第第頁人皰疹病毒8型PCR試劑盒說明書人皰疹病毒8型PCR試劑盒說明書【產品名稱】商品名稱：人皰疹病毒8型PCR試劑盒Name：HumanHerpesvirus8（HHV8）PCRKit【包裝規格】50次/盒【產品及特點】人皰疹病毒8型（HumanHerpesvirus8,HHV8）是從淋巴增生性疾病和艾滋病患者淋巴細胞中培養獲得的一種新病毒，可通過唾液飛沫及密切接觸（如接吻，共用餐、飲器具等）、輸血傳播。除免疫低下（如先天性免疫缺陷、艾滋病、長期服用免疫抑制劑等）外，絕大多數人感染后終身都不會產生明顯癥狀；免疫低下者，如HIV感染者，當人體特異性免疫被減弱至肯定程度時，潛匿的病毒可被激活并產生急性感染癥狀，此時會顯現間質性肺炎、腦炎、腦膜炎、肝炎及多器官衰竭等癥狀，活化的病毒可大規模感染T淋巴細胞，使免疫功能進一步減弱，該病毒對人體健康有較大影響，因此檢測人皰疹病毒8型DNA具有緊要意義。本產品就是依據PCR原理開發的、檢測此病毒的試劑盒。本產品具有下列特點：1.即開即用，用戶只需要供應病毒DNA模板。2.引物經過精心優化，專一性強，只擴增人皰疹病毒8型病毒DNA，與其他病毒沒有交叉反應。3.供應陽性對照，便于區分假陰性樣品。4.PCRmix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。5.本試劑盒充分做40μL體系的PCR50次，但只能用于科研。【規格及成分】成份編號十孔盒包裝PCRMagicMix3.0639811mL（紅蓋）超純水1093501mL（亮黃色）人皰疹病毒8型PCR引物混合液3026yw100μL（白蓋）人皰疹病毒8型PCR陽性對照（1×10E8拷貝/μL）939813026pc50μL（黃蓋）【運輸及保管】低溫運輸，20℃保管，保管期限為一年。人皰疹病毒8型PCR陽性對照需要單獨放置，不要污染其他試劑。【自備試劑】樣品DNA。【使用方法】一、樣品DNA的制備用自選方法純化N+2個樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。2.假如有N個樣品，則需做N+2個提取，包含一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是人皰疹病毒8型PCR陽性對照的1000倍稀釋液，其總體積等于試劑盒所需的樣品量，樣品制備陰性對照是直接用水。二、設置PCR反應（40μL體系）3.對N+2個樣品，在PCR時需要加添一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照，故需要設置N+4個反應。在N+4個PCR管中分別加入下列成分：成分N+2個樣品管PCR陰性對照PCR陽性對照PCRMagicMix3.0各20μL20μL20μL人皰疹病毒8型通用PCR引物混合液各2μL2μL2μLN+2個樣品DNA模板各18μLPCR陰性對照（水）18μLPCR陽性對照（人皰疹病毒6型通用PCR陽性對照的1000倍稀釋液）18μL4.按下表設置PCR反應:過程溫度時間預變性95℃5minPCR反應（35個循環）95℃15sec55℃15sec82℃30sec最終延長82℃10min三、電泳檢測5.取5μLPCR產物電泳進行檢測。本產品供應的PCRMix在擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加loadingbuffer。預期的PCR產物長度為481b