瘧原蟲PlasmodiumDepartmentofHumanParasitology,SchoolofMedicine,ShandongUniversityZhouHuai-yu瘧原蟲專題知識講座專家講座第1頁[教學綱領]熟悉孢子蟲綱基本特征。掌握瘧原蟲形態、生活史、致病、診療、防治標準及首選藥品。熟悉惡性瘧原蟲環狀體、配子體形態；惡性瘧原蟲、三日瘧原蟲、卵形瘧原蟲與間日瘧原蟲生活史主要區分點瘧原蟲免疫學及流行特點。[重點難點]重點：瘧原蟲致病和試驗診療及防治標準難點：瘧原蟲生活史與致病機制瘧原蟲專題知識講座專家講座第2頁瘧原蟲（MalariaParasite）是瘧疾（Malaria）病原體。瘧疾是一個古老傳染病。俗稱“冷熱病”、“打擺子”、“發瘧子”、“脾寒”、“瘴氣”等。瘧疾經典臨床表現：周期性、規律性寒戰、發燒和出汗。瘧疾（Malaria）是世界六大熱帶病和我國五大寄生蟲病之一，對人類危害極大，非洲每年死于瘧疾兒童約100萬。malaria主要分布在熱帶、亞熱帶各國。在我國華南、華中一些地域，尤其是云南和海南省還有不少病例。malaria仍是我國重點防治寄生蟲病之一。[教學內容]瘧原蟲專題知識講座專家講座第3頁寄生人體四種瘧原蟲間日瘧原蟲[Plasmodiumvivax，P.v]三日瘧原蟲[P．Malariae,P.m]惡性瘧原蟲[P．Falciparum,P.f]卵形瘧原蟲[P．Ovale,P.o]我國主要是間日瘧原蟲和惡性瘧原蟲；另二種少見，近年偶見國外輸入病例。GeographicDistribution瘧原蟲專題知識講座專家講座第4頁一、形態在RBC內發覺瘧原蟲是確診瘧疾和判別蟲種主要依據瘧原蟲基本結構相同-細胞膜、質、核瑞氏Wright或姬氏Giemsa染色：核染成紫紅色，胞質呈蘭色，瘧原蟲消化血紅蛋白產物-瘧色素呈棕黃色瘧原蟲在RBC內各期形態各不相同間日瘧原蟲在RBC內形態三期六種形態滋養體期：大、小滋養體裂殖體期：成熟、未成熟裂殖體配子體期：雌、雄配子體瘧原蟲專題知識講座專家講座第5頁1滋養體（trophozoite）期Fig.1:normalredcell;Figs.2-6:ringstageparasites(youngtrophozoites)

1.1早期滋養體--環狀體蟲體胞質較少呈環狀，中間為大空泡細胞核位于蟲體一側，頗似戒指紅寶石。早期滋養體又稱為環狀體（ring

form）瘧原蟲專題知識講座專家講座第6頁1.2晚期滋養體-大滋養體經8～10小時，蟲體增大，伸出偽足，胞質增多，出現瘧色素（malarial

pigment）紅細胞脹大，顏色變淡，并出現能染成淡紅色小點，稱薛氏小點（Schüffner's

dots)。滋養體充滿RBC，RBC變形原蟲胞質大，變形，有一大空泡胞核增大瘧色素增多薛氏小點顯著瘧原蟲專題知識講座專家講座第7頁2裂殖體期Schizonts2.1未成熟裂殖體（immature

schizont）經40小時晚期滋養體發育成熟，蟲體變圓，空泡消失核開始分裂2-12細胞核薛氏小點受染RBC變大、顏色蒼白、形態不規則瘧原蟲專題知識講座專家講座第8頁2.2成熟裂殖體Matureschizonts裂殖子12～24個，平均16個，排列不規則蟲體占滿脹大了紅細胞瘧色素集中成堆從紅細胞釋出裂殖子全過程約需1分鐘。在血液中裂殖子，一部分被吞噬細胞吞噬，一部分侵入健康紅細胞，重復裂體增殖過程。瘧原蟲專題知識講座專家講座第9頁3間日瘧原蟲配子體瘧原蟲經過幾次紅細胞內裂體增殖，部分裂殖子在紅細胞內不再進行裂體增殖，而發育為雌性配子體（female

gametocyte，即macrogametocyte）或雄性配子體（malegametocyte，即microgametocyte），間日瘧原蟲配子體呈圓形或橢圓形，瘧色素均勻分布于蟲體內，核1個。瘧原蟲專題知識講座專家講座第10頁3.1間日瘧原蟲雌配子體蟲體較大，占滿脹大紅細胞胞質致密，色深藍核小致密，深紅色，多位于蟲體一側瘧色素分散3.2間日瘧原蟲雄配子體蟲體較小，胞質淺藍核大疏松，淡紅色，多位于蟲體中央。瘧原蟲專題知識講座專家講座第11頁1惡性瘧原蟲--環狀體環纖細,約為RBC直徑1/5核1個，但2個常見紅細胞常含2個以上原蟲蟲體常位于紅細胞邊緣，呈“鳥飛狀”瘧原蟲專題知識講座專家講座第12頁2惡性瘧原蟲—大滋養體普通不出現在外周血體小堅固，圓形，不活動瘧色素集中一團，黑褐色原蟲此時開始集中在內臟毛細血管瘧原蟲專題知識講座專家講座第13頁3惡性瘧原蟲成熟裂殖體裂殖子8～36個，通常18～24個，排列不規則瘧色素集中成一團蟲體占紅細胞體積2/3至3/4瘧原蟲專題知識講座專家講座第14頁4惡性瘧原蟲雌配子體新月形，兩端較尖核致密，深紅色，常位于中央瘧色素黑褐色，分布于核周圍瘧原蟲專題知識講座專家講座第15頁5惡性瘧原蟲雄配子體臘腸形，兩端鈍圓胞質色藍而略帶紅核疏松，淡紅色，位于中央瘧色素黃棕色，小桿狀，在核周圍較多瘧原蟲專題知識講座專家講座第16頁二、生活史學習關鍵點：1.感染階段：子孢子2.感染路徑與方式：蚊蟲叮咬;輸血或經胎盤。3.致病階段：紅內期瘧原蟲4.寄生部位：肝細胞、紅細胞5.媒介：雌性按蚊(為終宿主）6.診療階段：紅內期原蟲瘧原蟲專題知識講座專家講座第17頁LifeCycle瘧原蟲專題知識講座專家講座第18頁生活史人瘧原蟲生活史，都需要人（中間宿主）和雌性按蚊（終宿主）做宿主，并經歷世代交替。1．在人體內發育肝細胞內為裂體增殖，稱紅細胞外期（紅外期）在紅細胞內發育包含紅細胞內裂體增殖期（紅內期）和配子體形成。2．在蚊體內發育在蚊胃腔內進行有性生殖，即配子生殖在蚊胃壁進行無性生殖，即孢子增殖瘧原蟲專題知識講座專家講座第19頁1紅細胞外期

（exo-erythrocytic，stage）按蚊刺吸人血時，子孢子隨唾液進入人體，約30分鐘隨血流侵入肝細胞。在肝細胞內，子孢子→滋養體→裂體增殖→紅外期裂殖體→裂殖子（約1個）→肝細胞破裂→裂殖子散出→血竇，一部分裂殖子被Mф吞噬，一部分則侵入RBC內發育。當前認為間日瘧原蟲和卵形瘧原蟲子孢子有：速發型和遲發型1-1紅外期—肝細胞內裂殖體瘧原蟲專題知識講座專家講座第20頁1-2紅內期（erythrocytic

stage）由肝細胞釋放出紅細胞外期裂殖子侵入RBC內進行裂體增殖，稱為紅細胞內期（紅內期）。包含滋養體和裂殖體兩個階段基本過程：環狀體→大滋養體→未成熟裂殖體→成熟裂殖體→裂殖子→健康RBC，重復上述過程幾次，部分裂殖子在RBC內不再進行裂體增殖，而發育為配子體紅內期增殖周期：間日瘧和卵形瘧為48h/代；三日瘧72h/代；惡性瘧36-48h/代瘧原蟲專題知識講座專家講座第21頁2.1配子生殖—有性生殖♀按蚊刺吸瘧疾患者血液，瘧原蟲隨血入蚊胃，僅♀♂配子體存活并繼續進行配子生殖，而其它各期瘧原蟲均被消化?！崤渥芋w形成♂配子（malegamete）或稱小配子（microgamete）?！馀渥芋w逸出RBC外，發育為不活動圓形或橢圓形♀配子（femalegamete）或稱大配子瘧原蟲專題知識講座專家講座第22頁2.1雄配子形成（exflagellation）♂配子體幾分鐘內核分裂為4-8塊，胞質亦向外伸出4-8條細絲，核分別進入細絲內，稱出絲現象，即♂配子形成細絲脫離母體，在蚊胃腔中游動，即♂配子（malegamete）或小配子（microgamete）瘧原蟲專題知識講座專家講座第23頁2.1動合子（ookinete）♀♂配子受精，形成圓球形合子（zygote）。合子數小時后變為長形香蕉狀能活動動合子(ookinete)。瘧原蟲專題知識講座專家講座第24頁2-1卵囊（oocyst）動合子穿過蚊胃壁，在胃彈性纖維膜下，蟲體變圓并分泌囊壁形成球形卵囊(oocyst)，卵囊也稱囊合子。

瘧原蟲專題知識講座專家講座第25頁2.2孢子增殖卵囊逐步長大并向蚊胃壁外突出囊內核和胞質重復分裂進行孢子增殖，生成成千上萬子孢子瘧原蟲專題知識講座專家講座第26頁2.2子孢子（sporozoite）形成呈梭形，10～15μm×1μm主動從卵囊壁鉆出或因卵囊破裂后散出，隨血淋巴鉆入蚊體組織只有到蚊唾腺內子孢子才含有傳染性瘧原蟲專題知識講座專家講座第27頁3雌性按蚊--終宿主--蟲媒蚊唾液腺內含有瘧原蟲子孢子當雌蚊刺吸人血時，可隨唾液進入人體雌性按蚊飽餐人血瘧原蟲專題知識講座專家講座第28頁三、致病1經典瘧疾發作周期性：冷、熱、出汗。冷：全身顫動、皮膚雞皮樣、面色蒼白，口唇與指甲發紫等；夏天蓋幾層棉被也不覺暖。（1-2h)熱：面色緋紅、皮膚灼熱；T：39-40℃可伴頭痛、全身酸痛，小兒或嚴重成人可發生驚厥、譫亡或昏迷。(4-6h)出汗：大汗淋漓、體溫急降，乏力。瘧原蟲專題知識講座專家講座第29頁原因發作周期和紅內期裂體增殖周期一致。瘧原蟲代謝產物(外源性熱原質)裂殖子、殘余和變性血約蛋白、紅細胞碎片被吞噬細胞吞食—產生內源性熱原質。非經典發作：混合感染；同種不一樣批感染；機體免疫力下降瘧原蟲專題知識講座專家講座第30頁2．再燃與復發

瘧疾初發作停頓后，在無再感染情況下，因為體內殘余紅內期瘧原蟲，在一定條件下又大量增殖又引發瘧疾發作，稱為再燃（recrudescence）。瘧疾初發后，紅細胞內期瘧原蟲已被毀滅，未經蚊媒傳輸感染，但經過一段時間潛隱期，又出現瘧疾發作，稱為復發（relapse）。惡性瘧原蟲和三日瘧原蟲都不引發復發，只有再燃；而間日瘧和卵形瘧則現有再燃，又有復發。瘧原蟲專題知識講座專家講座第31頁3貧血發作次數越多，病程越長，貧血越嚴重。貧血原因：瘧原蟲對紅細胞直接破壞脾巨噬細胞吞噬紅細胞骨髓造血受抑制免疫病理（正?？汞懣贵w+紅細胞本身抗體）瘧原蟲專題知識講座專家講座第32頁4脾腫大惡性瘧病人（巨脾）脾腫大、硬化：脾切面顏色變深；大可達臍下；重量可達500至1000g慢性患者脾纖維化，包膜增厚而變硬。瘧原蟲專題知識講座專家講座第33頁惡性瘧病人脾臟熱帶巨脾綜合征脾巨大伴肝腫大，貧血及白細胞、血小板降低，抗瘧藥治療后脾可逐步縮小。瘧原蟲專題知識講座專家講座第34頁5兇險型瘧疾腦型瘧、超高熱型、休克型等。發病急，病情兇險，死亡率高。腦型瘧臨床表現：猛烈頭痛、譫妄、急性神經錯亂、高熱、昏睡或昏迷；嘔吐，血壓下降，脈搏細弱等。腦型瘧機制：機械性學說炎癥學說彌漫性血管內凝血學說。瘧原蟲專題知識講座專家講座第35頁惡性瘧病人腦標本切片瘧原蟲專題知識講座專家講座第36頁四、診療1病原檢驗血涂片姬氏或瑞氏染色法：取外周血制成厚、薄血膜，經吉氏或瑞氏液染色后光鏡檢驗malariaparasites.采血時間：惡性瘧：發作時、查環狀體，發作數小時后因晚期滋養體寄生蟲紅細胞滯留下皮下脂肪及內臟微血管中，不易查見。間日瘧和三日瘧：發作后10小時內，太久后原蟲數量要下降。瘧原蟲專題知識講座專家講座第37頁主要診療--外周血涂片檢驗厚血膜涂片：原蟲變形，且紅細胞已溶，判別有困難，但原蟲集中，易發覺薄血膜涂片：原蟲形態結構完整，清楚，可辯認原蟲種類和各發育階段形態特征，適合用于臨床診療，但蟲數較少易漏檢。瘧原蟲專題知識講座專家講座第38頁2免疫診療1.查抗原

可診療現癥病人和帶蟲者。血中有瘧原蟲時才能查出其抗原，一旦治愈，抗原在短期內即行消失。2.查抗體

適合用于屢次寒熱發作又未查明原因者。原蟲血癥后1周可查出抗體，故早期無診療價值。瘧原蟲專題知識講座專家講座第39頁間接熒光抗體試驗（IFA）顯示有熒光裂殖體瘧原蟲專題知識講座專家講座第40頁3查DNA--PCR診療LaneS:molecularbasepairstandard(50-bpladder).

Blackarrowsshowthesizeofstandardbands.Lane1:

P.vivax(size:120bp)Lane2:theredarrowshowstheP.malariae(size:144bp)Lane3:P.falciparum(size:205bp)Lane4:

P.ovale(size:800bp)瘧原蟲專題知識講座專家講座第41頁五、流行流行步驟傳染