苯氧羧酸類除草劑中游離酚限量及檢測方法國家市場監督管理總局國家標準化管理委員會IGB/T41225—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。本文件由中國石油和化學工業聯合會提出。本文件由全國農藥標準化技術委員會(SAC/TC133)歸口。本文件起草單位：沈陽沈化院測試技術有限公司、安徽豐樂農化有限責任公司、佳木斯黑龍農藥有限公司、深圳諾普信農化股份有限公司、山東濰坊潤豐化工股份有限公司、浙江新安化工集團股份有限1GB/T41225—2021苯氧羧酸類除草劑中游離酚限量及檢測方法本文件規定了苯氧羧酸類除草劑中游離酚的限量要求，并描述了其檢測方法。本文件適用于苯氧羧酸類除草劑產品的質量控制，也可作為合格評定以及管理活動等的依據。注：主要的游離酚的名稱和結構式見附錄A。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T8170—2008數值修約規則與極限數值的表示和判定3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。苯氧羧酸類除草劑phenoxycarboxylicacidherbicides由2,4-二氯酚或4-氯鄰甲酚為主要原材料合成而得到的一類除草劑。2,4-滴系列2,4-Dseries以2,4-二氯苯氧羧酸為主體結構的一系列除草劑。2甲4氯系列MCPAseries以2-甲基-4-氯苯氧羧酸為主體結構的一系列除草劑。注：包括2甲4氯(鹽)、2甲4氯異辛酯等原藥及制劑產品。游離酚freephenols苯氧羧酸類除草劑在經過生產和加工工藝后，仍殘留在產品中的游離狀態的酚類物質的總稱。4限量要求苯氧羧酸類除草劑中游離酚限量應符合表1要求。2GB/T41225—2021表1苯氧羧酸類除草劑中游離酚限量技術指標限量值2,4-滴系列2甲4氯系列原藥制劑原藥制劑游離酚質量分數/%≤標示值h的0.2%≤標示值的0.3%”當使用化學顯色法時需注明(化學顯色法，以2,4-二氯酚計)或(化學顯色法，以4-氯鄰甲酚計);當使用高效液相色譜法時需注明(液相色譜法，以2,4-二氯酚計)或(液相色譜法，以4-氯鄰甲酚計)。“如果產品為單劑，標示值為有效成分的質量分數；如果產品為復配制劑，則標示值為其中苯氧羧酸類除草劑成分的質量分數，限量值按GB/T8170—2008規定保留一位小數。5檢測方法警示：使用本文件的人員應有實驗室工作的實踐經驗。本文件并未指出所有的安全問題。使用者有責任采取適當的安全和健康措施。5.1一般規定本文件所用試劑和水在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和蒸餾水。5.2鑒別試驗本鑒別試驗可與游離酚質量分數的測定同時進行。在相同的操作條件下，試樣溶液與標樣溶液有同樣的紅色。5.2.2高效液相色譜法本鑒別試驗可與游離酚質量分數的測定同時進行，當對某一種酚無法得到較好分離時，可通過調整流動相的pH值為2.75后對其進行分離與鑒別，具體操作見附錄B。在相同的色譜操作條件下，試樣溶液中某個色譜峰的保留時間與標樣溶液中某酚的色譜峰的保留時間，其相對差值應在1.5%以內。在相同的色譜與質譜SIM模式操作條件下，試樣溶液在提取通道內出現特征色譜峰，并且其保留時間與標樣溶液中酚的特征色譜峰的保留時間，其相對差值應在1.5%以內，分析方法見附錄C。5.3游離酚的測定5.3.1化學顯色法(仲裁法)將試樣溶于乙醇氨水溶液中，加入4-氨基安替比林和鐵氰化鉀溶液顯色，測定其吸光度。由校正曲線查出相同吸光度下標樣的體積，計算游離酚含量。3GB/T41225—2021貯備液配制(貯備液在暗處可存放3個酚標準溶液的體積(mL)。1)用于2,4-滴系列產品中游離酚的測定。2)用于2甲4氯系列產品中游離酚的測定。4GB/T41225—2021試樣中的游離酚質量分數按式(1)計算： (1)式中：W?試樣中游離酚質量分數，以百分數(%)表示；V——測得試樣吸光度所對應的體積，單位為毫升(mL);m?———2,4-二氯苯酚或4-氯鄰甲酚標樣的質量，單位為克(g);w——2,4-二氯苯酚或4-氯鄰甲酚標樣的質量分數，以百分數(%)表示；V?——配制酚標準溶液的體積，單位為毫升(mL),本文件中V?=100mL;m——試樣的質量，單位為克(g)。5.3.1.6允許差兩次平行測定結果之相對差，應不大于20%,取其算術平均值作為測定結果。5.3.2高效液相色譜法5.3.2.1方法提要試樣用甲醇溶解，以甲醇+乙酸鈉+乙酸水溶液為流動相，以C?8為填料的不銹鋼柱和紫外檢測器，在波長280nm下，對試樣中的游離酚進行高效液相色譜分離和測定，外標法定量。(本方法對每種酚的定量限約為0.5μg/mL)5.3.2.2試劑和溶液5.3.2.2.1甲醇：色譜級。5.3.2.2.2乙酸鈉。5.3.2.2.3冰乙酸。5.3.2.2.4水：新蒸二次蒸餾水或超純水。2,4,6-三氯酚標樣：已知質量分數，w≥96.0%。5.3.2.3.1高效液相色譜儀：具有可變波長紫外檢測器。5.3.2.3.2色譜柱：250mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內裝C?8、5μm填充物(或具等同效果的色譜柱)。5.3.2.3.3過濾器：濾膜孔徑約0.45μm。5.3.2.3.4定量進樣管：25μL。5.3.2.3.5超聲波清洗器。5.3.2.3.6分析天平：精度為0.0001g。5.3.2.4高效液相色譜操作條件5.3.2.4.1流動相：a)流動相A:乙酸鈉水溶液，1.36g乙酸鈉溶解于2L水中，用冰乙酸調節pH值至3.44,混勻，b)流動相B:甲醇。c)檢測過程中對流動相A與流動相B比例進行梯度設定(具體設定內容見表2)。5GB/T41225—2021時間/min流動相A占比/%流動相B占比/%0225.3.2.4.3柱溫：室溫(溫度變化應不大于2℃)。5.3.2.4.6保留時間：鄰甲酚約20.4min、2-氯酚約21.9min、4-氯酚約29.8min、2,6-二氯酚約佳效果。典型的游離酚混合標準品高效液相色譜圖見圖1。圖1游離酚混合標準品的高效液相色譜圖平行做兩份試驗。分別稱取0.05g(精確至0.0001g)2-6GB/T41225—2021甲醇溶解后，加入3mL1mol/L的氫氧化鈉溶液調節pH值至11,加水定容至刻度，搖勻，作為游離酚標樣儲備液。用移液管移取上述儲備液1mL于另一50mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為標樣溶液。5.3.2.5.2試樣溶液的制備稱取含有效成分約0.2g(精確至0.0001g)的試樣置于50mL容量瓶中，加入40mL甲醇超聲振在上述操作條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰兩針的峰面積相對變化小于1.5%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標樣溶液中某一酚的峰面積分別進行平均。試樣中某一種酚的質量分數按式(2)計算，2,4-滴系列試樣中游離酚的質量分數按式(3)計算，2甲4氯系列試樣中游離酚的質量分數按式(4)計算： (2) (3) (4)式中：w———試樣中某一種酚質量分數，以百分數(%)表示；A——試樣溶液中，某一種酚的峰面積的平均值；mh--—游離酚標樣儲備液中某一種酚標樣的質量，單位為克(g);Wh——某一種酚標樣的質量分數，以百分數(%)表示；Abr—標樣溶液中，某一種酚的峰面積的平均值；m?——試樣的質量，單位為克(g);w?———2,4-滴系列試樣中游離酚的質量分數，以百分數(%)表示；162.99——2,4-二氯酚摩爾質量，單位為克每摩爾(g/mol);M——某一種酚的摩爾質量，單位為克每摩爾(g/mol),見附錄A;W?——2甲4氯系列試樣中游離酚的質量分數，以百分數(%)表示；5.3.2.7允許差游離酚質量分數兩次平行測定結果之相對差，應不大于20%,取其算術平均值作為測定結果。5.4檢驗結果判定規則按GB/T8170—2008中4.3.3判定檢驗結果是否符合本文件要求。7GB/T41225—2021(資料性)中文名稱ISO通用名稱CAS登錄號實驗式相對分子質量結構式2-氯酚2-Chlorophenol4-氯酚4-Chlorophenol2,6-二氯酚C?H?Cl?O2,4-二氯酚C?H,Cl?O2.4,6-三氯酚C?H?Cl?O鄰甲酚C?H?O4-氯鄰甲酚6-氯鄰甲酚6-Chloro-o-cresol4.6-二氯鄰甲酚4,6-Dichloro-0-cresolC?H;Cl?O8GB/T41225—2021(資料性)苯氧羧酸類除草劑中主要游離酚的鑒別試驗——高效液相色譜法(pH值2.75)利用游離酚在高效液相色譜法分析中對流動相的pH值敏感的特性，通過改變流動相的pH值對主要的游離酚進行高效液相色譜法的鑒別。B.2試劑和溶液B.3儀器B.4高效液相色譜法操作條件B.4.1.1流動相A:乙酸鈉水溶液，1.36g乙酸鈉溶解于2L水中，用冰乙酸調節pH值至2.75,混勻，脫氣，備用。B.4.1.2流動相B以及流動相梯度設定見5.3.2.4.1。B.4.2保留時間35.4min、4-氯鄰甲酚約42.5min、2,4-二氯酚約43.8min、4,6-二氯鄰甲酚約46.4min、2,4,6-三氯酚約46.7min。典型的游離酚混合標準品的高效液相色譜圖見圖B.1。圖B.1游離酚混合標準品的高效液相色譜圖9C.1方法提要試樣用甲醇溶解，使用高效液相色譜-四極桿質譜聯用儀，采用SIM模式對試樣中的游離酚進行質譜檢測，根據得到的提取離子色譜圖對試樣中主要的游離酚進行鑒別。C.2試劑和溶液C.2.5標樣見5.3.2.2.5。C.3儀器C.3.1高效液相色譜-四極桿質譜聯用儀。C.4.3柱溫：30℃。