2025屆上海市寶山區高三生物第一學期期末監測試題注意事項：1．答卷前，考生務必將自己的姓名、準考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型（B）填涂在答題卡相應位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2．作答選擇題時，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應題目選項的答案信息點涂黑；如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3．非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答，答案必須寫在答題卡各題目指定區域內相應位置上；如需改動，先劃掉原來的答案，然后再寫上新答案；不準使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4．考生必須保證答題卡的整潔。考試結束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．如圖為某二倍體動物細胞分裂的模式圖（不考慮染色體畸變）。下列敘述正確的是（）A．該時期的細胞可以作為制作染色體組型的材料B．該圖表示的時期為有絲分裂后期C．若④⑤染色體上不含相同基因座位，則該細胞為次級精母細胞D．若②③染色體含有相同基因座位，且①⑤染色體某基因座位上分別含有A和a基因，造成這種現象的原因不可能是基因重組2．下表中人體不同細胞的壽命和分裂能力不同，以下說法錯誤的是（）細胞種類小腸上皮細胞癌細胞紅細胞白細胞壽命1?2天不死性120天5?7天能否分裂能能不能大多數不能A．白細胞的凋亡比紅細胞快，這與白細胞吞噬病原體有關B．癌細胞的無限增殖是由正常基因突變為原癌基因引起的C．通常情況下，細胞的分化程度越高，細胞分裂能力越弱D．小腸上皮細胞壽命最短，這與基因控制的凋亡有關3．下列有關細胞的物質基礎和結構基礎的敘述中，正確的是（）A．細胞中可以找到多糖與其他分子相結合的大分子B．向酶溶液中加入雙縮脲試劑，一定能產生紫色反應C．核糖體能合成多種蛋白質，溶酶體能合成多種水解酶D．原核細胞沒有線粒體，只能進行無氧呼吸4．下圖為一對等位基因控制的某遺傳病的家族系譜圖。下列敘述正確的是A．若該家族每代都有患者，則該病為顯性遺傳病B．若該病為常染色體顯性遺傳病，則圖中個體共有3種基因型C．若該病為伴X染色體顯性遺傳病，則正常情況下，Ⅲ中女性均患病D．若該病致病基因為位于XY染色體同源區段的顯性基因，則Ⅲ中可能出現患病男孩5．下列有關植物激素的敘述正確的是（）A．頂端優勢的原因是頂芽生長素濃度過高抑制了自身生長B．用一定濃度的秋水仙素或低溫處理植物都可以抑制植物有絲分裂后期細胞板形成，從而引起染色體數目加倍C．達爾文通過實驗驗證：吲哚乙酸在植物向光側和背光側分布不均勻是導致向光性的原因D．赤霉素和乙烯可分別促進種子萌發和果實的成熟6．下圖1是某遺傳病的家系圖。圖2是圖1中4個個體的基因檢測結果。下列有關敘述錯誤的是（）A．該病為伴X染色體隱性遺傳B．II3的致病基因來自I2C．II3與一正常人婚配，后代正常的概率是1/2D．該致病基因長度小于正常基因7．下列關于有機物的敘述中，正確的是()A．糖都是細胞內的能源物質 B．核酸中嘌呤數和嘧啶數相等C．磷脂存在于所有的活細胞中 D．細胞內運輸K＋和氨基酸的物質都是蛋白質8．（10分）物質X通過細胞膜的運輸速率與膜內外濃度差成正比，且不具有載體飽和效應。據此推斷物質X進出細胞的方式為（）A．自由擴散 B．主動運輸 C．協助擴散 D．胞吞和胞吐二、非選擇題9．（10分）請回答下列問題。（1）從微生物所能利用的氮源種類來看，一部分微生物是不需要利用氨基酸作為氮源的，它們能把_____（列舉兩例）等簡單氮源用于合成所需要的一切氨基酸，因而可稱為“氨基酸自養型生物”。（2）伊紅美藍培養基可用于飲用水大腸桿菌數目的測定，根據培養基上黑色菌落的數目推測大腸菌的數量。但單位體積飲用水中大腸桿菌數量相對較少，若直接將一定體積的自來水接種到培養基中，培養后可能無法得到菌落或菌落數目太少，可通過“濾膜法”解決這個問題，其操作思路是：_____。稀釋涂布平板法和______________________法是測定微生物數量更常用的兩種方法。（3）在固定化細胞實驗中，明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉等物質能作為包埋細胞載體的原因是______。在工業生產中，細胞的固定化是在嚴格_____條件下進行的。（4）為探究一種新型堿性纖維素酶去污效能，研究小組進行了不同類型洗衣粉實驗，結果如下圖。加酶洗衣粉中目前常用的四類酶制劑除纖維素酶外，還有_____（至少答兩類）。根據以上實驗結果，_____________（能/否）得出對污布類型2的去污力最強是因堿性纖維素酶所致，并說明原因_________。10．（14分）回答下面（一）、（二）兩個小題：（一）回答與制果汁、果酒、果醋有關的問題：（1）獼猴桃維生素C含量豐富，有“維C之王”的美譽。利用獼猴桃直接制成的獼猴桃汁較為渾濁，加入______之后，會出現絮狀物，說明含有較多的果膠。為獲得無色澄清的果汁，需要首先進行________________處理，然后再加入________________，將果膠分解為________________，使果汁澄清，同時提高出汁率。（2）制作出的獼猴桃汁，加入活化的酵母懸液，再加入________________，密封發酵，可以用來制作酒精含量較高、含糖量也高的獼猴桃酒。由于維生素C與2，4-二硝基苯肼作用可形成紅色產物，因此若要測定發酵產生的獼猴桃酒中維C的含量，你的方案是________________。（3）家庭制作的獼猴桃酒存放的過程中容易被醋桿菌污染。為防止變酸，你的建議是________________。（答兩點）（二）回答下列有關生態工程類型和技術的問題。（1）對城市生活垃圾進行減量化、無害化和資源化處理，將生活垃圾中的有機部分、人畜糞便等轉化成優質生態復合肥，是________________技術在城市生態系統中應用的具體體現。該技術能實現物質和能量的多級利用，提高能量的________________。（2）針對我國北方地區，一年只種一茬小麥，熱量有余，如果種兩茬，則積溫不足的問題，可以采用________________技術，除了解決上述問題，該技術還有________________優點。（3）在農村地區，要根據當地的土地資源、水資源等實際情況，合理優化種植業和畜牧業的產業結構。優化過程中需要針對當地的糧油肉蛋奶等的________________，以農業生態系統________________為基礎，盡量減少外部的化肥和農藥，以求最大的經濟效益和________________效應。（4）在礦山廢棄地，應該根據當地生態條件，積極發展草業、木業或林業的________________工程。11．（14分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學家欲獲得高效表達蛋白A的轉基因大腸桿菌作為微生物農藥，做了相關研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質粒，得到重組質粒，再將重組質粒置于經_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉基因大腸桿菌。（2）檢測發現，轉入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術。②圖2所示的4次PCR應該分別如何選擇圖1中所示的引物？請填寫以下表格（若選用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質粒和_________分別導入大腸桿菌，提取培養液中的蛋白質，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產物的生物活性，研究者將上述各組表達產物加入到長滿了植物病菌的培養基上，培養一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產物的生物活性大小。（4）作為微生物農藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發酵產物而不是轉蛋白A基因的大腸桿菌，其優點是_________。12．人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫用價值，只能從人血漿中制備。下圖是以基因工程技術獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。（1）為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術擴增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結合模板的位置及擴增方向，請用箭頭在方框內標出另一條引物的位置及擴增方向。（2）啟動子通常具有物種及組織特異性，構建在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA的載體，需要選擇的啟動子是_____________（填寫字母，單選）。A．人血細胞啟動子B．水稻胚乳細胞啟動子C．大腸桿菌啟動子D．農桿菌啟動子（3）利用農桿菌轉化水稻受體細胞的過程中，需添加酚類物質，其目的是____________。（4）人體合成的初始HSA多肽，需要經過膜系統加工形成正確的空間結構才有活性。與途徑Ⅱ相比，選擇途徑Ⅰ獲取rHSA的優勢是____________________________________。（5）為證明rHSA具有醫用價值，須確認rHSA與_________________的生物學功能一致。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

據圖分析可知：該二倍體細胞圖像為后期，有以下可能性：若④⑤和②③（X與Y染色體）為同源染色體，則為有絲分裂后期，若不是同源染色體，則為減數第二次分裂后期。【詳解】A、有絲分裂中期的細胞為制作染色體組型較為理想的材料，A錯誤；B、由以上分析可知，該細胞可能處于有絲分裂后期或減數第二次分裂后期，B錯誤；C、若④⑤染色體上不含相同基因座位，則其為非同源染色體，此細胞可能處于減數第二次分裂后期，但該生物性別未知，故該細胞可能為次級精母細胞或第一極體，C錯誤；D、若②③染色體含有相同基因座位，則其為同源染色體（X、Y），此細胞處于有絲分裂后期，①⑤染色體某基因座位上分別含有A和a基因，造成這種現象的原因不可能是基因重組，只能是基因突變，D正確。故選D。【點睛】本題考查有絲分裂與減數分裂過程的辨析，旨在考查考生獲取與處理信息的能力，掌握分裂過程是解題關鍵。2、B【解析】

細胞分化是指在個體發育中，由一個或一種細胞增殖產生的后代，在形態、結構和生理功能上發生穩定性差異的過程，實質是基因的選擇性表達，最終形成形態和功能不同的組織和細胞。【詳解】A、白細胞沒有細胞核，功能主要是吞噬病原體，因此更新速度快，A正確；B、癌細胞的無限增殖是由于原癌基因突變為癌基因，以及抑癌基因突變失去功能導致的，B錯誤；C、通常情況下，細胞的分化程度越高，其全能性就越低，細胞分裂能力就越弱，C正確；D、人體不同組織的細胞壽命不同，是由遺傳物質決定，與基因控制的衰老和凋亡有關，D正確。故選B。【點睛】原癌基因主要負責調節細胞周期，控制細胞生長和分裂的進程；抑癌基因主要阻止細胞不正常的增殖。細胞癌變的內因是原癌基因和抑癌基因發生突變，導致正常細胞的生長和分裂失控，使得正常細胞變成不受控制、惡性增殖的癌細胞。3、A【解析】

A、細胞膜表面的多糖可以和蛋白質結合形成糖蛋白，A正確；B、向化學本質是蛋白質的酶溶液中加入雙縮脲試劑能產生紫色反應，而向化學本質是RNA的酶溶液中加入雙縮脲試劑不能產生紫色反應，B錯誤；C、核糖體能合成多種蛋白質，而溶酶體不能合成多種水解酶，C錯誤；D、原核細胞中的醋酸菌細胞沒有線粒體，但含有與有氧呼吸有關的酶，能進行有氧呼吸，D錯誤。故選A。4、C【解析】

該圖中沒有典型的“有中生無或無中生有“典型圖譜，可假設不同的遺傳方式進行判斷，根據遺傳圖譜分析該圖顯示的遺傳病遺傳方式比較多，可能是常染色體顯性遺傳病、常染色體隱性遺傳病、伴X隱性遺傳病、伴X顯性遺傳病。【詳解】A、假如控制該病的等位基因是A、a，若該家族每代都有患者，則該病可能為顯性遺傳病，也可能為隱性遺傳病，A項錯誤。B、若該病為常染色體顯性遺傳病，則圖中個體共有2種基因型，即Aa和aa，B項錯誤。C、若該病為伴X染色體顯性遺傳病，根據遺傳圖可知，Ⅰ-2的基因型是XAXa，Ⅱ-2、Ⅱ-3的基因型均為XAY，所以正常情況下，Ⅲ中女性均患病，C項正確。D、若該病致病基因為位于XY染色體同源區段的顯性基因，根據遺傳圖可知，Ⅰ-2的基因型是XAXa，Ⅱ-2、Ⅱ-3的基因型均為XAYa，所以Ⅲ中不可能出現患病男孩，D項錯誤。故選C。5、D【解析】

生長素對植物的生長效應表現出兩重性，即低濃度促進生長，高濃度抑制生長。各種植物激素并不是孤立地起作用，而是多種激素相互作用共同調節；植物激素的概念：由植物體內產生，能從產生部位運輸到作用部位，對植物的生長發育有顯著影響的微量有機物。【詳解】A、頂端優勢是因頂芽產生的生長素積累在側芽而導致側芽生長受抑制，A錯誤；B、用一定濃度的秋水仙素或低溫處理植物都可以抑制植物有絲分裂前期紡錘體的形成，B錯誤；C、達爾文通過實驗驗證單側光照射使胚芽鞘的尖端產生某種刺激，當這種刺激傳遞到下部的伸長區時，會造成背光面比向光面生長快，因而出現向光性彎曲，C錯誤；D、赤霉素和乙烯分別能促進果實的發育和果實的成熟，D正確。故選D。6、C【解析】

根據圖1中Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ4可知該病為隱性遺傳病，根據圖2中電泳圖可知，Ⅱ4長度為1.0的基因屬于致病基因，則長度為2.1的為正常基因，據此可知，Ⅰ1只含正常基因，Ⅰ2既含正常基因又含致病基因，所以Ⅱ4的致病基因只來自Ⅰ2，故該病的遺傳方式為伴X隱性遺傳。Ⅰ2和II3均為攜帶者。【詳解】A、根據上述分析可知，該病為伴X染色體隱性遺傳，A正確；B、由于Ⅰ1無致病基因，則Ⅱ3的致病基因來自Ⅰ2，B正確；C、設致病基因為a，Ⅱ3（XAXa）與一正常人（XAY）婚配，后代正常（XA_）的概率是3/4，C錯誤；D、致病基因長度為1．0，正常基因長度為2．1，前者小于后者，D正確。故選C。【點睛】本題結合圖解，考查常見的人類遺傳病，要求考生識記幾種常見單基因遺傳病的類型及特點，能根據圖1和圖2判斷該遺傳病的遺傳方式及相應個體的基因型，再結合圖中信息準確判斷各選項。7、C【解析】

核酸包括DNA和RNA兩大類，DNA一般為雙鏈結構，RNA一般為單鏈結構，RNA包括mRNA、rRNA和tRNA三類。【詳解】A、纖維素作為細胞內的結構多糖，不參與細胞的能量供應，A錯誤；B、單鏈DNA和單鏈RNA分子中嘌呤數和嘧啶數不一定相等，B錯誤；C、磷脂是膜結構的組成成分，存在于所有的活細胞中，C正確；D、細胞內翻譯過程中搬運氨基酸的是tRNA，不是蛋白質，D錯誤。故選C。8、A【解析】

物質跨膜運輸方式：比較項目離子和小分子物質大分子和顆粒性物質被動運輸主動運輸胞吞胞吐自由擴散協助擴散運輸方向高濃度→低濃度高濃度→低濃度低濃度→高濃度細胞外→細胞內細胞內→細胞外特點不需要載體、不消耗能量需要載體、不消耗能量需要載體、消耗能量不需要載體、消耗能量不需要載體、消耗能量影響因素濃度差濃度差、載體種類和數量能量、載體種類和數量能量、溫度能量、溫度【詳解】物質通過自由擴散進出細胞時，不需要載體蛋白協助，不需要消耗能量，運輸速率與膜內外濃度差成正比，且不具有載體飽和效應，A正確。故選A。【點睛】本題考查物質出入細胞方式的相關知識，旨在考查考生的理解能力二、非選擇題9、尿素、銨鹽、硝酸鹽、氮氣將已知體積的水用濾膜過濾后，將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養顯微鏡直接計數這些物質是不溶于水的多孔性材料無菌蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶不能除污布類型外，洗衣粉類型這一變量也會影響去污力（不同類型洗衣粉影響堿性纖維素酶的去污力）【解析】

統計菌落數目的方法：顯微鏡直接計數法，間接計數法（活菌計數法）；分析題圖：若不考慮是否加酶，圖中自變量有三種，即洗衣粉的種類、污布的種類及酶用量。【詳解】（1）微生物的培養需要氮源，從微生物所能利用的氮源種類來看，一部分微生物是不需要利用氨基酸作為氮源的，它們能把等尿素、銨鹽、硝酸鹽、氮氣等簡單氮源用于合成所需要的一切氨基酸；

（2）“濾膜法”的操作思路是：將已知體積的水用濾膜過濾后，將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養；稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數法是測定微生物數量常用的兩種方法；

（3）在固定化細胞實驗中，明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉等物質能作為包埋細胞載體的原因是這些物質是不溶于水的多孔性材料，便于細胞的包埋；在工業生產中，細胞的固定化是在嚴格無菌條件下進行的；

（4）加酶洗衣粉中目前常用的四類酶制劑，除纖維素酶外，還有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶；據圖分析可知，圖中自變量有三種，即洗衣粉的種類、污布的種類及酶用量，故由實驗結果不能得出堿性纖維素酶對污布類型2的去污力最強，其原因是除污布類型外，洗衣粉類型這一變量也會影響去污力。【點睛】本題考查微生物培養基的成分、微生物數量的測定方法和酶活性的測定，要求考生識記統計菌落數目常用的兩種方法，明確酶活性測定的方法，再結合所學的知識準確作答。10、95%的乙醇脫色果膠酶和果膠甲酯酶半乳糖醛酸一定量蔗糖對樣品稀釋，加入2，4-二硝基苯肼，然后用光電比色法測出光密度值，再利用預先制作的標準曲線算出樣品中的維生素含量細口瓶保存、酒裝滿、瓶口密封物質的良性循環利用率套種充分利用土地和資源社會需求內部物質良性循環生態生態恢復【解析】

1、果膠酶的作用：能夠分解果膠，瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，也使果汁變得澄清。

2、農業生態工程是應用農業生態系統中物種共生與物質再生產的原理，多種成份相互協調和促進的功能原理，以及物質和能量多層次、多途徑利用和轉化的原理，采用系統工程的最優化方法而設計的分層次多級別物質的農業生態系統。3、農業生態工程的主要技術：①物質的良性循環技術；②潔凈可再生的新能源開發技術：太陽能、沼氣、風能、潮汐能、水電能；③種植業和畜牧業合理優化技術。【詳解】（一）（1）利用獼猴桃直接制成的獼猴桃汁較為渾濁，加入95%的乙醇之后，會出現絮狀物，說明含有較多的果膠。獼猴桃酒中的光合色素含量較高，為獲得無色澄清的果汁，需要首先進行脫色處理，然后再加入果膠酶和果膠甲酯酶，將果膠分解為可溶性的半乳糖醛酸，使果汁澄清，同時提高出汁率。（2）制作出的獼猴桃汁，加入活化的酵母懸液，再加入一定量蔗糖，加少量蔗糖的目的是使酵母菌迅速發生作用，并提高果酒的酒精度或甜度（含糖量）。由于維生素C與2，4-二硝基苯肼作用可形成紅色產物，因此若要測定發酵產生的獼猴桃酒中維C的含量，可對樣品稀釋，加入2，4-二硝基苯肼，然后用光電比色法測出光密度值，再利用預先制作的標準曲線算出樣品中的維生素含量。（3）醋桿菌為需氧型，在缺氧的環境下不能生存，家庭制作的獼猴桃酒存放的過程中容易被醋桿菌污染，為防止變酸，可用細口瓶保存或將酒裝滿或將瓶口密封，保證容器內為無氧環境，即可防止醋桿菌污染。（二）（1）對城市生活垃圾進行減量化、無害化和資源化處理，將生活垃圾中的有機部分、人畜糞便等轉化成優質生態復合肥，是物質的良性循環（物質循環利用）?技術在城市生態系統中應用的具體體現。該技術能實現物質和能量的多級利用，提高能量的利用率。（2）針對我國北方地區，一年只種一茬小麥，熱量有余，如果種兩茬，則積溫不足的問題，可以采用套種技術，提高農作物對陽光等環境資源的利用率。所以除了解決上述問題，該技術還有充分利用土地和資源的優點。（3）在農村地區，要根據當地的土地資源、水資源等實際情況，合理優化種植業和畜牧業的產業結構。優化過程中需要針對當地的糧油肉蛋奶等的社會需求，以農業生態系統內部物質良性循環為基礎，盡量減少外部的化肥和農藥，以求最大的經濟效益和生態效應。（4）生態恢復工程指通過研究生態系統退化的原因，利用生態學、系統學、工程學的方法實現退化生態系統恢復與重建，以使一個生態系統恢復到較接近其受干擾前的狀態的工程。所以在礦山廢棄地，應該根據當地生態條件，積極發展草業、木業或林業的生態恢復工程，使其盡快恢復到受干擾前的狀態。【點睛】本題考查果酒、果醋的制作和生態工程的相關知識，意在考查考生對所學知識的綜合運用能力。11、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質粒、空質粒（pET質粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農作物和自然環境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結果：經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質粒，它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復制能力的雙鏈環狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質的結構基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法和化學合成法。3、PCR技術擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因（1）啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質。（2）終止子：也是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因導入受體細胞1、轉化的概念：是目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程。2、常用的轉化方法：將目的基因導入植物細胞：采用最多的方法是農桿菌轉化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因導入動物細胞：最常用的方法是顯微注射技術．此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因導入微生物細胞：原核生物作為受體細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質相對較少，最常用的原核細胞是大腸桿菌，其轉化方法是：先用Ca2+處理細胞，使其成為感受態細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態細胞混合，在一定的溫度下促進感受態細胞吸收DNA分子，完成轉化過程。3、重組細胞導入受體細胞后，篩選含有基因表達載體受體細胞的依據是標記基因是否表達。第四步：目的基因的檢測和表達1、首先要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術。2、其次還要檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，方法是采用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是從轉基因生物中提取蛋白質，用相應的抗體進行抗原——抗體雜交。4、有時還需進行個體生物學水平的鑒定，如轉基因抗蟲植物是否出現抗蟲性狀。【詳解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質粒，得到重組質粒；大腸桿菌作為受體細胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質粒的導入。（2）①根據題意和圖示分析，經過4次PCR技術后獲得了新的基因，這是一種定點的基因突變技術。②與研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），因此4次PCR應該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××