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文檔簡介
植物組織逆境傷害程度的測定
——電導法主講:董新純
副教授實驗原理植物細胞膜對維持細胞的微環境和正常的代謝起著重要的作用。在正常情況下,細胞膜對物質具有選擇透性能力。當植物受到逆境脅迫時,細胞膜遭到破壞,膜透性增大,從而使細胞內的電解質外滲,以致植物組織浸入無離子水中,水的電導將因電解質的外滲而加大。膜透性增大的程度與逆境脅迫強度有關,也與植物抗逆性的強弱有關。電導儀測定外液的電導度增加值,求得傷害程度。實驗材料:大葉黃楊葉片方法步驟:1.材料處理:對照:常溫低溫:-20℃冷凍20~30min注:洗刷試管,去離子水中含有吐溫202.取材正常、凍害各取6個葉片,洗凈各打取葉圓片36個以上,放到小燒杯中用去離子水沖洗;每支試管12個葉圓片;加入15ml蒸餾水;放入塑料沙網(距液面1-2cm),用去離子水漂洗放置到塑料燒杯中(不蓋塞子),統一抽氣10~15min。(設置空白1只試管)3.抽氣后取出紗網,室溫搖動20min
(時間可以更長)4.電導儀測定初電導值S15.沸水浴10min(殺死植物組織),自來水冷卻,用力搖1-2min后即可測定終電導S2方法步驟:取材各取6個葉片,洗凈打葉圓片分裝在3支試管中,各加12片、蒸餾水15mL抽氣15min平衡20min測量初電導S1煮沸15min冷卻、平衡10min測量終電導S2結果計算:相對電導度(L)=(S1-空白)/(S2-空白)
凍害的傷害度(%)=Lt-凍害處理的相對電導度Lck-室溫對照的相對電導度實驗材料空白電導值處理初電導值(μS)終電導值(μS)相對電導度(L)傷害度(%)重復平均重復平均室溫--20℃植物組織逆境傷害程度的測定記載表問題與注意事項:1.蒸餾水中加吐溫,洗儀器時出現泡沫。
吐溫作用:陰離子表面活性劑,促進水分與葉片表面接觸。吐溫20-聚氧乙烯(20)山梨醇酐單月桂酸酯
2.抽氣作用?3.紗網作用?4.溫度對電導度的影響較大,S1、S2須在相同的溫度下測定。5.防止高CO2氣源和口中呼出的CO2進入試管
抽出細胞間隙的氣體,使水分更容易、更充分地滲入到細胞間隙中去。防止抽氣時葉圓片被抽出。DDS-307型電導率儀操作規程1、打開電源開關,預熱30分鐘。2、儀器校準:將“選擇”旋鈕指向“檢查”檔,調節常數補償旋鈕到“1”刻度線,調節溫度補償旋鈕到“25”刻度線,然后調節“校準”旋鈕,使儀器顯示100.0μS/cm,校正完畢。按照電極上標明的電極常數,調節常數補償旋鈕,使儀器顯示值與電極所標常數一致。DDS-307型電導率儀操作規程3、樣品測定:將“選擇”旋鈕置于適合的量程位置。當測定過程中顯示值熄滅時,說明測量值超出量程范圍,此時應將選擇旋鈕置于高一擋量程。
測定時電極完全浸沒到溶液中。(如果試
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