ICS11.080.01

CCSC47

中華人民共和國國家標準

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

代替GB18281.2-2015

`

醫療保健產品滅菌生物指示物第2部分：

環氧乙烷滅菌用生物指示物

Sterilizationofhealthcareproducts—Biologicalindicators—Part2:Biological

indicatorsforethyleneoxidesterilizationprocesses

(ISO11138-2:2017,IDT)

（征求意見稿）

20XX-XX-XX發布20XX-XX-XX實施

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定

起草。

本文件是GB/T18281《醫療保健產品滅菌生物指示物》系列標準的第2部分。GB/T18281已經發

布了以下部分：

——第1部分:通則；

——第3部分:濕熱滅菌用生物指示物；

——第4部分:干熱滅菌用生物指示物；

——第5部分:低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物；

——第7部分:選擇、使用和結果判斷指南；

——第8部分:縮短生物指示物培養時間的確認方法。

本文件代替GB18281.2—2015《醫療保健產品滅菌第2部分：環氧乙烷滅菌用生物指示物》，與

GB18281.2—2015相比，主要技術變化如下：

——刪除了30℃時D值表示抗力的方式（見2015年版的9.4）；

——刪除了30℃時D值應≥12.5min的要求（見2015年版的9.5）；

——刪除了生物指示物抗力表示為FBIO的描述（見2015年版的9.6）；

——增加了使用混合氣體和100%EO氣體進行測試時的D值要求（見9.5和9.6）；

——刪除了30℃時存活-殺滅反應特性要求的示例（見2015年版的9.9）；

——更改了54℃時存活-殺滅反應特性要求的示例（見9.9）；

——增加了54℃時，D值為2.0min的存活-殺滅反應特性要求的示例（見9.9）；

——增加了第二個最小D值的引入和刪除30℃時最小D值要求的理由的描述（見附錄B）；

——標準參考文獻更新。

本文件等同采用ISO11138-2：2017《醫療保健產品滅菌第2部分：環氧乙烷滅菌用生物指示物》。

與本文件規范性引用的國際文件有一致性對應關系的我國文件如下：

——GB/T18281.1-20XX醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則（ISO11138-1:2017，IDT）

——GB/T24628-20XX醫療保健產品滅菌生物與化學指示物測試設備（ISO18472:2018，IDT）

本部分做了下列編輯性修改：

——刪除了范圍中注2，目的是適應我國國情。

請注意本文件的有些內容可能涉及專利。本文件的發行機構不承擔識別這些專利的責任。

本文件由國家藥品監督管理局提出。

本文件由全國消毒技術與設備標準化技術委員會（SAC/TC200）歸口。

本文件起草單位：

本文件主要起草人：

本文件及其所替代文件的歷次版本發布情況為：

——GB18281.2-2000；

——GB18281.2-2015；

——本次為第二次修訂。

II

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

引言

GB/T18281《醫療保健產品滅菌生物指示物》是有關生物指示物的通用性和專用性標準。GB/T

18281旨在提供生物指示物的要求、選擇和使用指南，擬由八個部分構成：

——第1部分：通則。目的在于提供生物指示物的通用要求。

——第2部分：環氧乙烷滅菌用生物指示物。目的在于提供環氧乙烷滅菌用生物指示物的專用要求。

——第3部分：濕熱滅菌用生物指示物。目的在于提供濕熱滅菌滅菌用生物指示物的專用要求。

——第4部分：干熱滅菌用生物指示物。目的在于提供干熱滅菌用生物指示物的專用要求。

——第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物。目的在于提供低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物的

專用要求。

——第6部分：過氧化氫滅菌過程用生物指示物。目的在于提供過氧化氫滅菌用生物指示物的專用

要求。

——第7部分：選擇、使用和結果判斷指南。目的在于提供生物指示物的正確選擇和使用的指南。

——第8部分：縮短生物指示物培養時間的確認方法。目的在于提供縮短生物指示物培養時間的確

認方法。

GB/T18281.1規定了生物指示物生產、標簽、試驗方法和性能要求，這些指示物包含預期用于滅菌

過程的確認和常規監視的染菌載體和菌懸液。本文件規定了用于環氧乙烷滅菌過程的生物指示物的專用

要求。

GB/T18281提供了最新的通用要求和試驗方法。本文件是由代表制造商、用戶和監管部門的專家

共同參與制定。本文件的制定目的不是提倡在不推薦使用的場合使用生物指示物，而是為目前使用的生

物指示物提供規范。

環氧乙烷滅菌確認與常規控制的要求參見GB18279和GB/T19974。

生物指示物的選擇、使用及結果判斷參見GB/T18281.7。

III

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

醫療保健產品滅菌生物指示物第2部分：環氧乙烷滅菌用生物指

示物

1范圍

本文件規定了擬在評價滅菌器和滅菌過程性能時采用的試驗微生物、菌懸液、染菌載體、生物指示

物的要求和試驗方法。該滅菌器和滅菌過程使用純環氧乙烷氣體或環氧乙烷氣體與稀釋氣體的混合物，

滅菌溫度范圍為29℃?65℃。

本文件適用于環氧乙烷滅菌用生物指示物。

本文件不適用于其他類型的生物指示物。

注1：關于環氧乙烷滅菌確認與控制的要求見GB18279和GB/T19974。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T18281.1-20XX醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則（ISO11138-1:2017,IDT）

GB/T24628-20XX醫療保健產品滅菌生物與化學指示物測試設備（ISO18472:2018，IDT）

3術語和定義

GB/T18281.1界定的術語和定義適用于本文件。

4通用要求

GB/T18281.1的要求適用。

5試驗微生物

5.1試驗微生物應為萎縮芽孢桿菌芽孢、枯草芽孢桿菌芽孢或其他證明符合本文件要求的等效性

能的微生物菌株。

注1：枯草芽孢桿菌中的某些菌株已被重新歸類為萎縮芽孢桿菌。

注2：萎縮芽孢桿菌ATCC9372、NCTC10073、NCIMB8058、DSM2277、NRRLB-4418和CIP77.18已被發現是合適

的菌株1)。

5.2如使用除萎縮芽孢桿菌以外的試驗微生物，應確定此試驗微生物抗力的適用性。

6菌懸液

GB/T18281.1的要求適用。

1)注：這些是市場上可以買到的合適產品的例子，該信息是為了方便本文的用戶而提供的，不代表本文件對這些產品的認可。

1

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

7載體和初級包裝

7.1用于環氧乙烷滅菌用生物指示物的載體和初級包裝材料的適用性應被證明符合GB/T

18281.1-20XX中5.2和附錄B的要求。

7.2確定符合性的暴露條件應為：

a)最低暴露溫度：≥55℃；

b)滅菌劑：在相對濕度≥70%RH條件下，環氧乙烷氣體濃度≥800mg/L；

c)最高暴露溫度：由生物指示物制造商規定；

d)暴露時間：≥6h。

注：被選條件要對載體具有實際的挑戰，同時要在環氧乙烷滅菌過程適用的范圍內。

8染菌載體和生物指示物

GB/T18281.1的要求適用。

9菌數和抗力

9.1制造商應聲明生物指示物的抗力特性符合GB/T18281.1-20XX中6.4的要求。

9.2生物指示物上每單位活菌數的增量應以≤0.1×10n的整數倍標稱（例如每毫升菌懸液、每個

染菌載體或每個生物指示物）。

9.3染菌載體和生物指示物上的活菌數應≥1.0×106。

9.4抗力應用54℃時的D值表示，單位為分鐘。每批生物指示物或染菌載體的D值應以54℃時的

分鐘數標稱，保留一位小數。

9.5按附錄A的條件，使用混合測試氣體（見附錄B）進行測試時，含有萎縮芽孢桿菌芽孢的懸

液、染菌載體或生物指示物的D值在54℃時應≥2.5min。其他微生物的D值應支持其應用。

9.6按附錄A的條件，使用100%EO測試氣體（見附錄B）進行測試時，含有萎縮芽孢桿菌芽孢的

懸液、染菌載體或生物指示物的D值在54℃時應≥2.0min。其他微生物的D值應支持其應用。

9.7本文件和GB/T18281的任何其他部分規定的抗力特性應使用其所用滅菌過程的特定關鍵變量

來定義。

9.8D值按GB/T18281.1-20XX中附錄C和附錄D的方法確定。

9.9D值和存活-殺滅反應特性的確定需要使用抗力儀，并在規定的過程參數下應用（見附錄A）。

9.10存活-殺滅區間可以使用GB/T18281.1-20XX附錄E中的公式計算。

注：此信息對使用者在比較同一制造商不同批次產品時是有價值的。

示例：

使用GB/T18281.1-20XX附錄E中的公式，結合本文件規定的最少菌數和最小D值要求，存活-殺滅反應特性為：

——在54℃時,D值為2.5min時：存活時間≥10min，殺滅時間≤25min；

——在54℃時,D值為2.0min時：存活時間≥8min，殺滅時間≤20min。

2

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

A

A

附錄A

（規范性）

環氧乙烷滅菌用生物指示物抗力的測定方法

A.1概述

本方法需要特定的設備:抗力儀。環氧乙烷滅菌用抗力儀過程參數規范見GB/T24628。

有關測試方法的具體要求見A.2。

A.2試驗方法

A.2.1把樣品置于合適的載樣器材上。

A.2.2把抗力儀的腔室預熱到54℃的試驗條件。

A.2.3把裝有樣品的載樣器放入腔室內，關閉腔室，開始試驗循環。

A.2.4按下面的步驟開始操作：

步驟1：腔室抽真空至絕對壓力10kPa±0.5kPa。

步驟2：通入充足的水蒸氣，使腔室的相對濕度為60%士10%。并維持此條件30min±lmin。在通

入蒸汽前，樣品宜允許加熱到露點以上，以避免可能形成冷凝水。

步驟3：往腔室內加入環氧乙烷氣體，在60s內濃度達到600mg/L±30mg/L。當暴露時間為0min

時，應無環氧乙烷氣體加入。

步驟4：維持此條件在規定的暴露時間±5s之內。

步驟5：在暴露階段結束時，腔室抽真空，在60s內降到絕對壓力10kPa或更低，接著通入經過濾的

空氣或惰性氣體（如氮氣），至環境氣壓。

步驟6：額外重復步驟5四次或必要時更多次，以減少操作人員接觸殘留在腔室中的任何滅菌劑。

步驟7：最后,取出樣品并轉移到培養基培養。（見GB/T18281.1-20XX第7章）

A.2.5轉移時間應作記錄,所有的測試應使用相同的時間段。

A.3抗力的確定

應按照GB/T18281.1-20XX中附錄C、附錄D和附錄E的方法確定抗力。

3

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

B

B

附錄B

（資料性）

評估抗力的測試氣體變化而引入第二個最小D值規范和刪除30℃時最小D值要求的理由

B.1第二個最小D值的引入

本文件要求在符合GB/T24628標準的抗力儀中使用標稱濃度為600mg/L的環氧乙烷氣體對環氧乙烷

滅菌用生物指示物進行D值測試。從歷史上看，D值測試通常是由BI制造商使用混合測試氣體來完成的。

截至2014年12月31日，美國國家環境保護局頒布的《清潔空氣法》禁止在美國銷售和使用基于HCFC（氫

氯氟烴）的產品，要求美國BI制造商將D值測試氣體從HCFC/EO更改為100%EO。

三個美國生物指示物制造商在54℃下對四種不同的生物指示物產品進行的一系列D值測試表明，使

用100%EO氣體獲得的D值始終低于在HCFC/EO混合氣體中獲得的D值。盡管兩組測試的標稱EO濃度均為

600mg/L，報告的D值之間的差異卻高達40%。該研究現已在2014年《制藥科技》[4]上發表。

根據經同行評審的文獻數據，本文件已對GB18281.2-2015中54℃下D值的要求進行了修訂，并為

100%EO氣體中進行的測試添加了2.0min的D值規范選項。在不改變BI實際抗力的情況下為制造商提供了

一個保持符合標準的選項，該選項比推動制造商增加BI抗力來滿足標準的方式更優。對于使用低抗力BI

已確認的滅菌過程，這種增加BI抗力的情況會給終端用戶帶來更高的BI陽性風險。

B.2刪除30℃時D值得要求

由于缺少數據來支持30℃時最小D值12.5min的要求，并且缺乏實際使用該測試方法的證據，因此此

條已從本文件中刪除。

4

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

參考文獻

[1]ISO11135Sterilizationofhealth-careproducts-Ethyleneoxide-Requirementsforthe

development,validationandroutinecontrolofasterilizationprocessformedicaldevice

[2]GB/T18281.7醫療保健產品滅菌生物指示物選擇、使用和結果判斷指南

[3]GB/T19974醫療保健產品滅菌滅菌因子的特性及醫療器械滅菌過程的開發、確認和常規控

制的通用要求

[4]KrushefskiG.“Effectsof100%EthyleneOxideTestGasontheResistanceofEthylene

OxideBiologicalIndicators,”PharmaceuticalTechnology38(12)2014

5

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

目次

前言..................................................................................II

引言.................................................................................III

1范圍................................................................................1

2規范性引用文件......................................................................1

3術語和定義..........................................................................1

4通用要求............................................................................1

5試驗微生物..........................................................................1

6菌懸液..............................................................................1

7載體和初級包裝......................................................................2

8染菌載體和生物指示物................................................................2

9菌數和抗力..........................................................................2

附錄A（規范性）環氧乙烷滅菌用生物指示物抗力的測定方法................................3

附錄B（資料性）評估抗力的測試氣體變化而引入第二個最小D值規范和刪除30℃時最小D值要求的

理由...................................................................................4

參考文獻...............................................................................5

I

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

醫療保健產品滅菌生物指示物第2部分：環氧乙烷滅菌用生物指

示物

1范圍

本文件規定了擬在評價滅菌器和滅菌過程性能時采用的試驗微生物、菌懸液、染菌載體、生物指示

物的要求和試驗方法。該滅菌器和滅菌過程使用純環氧乙烷氣體或環氧乙烷氣體與稀釋氣體的混合物，

滅菌溫度范圍為29℃?65℃。

本文件適用于環氧乙烷滅菌用生物指示物。

本文件不適用于其他類型的生物指示物。

注1：關于環氧乙烷滅菌確認與控制的要求見GB18279和GB/T19974。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T18281.1-20XX醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則（ISO11138-1:2017,IDT）

GB/T24628-20XX醫療保健產品滅菌生物與化學指示物測試設備（ISO18472:2018，IDT）

3術語和定義

GB/T18281.1界定的術語和定義適用于本文件。

4通用要求

GB/T18281.1的要求適用。

5試驗微生物

5.1試驗微生物應為萎縮芽孢桿菌芽孢、枯草芽孢桿菌芽孢或其他證明符合本文件要求的等效性

能的微生物菌株。

注1：枯草芽孢桿菌中的某些菌株已被重新歸類為萎縮芽孢桿菌。

注2：萎縮芽孢桿菌ATCC9372、NCTC10073、NCIMB8058、DSM2277、NRRLB-4418和CIP77.18已被發現是合適

的菌株1)。

5.2如使用除萎縮芽孢桿菌以外的試驗微生物，應確定此試驗微生物抗力的適用性。

6菌懸液

GB/T18281.1的要求適用。

1)注：這些是市場上可以買到的合適產品的例子，該信息是為了方便本文的用戶而提供的，不代表本文件對這些產品的認可。

1

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

7載體和初級包裝

7.1用于環氧乙烷滅菌用生物指示物的載體和初級包裝材料的適用性應被證明符合GB/T

18281.1-20XX中5.2和附錄B的要求。

7.2確定符合性的暴露條件應為：

a)最低暴露溫度：≥55℃；

b)滅菌劑：在相對濕度≥70%RH條件下，環氧乙烷氣體濃度≥800mg/L；

c)最高暴露溫度：由生物指示物制造商規定；

d)暴露時間：≥6h。

注：被選條件要對載體具有實際的挑戰，同時要在環氧乙烷滅菌過程適用的范圍內。

8染菌載體和生物指示物

GB/T18281.1的要求適用。

9菌數和抗力

9.1制造商應聲明生物指示物的抗力特性符合GB/T18281.1-20XX中6.4的要求。

9.2生物指示物上每單位活菌數的增量應以≤0.1×10n的整數倍標稱（例如每毫升菌懸液、每個

染菌載體或每個生物指示物）。

9.3染菌載體和生物指示物上的活菌數應≥1.0×106。

9.4抗力應用54℃時的D值表示，單位為分鐘。每批生物指示物或染菌載體的D值應以54℃時的

分鐘數標稱，保留一位小數。

9.5按附錄A的條件，使用混合測試氣體（見附錄B）進行測試時，含有萎縮芽孢桿菌芽孢的懸

液、染菌載體或生物指示物的D值在54℃時應≥2.5min。其他微生物的D值應支持其應用。

9.6按附錄A的條件，使用100%EO測試氣體（見附錄B）進行測試時，含有萎縮芽孢桿菌芽孢的

懸液、染菌載體或生物指示物的D值在54℃時應≥2.0min。其他微生物的D值應支持其應用。

9.7本文件和GB/T18281的任何其他部分規定的抗力特性應使用其所用滅菌過程的特定關鍵變量

來定義。

9.8D值按GB/T18281.1-20XX中附錄C和附錄D的方法確定。

9.9D值和存活-殺滅反應特性的確定需要使用抗力儀，并在規定的過程參數下應用（見附錄A）。

9.10存活-殺滅區間可以使用GB/T18281.1-20XX附錄E中的公式計算。

注：此信息對使用者在比較同一制造商不同批次產品時是有價值的。

示例：

使用GB/T18281.1-20XX附錄E中的公式，結合本文件規定的最少菌數和最小D值要求，存活-殺滅反應特性為：

——在54℃時,D值為2.5min時：存活時間≥10min，殺滅時間≤25min；

——在54℃時,D值為2.0min時：存活時間≥8min，殺滅時間≤20min。

2

GB/T18281.2—20XX/ISO11138-2:2017

A

A

附錄A

（規范性）

環氧乙烷滅菌用生物指示物抗力的測定方法

A.1概述

本方法需要特定的設備:抗力儀。環氧乙烷滅菌用抗力儀過程參數規范見GB/T24628。

有關測試方法的具體要求見A.2。

A.2試驗方法

A.2.1把樣品置于合適的載樣器材上。

A.2.2把抗力儀的腔室預熱到54℃的試驗條件。

A.2.3把裝有樣品的載樣器放入腔室內，關閉腔室，開始試驗循環。

A.2.4按下面的步驟開始操作：

步驟1：腔室抽真空至絕對壓力10kPa±0.5kPa。

步驟2：通入充足的水蒸氣，使腔室的相對濕度為60%士10%。并維持此條件30min±lmin。在通

入蒸汽前，樣品宜允許加熱到露點以上，以避免可能形成冷凝水。

步驟3：往腔室內加入環氧乙烷氣體，在60