農業(yè)部2122號公告-5-2014 轉基因植物及其產品成分檢測 品質改良大豆MON87769及其衍生品種定性PCR方法_第1頁
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農業(yè)部2122號公告一5—2014轉基因植物及其產品成分檢測品質改良大豆MON87769及其衍生品種定性PCR方法I農業(yè)部2122號公告一5—20141農業(yè)部2122號公告—5—2014品質改良大豆MON87769及其衍生品種定性PCR方法本標準規(guī)定了轉基因品質改良大豆MON87769轉化體特異性定性PCR檢測方法。本標準適用于轉基因品質改良大豆MON87769及其衍生品種，以及制品中MON87769轉化體成分的定性PCR檢測。GB/T6682分析實驗室用水農業(yè)部1485號公告—4—2010轉基因植物及其產品成分檢測DNA提取和純化農業(yè)部2031號公告—8—-2013轉基因植物及其產品成分檢測大豆內標準基因定性PCR方法農業(yè)部2031號公告—19—2013轉基因植物及其產品成分檢測抽樣NY/T672轉基因植物及其產品檢測通用要求Lectin基因Lectingene2lec-1672F:5'-GGGTGAGGATAGlec-1881R:5'-GCGATCGAGTAGTMON87769-F:5'-CCGGACATGAAGCCAMON87769-R:5'-TCCTTGGAGGTCGT37.5.1.2.1每個試樣PCR反應設置3次平行。終濃度水10×PCR緩沖液dNTPs混合溶液(各2.5mmol/L)總體積“—”表示體積不確定。如果PCR緩沖液中含有氯化鎂，則不加氯化鎂溶液。根據TaqDNA聚合酶的濃度確定其體積，并相應調整水的體積，使反應體系總體積達到7.5.2對照PCR反應4農業(yè)部2122號公告一5—2014增片段是否為目的DNA片段，按照7.8和7.9的規(guī)定執(zhí)行。將回收的PCR產物克隆測序，與轉基因品質改良大豆MON87769轉化體特異性序列(參見附錄A)進行比對，確定PCR擴增的DNA片段是否為目的DNA片段。8.2.1大豆內標準基因和MON87769轉化體特異性序列均得到擴增，且擴增片段大小與預期片段大小一致，表明樣品中檢測出MON87769轉化體成分，表述為“樣品中檢測出轉基因品質改良大豆農業(yè)部2122號公告—5—20141CCGGACATGAAGCCAT51CAACTTGCTAATTTTGGAAAAGA201TTTGATTGTTTGAAGAA

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