平板等?！拘?詳析】以上流程圖是篩選降解淀粉的微生物的培養基，淀粉可作為碳源，因此培養基中不加入葡萄糖為微生物提供能源物質。脂肪可被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色，因此在鑒別降解脂肪的微生物的培養基中可以加入蘇丹Ⅲ染液作為指示劑?！拘?詳析】培養基M是擴大培養過程，可增加微生物的濃度，擴大培養的培養基為液體培養基；通過③接種到選擇培養基上，該過程是為了篩選分離高效降解淀粉、脂肪等的細菌菌株，即培養皿中的培養基為固體培養基，需要添加凝固劑瓊脂?！拘?詳析】選擇培養基上有淀粉和脂肪，經過步驟③，培養皿中出現了3種形態、顏色不一的菌落，說明這些菌落可以獲得生存必需的碳源（有機物）或可以分解淀粉、脂肪。這些菌落在空間和資源上相互競爭，因此種間關系為為種間競爭?！拘?詳析】淀粉與碘液變藍，淀粉被細菌分解后，不能被碘液染色，從而形成透明圈，菌落甲與乙可分解淀粉，因此周圍都產生了透明圈。14.下圖為動物細胞培養的基本過程示意圖。請回答下列問題：（1）培養時先要剪碎，然后用________酶分散細胞，制成B瓶中的細胞懸液。將細胞懸液轉入C瓶中進行的初次培養稱為________。（2）C、D瓶中的培養液為保證無菌、無毒的環境，需要添加一定量的________。培養過程中還需要提供O2和CO2等氣體環境，CO2的作用主要是________。（3）動物細胞體外培養時，通常要在培養基中補充一定濃度的某些物質。下圖是血清對正常細胞和癌細胞培養影響的實驗結果。據圖可知，培養________細胞一定需要添加血清。〖答案〗（1）①.胰蛋白（或膠原蛋白）②.原代培養（2）①.抗生素②.維持培養液的pH（3）正?！枷榻狻絼游锛毎囵B的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養?！拘?詳析】動物細胞培養時先要剪碎，然后用胰蛋白酶或膠原蛋白酶分散細胞，制成B瓶中的細胞懸液，將細胞懸液轉入C瓶中進行的初次培養稱為原代培養。小問2詳析】C、D瓶中的培養液為保證無菌、無毒的環境，需要添加一定量的抗生素；培養過程中還需要提供O2和CO2等氣體環境，其中CO2的作用主要是維持培養液的pH。【小問3詳析】分析曲線圖：是否添加血清對于癌細胞的增殖影響不大，而對于正常細胞增殖影響很大，故培養正常細胞一定需要添加血清。15.某病毒是一種單鏈RNA病毒。該病毒的核酸檢測采用“實時熒光定量RT-PCR”技術，通常在1～2h內即可得到檢測結果。此方法是PCR技術和熒光檢測技術的結合，利用熒光染料或熒光標記的特異性探針，對PCR產物進行檢測分析。步驟如下：（1）利用樣本中提取的RNA獲得cDNA，過程①使用________酶。需要將樣本中的RNA經過過程①形成cDNA后再進行PCR擴增的原因是_____________。（2）PCR技術一般要經歷三十多次循環，每次循環可以分為變性、復性和延伸三步，每一個步驟都要控制好相應的溫度，延伸的溫度________(填“大于”“小于”或“等于”)復性的溫度，而________(填“大于”“小于”或“等于”)變性的溫度。在循環之前，常要進行一次________，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。（3）過程②中對cDNA序列進行擴增，需設計兩種引物。下圖為cDNA的部分序列，請問兩種引物的結合位置是________。（4）在檢測過程中，隨著PCR的進行，反應產物不斷累積，“雜交雙鏈”熒光信號的強度也等比例增加，為了保證檢測結果的準確性，一般要達到或超過閾值時才能判斷為陽性，最終確診。雖然RT-PCR技術是當前被廣泛認可的檢測手段之一，但仍然存在有“假陰性”現象，結合上述內容，分析可能產生“假陰性”的因素有________(填字母)。a．取樣不規范導致所獲樣本量不足b．樣本運輸中出現了損壞c．檢測樣本被污染d．病毒相應關鍵序列發生了改變〖答案〗（1）①.逆轉錄##反轉錄②.PCR擴增必須以DNA為模板，RNA不能作為PCR擴增的模板（2）①.大于②.小于③.預變性（3）Ⅱ和Ⅲ（4）abcd【小問1詳析】利用樣本中提取的RNA獲得cDNA屬于逆轉錄的過程，故需要逆轉錄酶的催化。PCR擴增必須以DNA為模板，RNA不能作為PCR擴增的模板，所以需要將樣本中的RNA經過逆轉錄的過程合成cDNA?！拘?詳析】延伸的溫度為72℃左右，復性的溫度為50℃左右，變性的溫度一般為90℃以上，所以延伸的溫度大于復性的溫度，小于變性的溫度。為了讓DNA雙鏈充分解聚，與引物更好地結合，在循環之前，常要進行一次預變性。以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。【小問3詳析】在引物作用下，DNA聚合酶從引物3’端開始延伸DNA鏈，且DNA分子中互補的兩條鏈均表現為反向平行關系，所以引物的結合部位是DNA鏈的3’′端，即引物所處的位置是為Ⅱ和Ⅲ?！拘?詳析】a取樣不規范導致所獲樣本量不足，會使得熒光信號的強度達不到閾值，a正確；b樣本運輸中出現了損壞，也會影響PCR過程中DNA的擴增，使熒光信號的強度達不到閾值，b正確；c檢測樣本被污染，會導致熒光信號的強度比例受影響，c正確；d病毒相應關鍵序列發生了改變，會影響引物與cDNA的結合，從而影響熒光信號的強度比例，d正確。故選abcd。16.害蟲損傷番茄的葉片后，葉片細胞的細胞壁能釋放出一種類激素物質，這種物質可以擴散到番茄的其他部位，誘導細胞內蛋白酶抑制劑基因表達，合成蛋白酶抑制劑，導致害蟲因不能消化食物而死亡。科學家利用轉基因技術把番茄的蛋白酶抑制劑基因轉移到玉米中，使玉米獲得了與番茄相似的抗蟲性狀，有效抵御了玉米螟對玉米的危害。請結合上面的材料回答下列問題：（1）轉移了番茄蛋白酶抑制劑基因的玉米合成番茄蛋白酶抑制劑的具體部位是________，合成的化合物還需要在________中加工才具有生物活性。（2）這種抗玉米螟玉米品種的培育技術屬于________技術，這種變異在生物學上稱為________。（3）在種植了這種轉基因玉米的農田中，雜草是否也會出現抗玉米螟性狀？原因是什么？______________________________?！即鸢浮剑?）①.核糖體②.內質網和高爾基體（2）①.轉基因②.基因重組（3）不會；不同物種之間存在生殖隔離，玉米的花粉不能傳遞給雜草（或會；蛋白酶抑制劑基因通過玉米的花粉傳遞給雜草，使雜草獲得抗蟲基因，從而表現出抗蟲性狀）〖祥解〗基因重組是指在生物體進行有性生殖的過程中，控制不同性狀的非等位基因重新組合，包括兩種類型：①自由組合型：減數第一次分裂后期，隨著非同源染色體自由組合，非同源染色體上的非等位基因也自由組合．②交叉互換型：減數第一次分裂前期（四分體），基因隨著同源染色體的非等位基因的交叉互換而發生重組。此外，某些細菌（如肺炎雙球菌轉化實驗）和在人為作用（基因工程）下也能產生基因重組。【小問1詳析】番茄蛋白酶抑制劑的化學本質為蛋白質，其合成部位為核糖體，但還需要在內質網、高爾基體中加工才具有生物活性。【小問2詳析】結合題意信息可知，抗玉米螟玉米品種的培育運用的是轉基因技術，該技術的原理是基因重組，能克服遠緣雜交不親和的障礙。【小問3詳析】在種植了這種轉基因玉米的農田中，雜草一般不會出現抗玉米螟的性狀，因為玉米和雜草之間存在生殖隔離，因而不能傳遞給雜草。天津市部分學校2023-2024學年高二下學期綜合實踐練習（二）一、選擇題：（每題只有一個最佳選項，每題4分，共48分）1.某公司發現了一種源自松露的甜味蛋白，隨后他們利用酵母菌通過發酵工程來生產該甜味蛋白。關于此技術，下列敘述錯誤的是（）A.為保證發酵過程的正常進行，可在發酵液中加入適量抗生素防止雜菌污染B.發酵過程中適當提高葡萄糖溶液濃度有利于酵母菌的生長繁殖C.借助轉基因技術選育高產甜味蛋白的酵母菌菌種是發酵工程的中心環節D.發酵結束后，可破碎細胞，采用鹽析、離心等方法從發酵液中提取甜味蛋白〖答案〗C〖祥解〗發酵工程是指采用現代工程技術手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產有用的產品，或直接把微生物應用于工業生產過程的一種新技術。發酵工程的內容包括菌種的選育、培養基的配制、滅菌、擴大培養和接種、發酵過程和產品的分離提純等方面?！驹斘觥緼、抗生素能殺死細菌，但不能殺死真菌，因此為保證發酵過程的正常進行，可在發酵液中加入適量抗生素防止雜菌污染，A正確；B、發酵過程中適當提高葡萄糖溶液濃度有利于酵母菌的生長繁殖，B正確；C、發酵工程的中心環節是發酵過程，C錯誤；D、發酵結束后，可破碎細胞，采用鹽析、離心等方法從發酵液中提取甜味蛋白，D正確。故選C。2.發酵產品的使用深入生活的方方面面。發酵工程可對細胞和細胞代謝產物進行工業化生產，傳統發酵技術大大豐富了食物的品種，充分體現了勞動人民的智慧。下列關于發酵工程和傳統發酵技術的說法，正確的是（）A.用發酵工程生產青霉素時，若發酵罐和培養基滅菌不徹底污染了雜菌，會因為某些雜菌分泌酶將青霉素分解掉而降低產量B.家庭制泡菜和變酸的葡萄酒表面長的菌膜分別是由酵母菌和醋酸菌形成，它們都是需氧型的原核生物C.發酵工程往往采用液體培養基進行發酵，發酵結束后會通過提取、分離和純化的措施來獲得單細胞蛋白產品D.與發酵工程相比，傳統發酵技術中菌種來源于多種天然微生物，發酵過程經過嚴格滅菌，所以產品質量較高且品質穩定〖答案〗A〖祥解〗發酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現代工程技術，規模化生產人類所需的產品，一般包括菌種的選育和培養、產物的分離和提純等方面。發酵工程在食品工業、醫藥工業及其他工農業生產上有重要的應用價值。【詳析】A、用發酵工程生產青霉素時，若發酵罐和培養基滅菌不徹底污染了雜菌，會因為某些雜菌分泌酶將青霉素分解掉而降低產量，需要嚴格滅菌，A正確；B、家庭制泡菜和變酸的葡萄酒表面長的菌膜分別是由酵母菌和醋酸菌形成，但是酵母菌是兼性厭氧的真核生物，B錯誤；C、發酵工程往往采用液體培養基進行發酵，發酵結束后會通過提取、分離和純化的措施來獲得細胞代謝物，單細胞蛋白指微生物菌體，可通過過濾、沉淀方法獲得，C錯誤；D、傳統發酵技術的微生物是天然微生物，并未經過嚴格滅菌，D錯誤。故選A。3.猴痘是一種病毒性人畜共患病，在人類中出現的癥狀與過去在天花患者身上所看到的癥狀相似，B6R蛋白是猴痘病毒的抗原。為制備抗B6R蛋白的單克隆抗體，研究人員進行了相關實驗，如圖所示，其中①~④表示細胞。下列敘述正確的是（）A.細胞①含有從小鼠的脾中得到的能產生特定抗體的B淋巴細胞B.誘導細胞①②融合的常用方法與誘導原生質體融合的方法相同C.可將抗體檢測呈陰性的雜交瘤細胞在體外條件下大規模培養D.圖中的培養瓶需要置于含有95%CO2和5%O2的混合氣體中培養〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斘觥緼、單克隆抗體制備過程中需要將產生特定抗體的漿細胞與骨髓瘤細胞融合，給小鼠注射B6R蛋白的目的是使小鼠針對該抗原產生特異性免疫，從而使體內出現能產生抗B6R蛋白抗體的漿細胞，因此從小鼠脾臟提取的細胞①含有能產生特定抗體的B淋巴細胞，A正確；B、誘導動物細胞融合特有的方法是滅活的病毒，因此誘導細胞①②融合的常用方法與誘導原生質體融合的方法不完全相同，B錯誤；C、抗體檢測呈陰性的雜交瘤細胞說明其產生的抗體不是所需的抗體，因此不能培養該雜交瘤細胞，應將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞在體外條件下大規模培養或注射到小鼠的腹腔內大量培養，C錯誤；D、圖中的培養瓶需要置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體中培養，D錯誤。故選A。4.為加速我國北方冬春季秸稈原位還田的腐化過程，研究人員以凍牛糞為材料篩選出耐低溫（10℃）的纖維素降解菌。已知剛果紅染料能與培養基中的纖維素形成紅色復合物，下列相關敘述中正確的是（）A.初篩菌種前，要利用固體培養基在37℃條件下擴大培養目標菌種B.應選擇菌落直徑與周圍透明圈直徑比值大的菌落進行純化C.用于篩選的培養基是加入剛果紅染料的牛肉膏蛋白胨培養基D.選用凍牛糞為材料與其富含纖維素及含耐低溫微生物有關〖答案〗D〖祥解〗剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不與水解后的纖維二糖、葡萄糖等發生這種反應。當我們在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時，剛果紅與纖維素形成紅色復合物；而當纖維素被纖維素分解菌分解后，復合物就無法形成，培養基中會出現以這些菌為中心的透明圈?！驹斘觥緼、初篩菌種前，要利用液體培養基在10℃條件下擴大培養目標菌種，A錯誤；B、由于剛果紅染料與纖維素形成紅色復合物，因此出現以因纖維素降解菌為中心的透明圈，菌落直徑與透明圈直徑比值越小，分解纖維素的能力越強，B錯誤；C、用于篩選的培養基以纖維素為唯一的碳源的固體培養基，加入剛果紅染料是鑒別作用，C錯誤；D、篩選耐低溫的纖維素降解菌需要到其所生活的環境中尋找，凍牛糞中富含纖維素，有很多微生物，凍牛糞因溫度低，故其內的微生物是耐低溫微生物，D正確。故選D。5.P蛋白是非洲豬瘟病毒（ASFV）的重要抗原。為了能夠快速診斷ASFV，研究者制備相應的雜交瘤細胞R3E9。有關敘述合理的是（）A.B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合獲得的都是雜交瘤細胞B.雜交瘤細胞在培養過程中需要加入95%的O2和5%的CO2C.經過克隆化培養和抗體檢測可篩選出能夠產生P蛋白的R3E9D.體外培養R3E9可以獲得針對P蛋白的單克隆抗體〖答案〗D〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內產生具有免疫能力的B淋巴細胞；利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，用特定的選擇培養基進行篩選，得到雜交瘤細胞；再進行克隆化培養和抗體檢測，多次篩選后得到足夠數量的能分泌所需抗體的細胞；最后將所需的雜交瘤細胞在體外或小鼠腹腔內培養，從細胞培養液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。【詳析】A、若只考慮細胞的兩兩融合，B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后可得到雜交瘤細胞、B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞3種融合細胞，A錯誤；B、雜交瘤細胞在傳代培養中需要加入95%的空氣和5%的CO2，B錯誤；C、克隆化培養和抗體檢測可篩選出能夠產生抗P蛋白抗體的R3E9，C錯誤；D、通過體外培養雜交瘤細胞可獲得特定的單克隆抗體，D正確。故選D。6.關于制備單克隆抗體的過程，下列敘述錯誤的是（）A.為獲得足量相應的B細胞，可多次給小鼠注射特定抗原B.細胞融合前，已免疫的脾細胞不需要經過原代培養擴大C.用PEG誘導細胞融合后，可加入過量培養基終止融合D.雜交瘤細胞在體外培養時，常會發生接觸抑制現象〖答案〗D〖祥解〗制備的抗人絨毛膜促性腺激素（HCG）單克隆抗體，可用于早孕檢測，其制備過程：提取HCG→將HCG注射至小鼠體內→獲取B淋巴細胞→B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合→篩選出雜交瘤細胞→克隆上述雜交瘤細胞，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞→體外或體內培養→單克隆抗體?！驹斘觥緼、制備單克隆抗體的過程中，需反復向小鼠體內注射特定抗原，刺激相應B淋巴細胞的產生，A正確；B、一般認為，已免疫的脾細胞(含漿細胞)中已含足夠數量的能產生特異性抗體的細胞，不需要通過原代培養擴大細胞數量，高度分化的細胞也不能通過原代培養擴大細胞數量，B正確；C、通過添加適宜濃度的PEG進行融合，在原生質體融合一定時間后，加入過量的培養基進行稀釋，稀釋的目的是降低PEG濃度，使其失去融合作用，C正確；D、雜交瘤細胞培養時不會出現接觸抑制現象，D錯誤。故選D。7.目前肺類器官主要有兩種培養方式：其一是誘導多能干細胞(iPS細胞)生成；其二是將肺上皮干細胞與篩選后的體細胞進行共培養(過程如圖所示)。下列敘述錯誤的是（）A.iPS細胞具有組織特異性，只能分化成特定的細胞或組織B.肺類裝配體的培養需要適宜的營養、溫度、pH等基本條件C.培養肺類裝配體時需定期更換培養液以便清除代謝廢物等D.肺類器官A和B細胞中的DNA相同，RNA和蛋白質存在差異〖答案〗A〖祥解〗胚胎干細胞必須從胚胎中獲取，這涉及倫理問題，因而限制了它在醫學上的應用。2006年，科學家通過體外誘導小鼠成纖維細胞，獲得了類似胚胎干細胞的一種細胞，將它稱為誘導多能干細胞(簡稱iPS細胞)，并用iPS細胞治療了小鼠的鐮狀細胞貧血?，F在，用iPS細胞治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領域的研究也取得了新進展。因為誘導過程無須破壞胚胎，而且iPS細胞可以來源于病人自身的體細胞，將它移植回病人體內后，理論上可以避免免疫排斥反應，所以科學家普遍認為iPS細胞的應用前景優于胚胎干細胞。【詳析】A、成體干細胞具有組織特異性，只能分化成特定的細胞或組織，iPS細胞類似胚胎干細胞，可以分化成各種細胞或組織，A錯誤；B、在體外培養動物細胞，需要滿足相應的條件，所以肺類裝配體的培養需要適宜的營養、溫度、pH等基本條件，B正確；C、培養肺類裝配體時需定期更換培養液以便清除代謝廢物等，防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害，C正確；D、由題圖可知，肺類器官A和B細胞是由肺上皮干細胞分化而來，細胞分化的實質是基因的選擇性表達，所以肺類器官A和B細胞中的DNA相同，RNA和蛋白質存在差異，D正確。故選A。8.細胞融合技術在植物、動物、微生物領域都取得了一系列成果，如白菜一甘藍、單克隆抗體、利用光合細菌與嗜熱菌選育出了耐高溫的光合細菌等。下列有關敘述正確的是（）A.兩種細胞完成細胞融合的標志是細胞核的融合B.在制備原生質體時，細胞培養液的滲透壓應等于或略高于細胞內滲透壓C.將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經誘導后融合的細胞即為雜交瘤細胞D.植物體細胞雜交技術屬于有性雜交，包括細胞融合和植物組織培養技術〖答案〗B〖祥解〗細胞融合的理論基礎是細胞膜具有一定的流動性，動物細胞融合特有的方法是用滅活的病毒誘導融合?！驹斘觥緼、植物細胞和細菌細胞融合完成的標志是新細胞壁的形成，A錯誤；B、在制備原生質體時，處于高滲或等滲溶液中，可以保護原生質體不因吸水過多而漲破，B正確；C、將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經誘導后融合的細胞有多種類型，可經過篩選獲得雜交瘤細胞，C錯誤；D、植物體細胞雜交技術是一項無性繁殖技術，D錯誤。故選B9.大花蕙蘭花色艷美，花期較長，且多在春節期間開放，具有極高的觀賞價值。大花蕙蘭多為雜交品種，種子繁殖無法保持其品種特性。使用組織培養技術將獲取的大花蕙蘭莖尖在短期內大量繁殖并保持其優良特性。下列敘述正確的是（）A.對莖尖進行植物組織培養，可獲得抗病毒的試管苗B.誘導愈傷組織形成時需要每日給予適當時間的光照C.脫分化和再分化階段需改變培養基中植物激素的比例D.進行組織培養前需要用纖維素酶和果膠酶處理莖尖〖答案〗C【詳析】A、對莖尖進行植物組織培養，可獲得不含有病毒的脫毒苗，該試管苗不能抗病毒，A錯誤；B、誘導愈傷組織形成時一般不需要光照，B錯誤；C、生長素與細胞分裂素的濃度、比例等都會影響植物細胞的發育方向，C正確；D、進行組織培養前需要對莖尖消毒處理，D錯誤。故選C。10.Cre酶是一種重組酶，LoxP是能被Cre酶識別的特異DNA序列。Cre/LoxP重組酶系統能夠實現特異位點的基因敲除、基因插入等操作。一般而言，當一條DNA鏈上存在兩個相同的LoxP序列且方向相同時，Cre酶能有效切除兩個位點間的DNA序列，如圖所示。下列說法正確的是（）A.Cre酶能將兩個核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開B.無Cre酶存在的細胞因STOP的作用而無法發出熒光C.當有兩個相同的LoxP序列時Cre酶就能有效切除一個D.啟動子能啟動綠色熒光基因翻譯熒光蛋白的過程〖答案〗B〖祥解〗基因的表達包括轉錄和翻譯兩個步驟，轉錄是指以DNA的一條鏈為模板，按照堿基互補配對原則，合成RNA的過程。翻譯是指以mRNA為模板，合成具有一定氨基酸排列順序的蛋白質的過程。【詳析】A、結合題意可知，Cre酶能將特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，A錯誤；B、題意顯示，當一條DNA鏈上存在兩個相同的LoxP序列且方向相同時，Cre酶能有效切除兩個位點間的DNA序列，圖中的終止子會被切除，若無Cre酶存在，則圖中STOP的作用會導致熒光蛋白基因不能表達，進而無法發出熒光，B正確；C、當有兩個相同的LoxP序列且方向相同時，Cre酶就能有效切除兩個位點間的DNA序列，包括其中的一個LoxP，C錯誤；D、啟動子能啟動綠色熒光基因的轉錄過程，D錯誤。故選B。11.施一公院士團隊因對“剪接體的結構與分子機理研究”的突出貢獻獲得陳嘉庚生命科學獎。剪接體主要是由RNA和蛋白質組成，其作用是對最初轉錄產物加工，除去一些片段，并將剩余片段連接起來，形成成熟RNA。真核細胞中的基因表達過程為①轉錄②剪接③翻譯三步，具體過程如下圖所示。據圖分析下列說法錯誤的是（）A.剪接體發揮作用的過程中涉及磷酸二酯鍵的斷裂和形成B.剪接體剪接位置出現錯誤，不會導致基因序列發生改變C.圖中③翻譯時，核糖體在信使RNA上從左向右移動D.剪接體具有限制性核酸內切酶和DNA連接酶的雙重功能〖答案〗D〖祥解〗DNA連接酶作用于磷酸二酯鍵，作用對象為DNA分子片段，形成重組DNA分子；DNA聚合酶作用于磷酸二酯鍵，作用對象為脫氧核苷酸，形成子代DNA分子。【詳析】A、RNA的核糖核苷酸之間由磷酸二酯鍵連接，剪接體發揮作用的過程中涉及磷酸二酯鍵的斷裂和形成，A正確；B、剪接體剪接的是RNA，剪接位置出現錯誤，不會導致基因序列發生改變，B正確；C、根據核糖體上的兩個tRNA可知，核糖體在信使

RNA

上從左向右移動，C正確；D、限制性核酸內切酶和

DNA

連接酶的作用對象是DNA，剪接體剪接的是RNA，D錯誤。故選D。12.下圖為數字PCR技術的原理示意圖，下列相關敘述錯誤的是（）A.PCR每一循環包括變性、復性（退火）和延伸三步B.每個反應單位中都含有耐高溫的RNA聚合酶C.每個反應單位有無熒光取決于是否含有靶分子D.數字PCR技術有利于提高病原體檢測的靈敏度〖答案〗B【詳析】A、PCR技術中的每個循環由變性、退火（復性）、延伸三個基本反應步驟構成，A正確；B、每個反應單位中都含有耐高溫的DNA聚合酶，催化子鏈的延伸過程，B錯誤；C、熒光的出現是熒光探針水解導致的，熒光探針將首先與模板DNA的相應區段結合（靶分子），隨著DNA復制延伸至熒光探針部位，導致熒光探針的水解進而產生熒光，顯然，每個反應單位有無熒光取決于是否含有靶分子，C正確；D、根據熒光是否出現能檢測目標DNA的存在，因此數字PCR技術更有利于提高病原體檢測的靈敏度，D正確。故選B。二、綜合題（每空2分，共52分）13.對廚余垃圾正確分類是減少細菌滋生污染環境的重要保障。某研究小組從一餐廚垃圾處理廠分離了能高效降解淀粉、脂肪等的細菌菌株并進行擴大培養和篩選，部分操作流程如下，請分析回答：（1）該研究小組從餐廚垃圾處理廠分離出目的菌種說明___________。（2）實驗室中，配置好的培養基通常采取___________方式進行滅菌；倒平板時，防止雜菌污染的操作有___________（寫出兩點）。（3）若以上流程圖是篩選降解淀粉的微生物的培養基，則應___________（加入/不加入）葡萄糖為微生物提供能源物質。鑒別降解脂肪的微生物的培養基中可以加入___________作為指示劑。（4）進行擴大培養的培養基與培養皿中的培養基，成分上的主要區別是___________。（5）經過步驟③，培養皿中出現了3種形態、顏色不一的菌落，這些菌落可以在此培養基上生長的重要因素之一是___________,這些菌落之間存在___________的種間關系。（6）菌落甲與乙周圍都產生了透明圈（白色表示無藍色，深色表示藍色），產生透明圈的原因是___________。〖答案〗（1）尋找目的菌種要根據它對生存環境的要求到相應的環境中去尋找（2）①.高壓蒸汽滅菌（濕熱滅菌）②.在超凈工作臺中操作；拔掉棉塞后，錐形瓶口通過酒精燈火焰進行灼燒滅菌；左手將培養皿打開一條縫，右手倒培養基，及時蓋上培養皿皿蓋；在酒精燈火焰旁倒平板（3）①.不加入②.蘇丹Ⅲ染液（4）培養皿中是固體培養基，需要加入瓊脂（5）①.可以獲得生存必需的碳源（有機物）或可以分解淀粉、脂肪②.種間競爭（6）淀粉被細菌分解后，不能被碘液染色，從而形成透明圈【小問1詳析】尋找目的菌種要根據它對生存環境的要求到相應的環境中去尋找，廚余垃圾富含淀粉、脂肪等物質，因此可從餐廚垃圾處理廠分離出目的菌種（高效降解淀粉、脂肪等的細菌菌株）。【小問2詳析】配置好的培養基通常采取高壓蒸汽滅菌（濕熱滅菌）；倒平板時，為防止雜菌污染，可在超凈工作臺中操作；拔掉棉塞后，錐形瓶口通過酒精燈火焰進行灼燒滅菌；左手將培養皿打開一條縫，右手倒培養基，及時蓋上培養皿皿蓋；在酒精燈火焰旁倒平板等?！拘?詳析】以上流程圖是篩選降解淀粉的微生物的培養基，淀粉可作為碳源，因此培養基中不加入葡萄糖為微生物提供能源物質。脂肪可被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色，因此在鑒別降解脂肪的微生物的培養基中可以加入蘇丹Ⅲ染液作為指示劑?！拘?詳析】培養基M是擴大培養過程，可增加微生物的濃度，擴大培養的培養基為液體培養基；通過③接種到選擇培養基上，該過程是為了篩選分離高效降解淀粉、脂肪等的細菌菌株，即培養皿中的培養基為固體培養基，需要添加凝固劑瓊脂。【小問5詳析】選擇培養基上有淀粉和脂肪，經過步驟③，培養皿中出現了3種形態、顏色不一的菌落，說明這些菌落可以獲得生存必需的碳源（有機物）或可以分解淀粉、脂肪。這些菌落在空間和資源上相互競爭，因此種間關系為為種間競爭?！拘?詳析】淀粉與碘液變藍，淀粉被細菌分解后，不能被碘液染色，從而形成透明圈，菌落甲與乙可分解淀粉，因此周圍都產生了透明圈。14.下圖為動物細胞培養的基本過程示意圖。請回答下列問題：（1）培養時先要剪碎，然后用________酶分散細胞，制成B瓶中的細胞懸液。將細胞懸液轉入C瓶中進行的初次培養稱為________。（2）C、D瓶中的培養液為保證無菌、無毒的環境，需要添加一定量的________。培養過程中還需要提供O2和CO2等氣體環境，CO2的作用主要是________。（3）動物細胞體外培養時，通常要在培養基中補充一定濃度的某些物質。下圖是血清對正常細胞和癌細胞培養影響的實驗結果。據圖可知，培養________細胞一定需要添加血清。〖答案〗（1）①.胰蛋白（或膠原蛋白）②.原代培養（2）①.抗生素②.維持培養液的pH（3）正?！枷榻狻絼游锛毎囵B的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養?！拘?詳析】動物細胞培養時先要剪碎，然后用胰蛋白酶或膠原蛋白酶分散細胞，制成B瓶中的細胞懸液，將細胞懸液轉入C瓶中進行的初次培養稱為原代培養。小問2詳析】C、D瓶中的培養液為保證無菌、無毒的環境，需要添加一定量的抗生素；培養過程中還需要提供O2和CO2等氣體環境，其中CO2的作用主要是維持培養液的pH。【小問3詳析】分析曲線圖：是否添加血清對于癌細胞的增殖影響不大，而對于