1/1保膽取石術后成石多因素研究保膽取石術后成石多因素研究可行性研究報告一、立項的背景和意義由于飲食結構、生活習性的改變和B超等醫療檢查設備的普及，我國膽囊結石的發病率逐年上升，達到8％~10%。

膽囊結石的治療至今已有120余年，盡管方法繁多，但其主要治療方法仍為手術切除。

近年來存在著保留膽囊與切除膽囊之爭。

保膽與切膽爭論的焦點之一是保膽術后膽囊結石的復發問題。

自1882年德國醫生Langenbuch發明了膽囊切除術以來，此術式已普遍認為是治療膽囊結石的金標準。

但也有些學者提出，膽囊作為人體的一個器官，發揮著無可替代的生理作用，不應該輕易切除，且膽囊切除仍有一定的并發癥，如創傷小、恢復快的腹腔鏡膽囊切除術(1aparoscopiccholecystectomy，LC)，術中并發癥發生率為1.5％~8.6％，其中膽管損傷率為0.2%~0.7%，一旦發生往往是災難性的；據2011年10月在上海舉行的第三屆全國內鏡微創保膽學術大會報道，LC術后腹瀉發生率12.19%，返流性胃炎發生率5.72%，返流性食道炎發生率3.84%，膽囊切除術綜合癥發生率11.5%，肝外膽管結石發生率5.67%。

因而，在一定的條件下可保膽取石，以達到去除病灶、保護膽囊的目的。

在當時無內鏡技術的落后條件下，Langenbuch認為膽囊造瘺取石術治療膽囊結石術后易復發(90％)；當時提出了膽囊切除不是因為膽囊內含有結石，而是因為膽囊能生長結石的溫床論，故只能行膽囊切除。

隨著內鏡微創保膽取石術的開展，目前有些學者認為其術后結石復發率并不高。

老式保膽術后復發率實際大部分為術中結石殘留所致，應為殘留率。

張寶善[1]報道的1520例內鏡微創保膽取石術術后5年結石復發率為2％~6％，10年后復發率為2％~7％。

在第三屆全國內鏡微創保膽學術大會上張寶善統計內鏡微創保膽取石術3699例，保膽取石的結石復發率為9.76%。

第l3屆全國膽道外科學術大會的閉幕式上，黃志強院士指出：

內鏡保膽取石理念是2l世紀的大事，是中國外科的一件大事!應用內鏡（膽道鏡）保膽取石可以全面觀察膽囊腔，做到完全、徹底地取出結石。

但術后結石復發率報告差異很大，從2％～43.21％不等，顯然單用結石殘留無法解釋。

結石復發率是否還與其它成石因素如瘦素（leptin）、血脂和血清膽囊收縮素（CCK）等有關？多數學者認為，膽囊結石的發生與眾多因素有關。

經過幾十年的探索，人們對膽囊結石形成機制的認識不斷深入。

膽固醇代謝異常、膽囊功能異常、成核異常及致石基因等因素在膽石形成中都起到了重要的作用。

leptin、血脂水平和CCK等的研究，分別從成石成分，膽囊動力及內分泌層面來闡述了結石形成的原因。

有文獻報道，leptin可增加膽道膽固醇分泌，改變膽汁成分及膽汁膽固醇飽和狀態，影響膽囊動力與膽囊膽固醇結石形成有關。

血清甘油三酯（TG）及血清總膽固醇（TCH）水平的增高可能與膽囊結石形成有關，高脂血癥可能是該病的易患因素。

血清高密度脂蛋白（HDL）低水平可能是膽道膽固醇分泌增高進而促進膽囊膽固醇結石形成的重要信號。

血清CCK水平低下或CCK受體缺乏、CCK抵抗導致膽囊動力降低，使膽汁淤積，與膽囊結石形成密切相關。

保膽取石病人取除結石以后，膽囊仍保留，術后有一定的結石復發率，是否由于上述等的成石因素未發生改變？但大部分病人術后結石不再復發，又是為什么？對于保膽取石術后，在成石成因、膽囊動力及內分泌方面發生什么變化；這些變化又與膽囊切除患者存在怎樣的差異，目前研究甚少。

因而，保膽取石術后的主要成石因素如leptin、血脂和血清CCK等的變化，是值得深入研究的問題。

本研究采用酶聯免疫法等測定保膽取石組、膽囊切除組手術前后血清leptin、CCK、血脂水平，并以正常人群作對照，旨在探索保膽取石與膽囊切除患者手術前后三者的變化，并闡述其與保膽取石后結石復發的關系，對臨床保膽取石患者如何減少及預防膽石的復發提出相應的建議；同時探討對于滿足保膽條件的患者，是否保膽比切膽更加有利。

二、國內外研究現狀和發展趨勢1、對膽囊結石患者保膽取石的研究和發展趨勢膽囊造瘺取石術是一古老的保膽取石手術方法，結石復發率極高。

Kellett等報道[2]36年間23種雜志發表的2053例膽囊造瘺取石術后1～19年的隨訪結果，結石復發率0%~83%，總復發率34.6%。

Donald等報道經皮膽囊取石術后6～48個月的結果，其結石復發率為7%~44%，總復發率31%。

因結石復發率過高，該術式在臨床上已極少應用。

1988年Kellett等首先報道經皮膽鏡碎石清除術(PCCL)，并作為新技術推廣；但由于該技術操作復雜，90年代初國內進行了技術上的改良，直接將膽囊底部固定于右上腹小切口處，應用硬質腔鏡直視下清除結石，操作方便，能檢查膽囊任何部位，操作通道寬，可進入多種取石碎石工具，結石完全清除率高；該項技術當時在國內得到了部分推廣。

該院271例PCCL近期隨訪結果顯示，術后9～24個月(平均19個月)結石總復發率為9.96%；120例3～36個月(平均23個月)的隨訪結果示結石復發率為13.3%[3]。

鄒一平等439例中遠期隨訪結果發現[4]，結石總復發率為41.16%，術后1～1O年每年結石累積復發率分別為9.57%，18.91%，27.33%，34.14%，37.59%，39.86%，41.9O%，42.73%，42．85%和43．21%，結石復發率從術后第1年至第5年逐年明顯增加，隨后每年復發率緩慢增加。

近年來，積極提倡應用纖維膽道鏡聯合腹腔鏡技術進行保膽取石術的內鏡微創保膽取石術，但結石復發率差異較大。

張寶善等報道1520例內鏡微創保膽取石術術后5年結石復發率為2~6%，10年后復發率為2~7%。

榮萬水報道158例微創膽囊切開取石術后1、3、5年結石復發率分別為1．9%、12.26%和17.91%；而徐立友等報道475例內鏡取石保膽術后1～5年隨訪，只有5例結石復發。

因此．人們對于保膽取石術結石復發問題有了新的認識。

有作者認為[5]保膽術后結石復發率高的主要原因是結石殘留，而應用硬質腔鏡或纖維膽道鏡可以全面觀察膽囊腔，做到完全、徹底地取凈結石。

結石殘留是保膽取石術后結石復發的原因之一。

而上述所有文獻所報道的術后結石復發率的差異太大，原因何在？單純用結石殘留無法解釋。

康健等[6]認為膽囊功能、膽囊壁厚度是影響結石復發的重要因素，是否還與膽囊底切口的處理方法不同、適應證選擇不一等因素有關，有待探討。

2、膽囊結石與血leptin、CCK、血脂的關系膽囊結石主要以膽固醇結石為主，其形成與眾多因素有關，膽囊結石患者，尤其女性患者，血清總膽固醇及血清甘油三酯顯著高于正常人群，而血清高密度脂蛋白（HDL）則低于正常人群[7]。

血清膽固醇升高導致肝臟攝取膽固醇增加而增加膽道膽固醇的分泌，使膽囊內膽汁處于高膽固醇狀態，為膽囊結石形成提供重要條件。

有研究表明，膽固醇結石患者中存在肝細胞微粒體TG轉運蛋白活性增加及肝臟TG含量明顯增高的情況[8]，提示高脂血癥與膽固醇結石形成有關，為膽石癥易患因素。

高密度脂蛋白是膽固醇逆向轉運的重要載體。

肝臟通過受體介導作用攝取HDL中包含的膽固醇/膽固醇酯。

清道夫受體B族I型（SR-BI）是一種肝臟選擇性攝取HDL的受體。

小鼠肝臟細胞SR-BI的過度表達導致血漿HDL減少的同時，膽汁膽固醇增加。

動物實驗研究發現，膽道膽固醇高分泌與低血漿HDL水平及肝臟HDL受體SR-BI的顯著誘導有關。

對膽固醇結石患者的研究也證實了此機制[9]。

CCK是一種具有多種生理功能的腦腸肽，是促進膽囊收縮的主要生理激素之一，其主要通過直接與膽囊平滑肌上的受體結合而誘導膽囊排空，促進膽囊收縮。

CCK、CCK受體通過影響膽囊動力促進結石形成[10]。

（1）膽囊結石患者的CCK水平明顯低于正常人群，且不受性別影響。

CCK水平的低下導致膽囊動力下降，高濃度的膽固醇膽汁在膽囊內淤積，刺激粘蛋白分泌，導致膽固醇結晶形成，凝聚成核。

沉積物可進一步抑制膽囊收縮，膽汁淤積進一步加重，如此惡性循環，導致結石進一步形成，增大，增多。

（2）但也有研究發現，膽囊結石患者血清CCK水平明顯高于正常人群,這是由于炎癥或結石引起膽囊CCK受體數目減少及對CCK敏感性下降，CCK抵抗，而導致血清CCK反饋性增多。

上述兩種情況，CCK無論升高還是降低，其與正常人群都存在顯著性差異，且差異具有統計學意義。

都說明CCK的變化影響膽囊動力，促進結石形成。

leptin是由肥胖基因（Ob基因）編碼，主要由白色脂肪細胞分泌的一種調節機體能量平衡的激素，是由167個氨基酸組成的分泌型蛋白。

其研究起源于1994年，Zhang等[11]應用定位克隆技術首次成功克隆出小鼠的肥胖基因及人類同源序列。

人類的leptin基因位于染色體7q31.3，全長約20kb，是一條由2個內含子、3個外顯子編碼的DNA序列，編碼區DNA大于15000個堿基對。

leptin影響膽囊結石的形成是多方面的。

（1）leptin參與脂質代謝的調控，影響膽汁的成分。

leptin通過清除脂肪組織中過量膽固醇，增加血膽固醇排泄，導致膽汁膽固醇過飽和，促進結石形成。

近年來國外動物實驗研究發現注射leptin可以使小鼠膽道膽固醇分泌增多。

VanpPatten發現對鼠急性leptin投予后，leptin可通過調節多種酶的活性，降低血漿VLDL膽固醇濃度，減少膽固醇生物合成，增加膽鹽分解代謝，增加膽汁膽固醇分泌。

另外高濃度的leptin還可使膽汁中親水性膽汁酸鹽比例增加，疏水性膽汁酸鹽減少，多種因素協同作用，膽固醇過飽和性膽汁導致膽固醇結石形成。

（2）leptin對膽囊動力學的影響。

leptin可通過縮短膽囊肌細胞長度和降低對膽囊收縮素（CCK）反應性等作用來影響膽囊動力。

膽汁中的leptin與膽囊壁瘦素受體結合，能發揮濃度依賴性促進膽囊壁毛細血管中血小板凝集作用，使毛細血管中血栓形成，從而引起膽囊壁血管發生病變，形成膽囊壁炎癥，同時導致膽囊運動功能受損。

在膽囊壁細胞炎性損害過程中膽囊中的leptin又參與囊壁修復過程，作用于成纖維細胞，促使細胞增殖，纖維化，局部細小瘢痕形成，降低膽囊運動功能。

而本身炎癥反應和免疫反應與膽固醇結石形成密切相關[12]。

總之，高leptin血癥是膽囊膽固醇結石發生的一個重要內分泌因素[13]。

縱上所述，leptin、血脂水平和CCK等與膽囊結石的形成相關[14]。

但膽囊結石患者，在取出結石保留膽囊的情況下，由于去除了結石病灶、減輕了膽囊的炎癥，改善了膽囊功能，上述指標是否發生了變化、發生了怎樣的變化，尚未見文獻報道。

3、膽囊結石成因研究3500年前的古埃及木乃伊和1600年前的楊州女尸體內，已發現膽囊結石。

至今膽囊結石依然是世界范圍內的一種常見病、多發病。

雖然經過大量臨床和基礎研究，但膽囊結石的確切成因目前尚不清楚。

研究表明，膽石形成是多方面綜合作用的結果，與膽囊功能異常、代謝因素、成核過程異常、致石基因、遺傳性及其它致石因素（細菌、腸道、禁食、其它相關疾病）等有關。

金恩蕓等也認為血清CCK、三酰甘油、膽固醇、高密度脂蛋白、Apo-B和瘦素水平變化可能與膽囊結石的形成有關。

對于保膽取石術后結石的復發成因，目前認為，可能與手術中的結石殘留[1,5,15]、膽囊功能、膽囊壁厚度等有關[6]，與手術前膽結石成因有很大的相似性。

而保膽取石術后對膽囊功能和成石機制上缺少前瞻性的對比研究，這是保膽取石術后結石復發的關鍵點，也是臨床上如何有效地預防和治療保膽取石術后結石復發的基礎。

參考文獻[1]張寶善,劉京山.內鏡微創保膽取石1520例臨床分析.中華普外科手術學雜志（電子版）,2009,3(1):39-41[2]KellettMJ,WickhamJEA,RusselRCG.Percutaneouscholecystolithotomy.BrMedJ,1988,296:453-455[3]楊五計,胡安國,李志偉,等.經皮膽鏡碎石清除術的術式及適應癥.中華普通外科雜志,2001,16:328-330[4]ZouYP,DuJD,LiWM,eta1.Gallstonerecurrenceaftersuccessfulpercutaneouscholecystolithotomy:a10-yearfollow-upof439cases.HBPDInt,2007,6:l99-203[5]褚延魁,魯建國,高德明.微創保膽手術應思考的幾個問題.中國普通外科雜志,2010,19:184-186[6]康健健,張波,王世等.微創內鏡保膽取石術后結石復發率及影響因素分析.中國醫藥,2011,6（3）:322-324[7]Grigor’evaIN,MaliutinaSK,VoevodaMI.Roleofhyperlipidemiaincholelithiasis.EkspKlinGastroenterol.2010,(4):64-8[8]CastroJ,AmigoL,MiquelJF,etal.Increasedactivityofhepaticmicrosomaltriglyceridetransferproteinandbileacidsynthesisingallstonedisease.Hepatology,2007,45:1261-1266[9]JiangZY,PariniP,EggertsenG,etal.IncreasedexpressionofLXRalpha,ABCG5,ABCG8andSRBIintheliverfromnormolipidemicnonobeseChinesegallstonepatient,JLipidRes,2008,49:464-472[10]WangHH,PortincasaP,LiuM,TsoP,etal.EffectofgallbladderhypomotilityoncholesterolcrystallizationandgrowthinCCK-deficientmice.BiochimBiophysActa.2010Feb,1801(2):138-46[11]ZhangY,proencaR,MaffeiM,etal.Positionalcloningofthemouseobesegeneanditshumanhomologue[J].Nature,1994,5（372）:425-432[12]MaurerKJ,CareyMC,FoxJG.Rolesofinfection,inflammation,andtheimmunesystemincholesterolgallstoneformation.Gastroenterology.2009Feb;136(2):425-40[13]WangSN,YehYT,YuML,etal.Hyperleptinaemiaandhypoadiponectinaemiaareassociatedwithgallstonedisease.EurJClinInvest.2006Mar,36(3):176-80[14]LeiZM,YeMX,FuWG,etal.Levelsofserumleptin,cholecystokinin,plasmalipidandlipoproteindifferbetweenpatientswithgallstoneor/andthosewithhepatolithiasis.HepatobiliaryPancreatDisInt.2008Feb,7(1):65-9[15]燕濤,吳浩榮,谷春偉.保膽取石術后結石復發危險因素病例對照研究.安徽醫藥,2011,15(5):583-584三、項目研究開發內容和技術關鍵及主要創新點(一)研究開發內容1、本項目根據納入標準和排除標準選擇膽囊結石患者120例，以入院順序的奇、偶數分為保膽取石組（保膽組）與膽囊切除組（切膽組），每組各60例，30例健康人群作對照。

2、于入院次日清晨7時、術后第3天、1月、3月和6月空腹平臥靜脈抽血采集標本，用AbbottAEROSET全自動生化分析儀檢測血脂水平，用酶聯免疫法檢測血清leptin，CCK。

3、通過監測保膽取石患者術后早期及近期血清leptin、CCK、血脂水平，并與術前比較，從上述3方面成石因素來預期保膽后結石復發的可能性，試圖在成石水平上尋找結石復發的理論依據；分析比較保膽取石組與膽囊切除組術后上述三項指標的變化情況，在對成石影響、保留膽囊功能及脂質代謝層面，比較兩種術式優劣性。

(二)技術關鍵1．病例的選擇：

在嚴格符合納入標準和排除標準的前提下，采取隨機、對照的科研方法，并充分告知。

要求患者有高度的依從性，在指定時間和指定要求下空腹采血。

2．準確檢測指標：

強調標本采集前各個環節的質量管理，標本采集后于-70℃冰箱內保存，用AbbottAEROSET全自動生化分析儀檢測血脂指標。

血清leptin、CCK的檢測應用ELISA（酶聯免疫吸附測定法）技術，以保證試驗結果的特異性與穩定性。

3、手術的正確實施：

保膽組采用內鏡微創保膽取石術，術中用取石網徹底取凈結石，確保膽囊開口通暢，必要時行術中B超或術中膽道造影，膽囊切口用可吸收縫線縫合。

膽囊切除術采用腹腔鏡下膽囊切除術。

(三)主要創新點1、本項目率先對保膽取石與膽囊切除患者術后的相關成石因素和膽囊功能進行了比較研究。

2、探討術后血leptin、CCK、血脂等實驗室指標與保膽取石術后結石復發的相關性。

四、項目預期目標（主要技術經濟指標、應用或產業化前景）通過保膽取石患者手術前后血清leptin、CCK、血脂指標變化的檢測，預期保膽后結石復發的危險因素，為保膽手術在臨床的開展提供理論依據；并根據術后三者的變化，指導臨床預防、減少術后結石復發。

通過分析比較保膽取石組與膽囊切除組術后上述三項指標的變化，在對成石因素的影響、保留膽囊功能及脂質代謝層面，比較兩種術式優劣性。

通過監測膽囊切除術前后血清leptin、CCK、血脂指標變化，明確膽囊切除術對上述指標的影響。

本項目完成后，預期在國家核心期刊以上雜志發表論文2篇。

五、項目實施方案、技術路線、組織方式與課題分解（一）實施方案1、病例選擇選擇膽囊結石患者120例。

納入標準：

：

①膽囊壁厚3mm；②膽囊形態、功能良好；③膽囊管無結石梗阻；④膽囊結石少；⑤近期無急性發作；⑥保膽組病人有明確的保膽要求，并且完全理解結石復發的可能性。

排除標準：

①膽囊壁厚＞3mm；②膽囊功能不良或膽囊萎縮；③膽囊管梗阻；④膽囊充滿型結石；⑤急性膽囊炎或伴發急性胰腺炎；⑥對保膽要求不高者；⑦瓷化膽囊或可疑膽囊惡性腫瘤。

健康對照組：

體檢中心體檢的人群，并知情同意。

2、分組與治療根據上述標準選擇膽囊結石患者120例，以入院順序的奇、偶數分為保膽組與切膽組，每組各60例，30例健康人群作對照。

保膽組采用內鏡微創保膽取石術：

要點是在膽囊底部切開膽囊，吸凈膽汁后放人纖維膽道鏡仔細觀察。

確認結石后，用取石網將結石取出，務必完全、徹底取凈結石。

仔細觀察膽囊開口處有膽汁流人，必要時行術中B超檢查膽囊結石是否取凈。

用可吸收縫線將膽囊切口全層連續縫合一層，漿肌層包埋一層。

膽囊切除術采用腹腔鏡下膽囊切除術：

三孔法或四孔法腹腔鏡下膽囊切除術。

3、觀察指標符合條件的患者于入院次日清晨7時、術后第3天、1月、3月和6月空腹平臥靜脈采血，正常對照組血標本取自體檢中心。

均禁食12小時，取靜脈血4ml，注射入真空采血管，待凝固血清析出后3500rpm離心5min取血清。

一部分儲存于4℃冰箱中備測血脂（TCH,TG,LDL,HDL）濃度；另一部分儲存于80℃低溫冰箱內備測leptin，CCK濃度。

使用AbbottAEROSET全自動生化分析儀進行血脂檢測，總膽固醇測定（CHOD-PAP法）為中華醫學會檢驗學會推薦的總膽固醇測定常規方法；甘油三酯（TG）采用酶法（GPO-PAP法；血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）采用化學修飾酶法法測定；血清低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）采用選擇性可溶化法測定；上述試劑除甘油三酯（TG）是東甌公司產品外其它均為日本協和企業產品。

采用酶聯免疫法檢測血清leptin、CCK，操作方法：

①加樣：

加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時然后洗滌。

(同時做空白孔，標準濃度孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

②加酶標抗體：

于各反應孔中，加入酶標抗體0.1ml。

37℃孵育0.5～1小時，洗滌。

③加底物液顯色：

于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

④終止反應：

于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

⑤結果判定：

在酶標檢測儀上，于450nm處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，根據標準曲線定量。

4、隨訪出院后電話隨訪，半年一次，直至項目結束；不能電話隨訪者采用書信隨訪。

隨訪內容：

臨床癥狀（腹痛、消化不良、腹脹、腹瀉等）；B超檢查（膽囊超聲表現，有無結石復發）；有無其它病變如結腸癌、膽囊癌變等。

5、統計分析使用SPSS10.0統計軟件進行統計學處理。

檢驗指標的結果用均數及標準差表示。

T檢驗分析兩組間的差異，P＜0.05具有統計學意義。

（二）技術路線納入標準排除標準（三）組織方式與課題分解項目以課題組的形式組織實施，課題的管理將在有關部門的領導下實行課題負責人負責制，課題負責人負責課題的組織與實施、技術路線指導及課題的全面工作，把握課題研究方向、進度和質量，指導和協調課題組成員完成所承擔的科研課題。

課題實施過程中及時總結，發現的問題，及時對課題實施做出相應調整，根據納入指標和排除指標選擇膽囊結石患者120例保膽組60例切膽組60例對照組30例于入院次日晨、術后第3天、1月、3月和6月檢測leptin、CCK、血脂等指標，對照組于入院次日晨檢測上述指標一次。

分析：

（1）保膽取石患者手術前后血清leptin、CCK、血脂指標變化，預期保膽后結石復發的可能性，指導臨床如何預防、減少術后結石復發。

（2）監測膽囊切除術前后血清leptin、CCK、血脂指標變化，明確膽囊切除術對上述指標的影響。

（3）分析比較保膽取石組與膽囊切除組術后上述三項指標的變化，在對成石因素的影響、保留膽囊功能及脂質代謝層面，比較兩種術式優劣性。

確保課題順利實施。

本研究課題分為五個部分：

1、病例收集：

收集2012年07月-2015年01月間根據納入指標和排除指標選擇膽囊結石患者120例。

健康對照組30例從體檢中心的體檢人群中產生。

本課題組第二、第三責任人負責本部分工作。

2、手術操作：

將符合選擇標準的膽囊結石患者120例，以入院順序的奇、偶數分為保膽組與切膽組，每組各60例。

保膽組采用內鏡微創保膽取石術，切膽組采用腹腔鏡下膽囊切除術。

本課題組第一、第二、第五責任人負責臨本部分工作。

3、標本收集及檢測：

于入院次日晨、術后第3天、1月、3月和6月空腹平臥靜脈采血，正常對照組血標本取自體檢中心，使用AbbottAEROSET全自動生化分析儀進行血脂檢測，使用酶聯免疫法檢測血清leptin、CCK。

本課題組第四、第六責任人負責臨本部分工作。

4、隨訪：

第七責任人負責隨訪工作。

5、資料總結及統計分析：

對資料進行總結，使用SPSS10.0統計軟件對所有數據進行統計學處理。

本課題組第一、第三責任人負責資料總結及統計工作。

六、計劃進度安排全部研究計劃在3年內完成(2012年06月-2015年06月)。

（1）2012.06-2013.06①篩選病例。

②對符合選擇標準的病例進行手術治療。

③對上述病例進行術前、術后血脂、leptin、CCK檢測。

④術后隨訪。

（2）2013.07-2014.06：

①繼續補充病例數，完成研究對象的手術治療。

②繼續完成相關病例的指標檢測。

③整理相關數據。

④術后隨訪。

（3）2014.07-2015.06：

①繼續補充必要的病例數，完成相關手術及指標的檢測。

②分析資料，統計數據，撰寫論文。

③項目驗收。

七、現有工作基礎和條件（一）工作基礎1、本項目組從2007年5月至今，對符合保膽取石適應癥的膽囊結石患者已成功開展保膽取石96例，取得滿意療效，并在中華消化內鏡雜志上發表題為《個體化觀念在保膽取石手術中的應用》的論文。

于2010開展了市科技項目《腹腔鏡聯合膽道鏡在腹腔內、外個體化保膽取石術中臨床應用》，已結題。

2、肝膽外科是省市共建扶植重點學科，參與本項目的醫生已熟練掌握了膽囊切除及微創保膽技術。

申請單位檢驗中心擁有各類先進檢測設備，生化室擁有多種生化分析儀，