XX/TXXXXX—XXXX2布魯氏菌病磁微粒化學(xué)發(fā)光抗體檢測(cè)方法NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范激發(fā)液由激發(fā)液A和激發(fā)液B組成，與化學(xué)發(fā)光免疫試劑配合使用，是一種輔助試4縮略語(yǔ)XX/TXXXXX—XXXX3LPS：脂多糖（lipopolysaccharidPBS：磷酸鹽緩沖液（phosphatebuffersalinEDC：1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺（1-(3-Dimethylaminop采用磁微粒化學(xué)發(fā)光競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)布魯氏菌抗體。將待測(cè)樣本、布魯氏7.32℃~8℃冰箱，-20℃冰箱。8.1.1進(jìn)行靜脈無(wú)菌采血，不少于2mL。采集靜脈血時(shí)，每只動(dòng)物使用一個(gè)8.1.2將血液室溫（15℃~25℃)靜置于斜面2h～4h，待血液自然凝固后，置2℃~8℃冰箱中XX/TXXXXX—XXXX48.1.3小心吸出上層血清保存?zhèn)溆谩Ｑ鍛?yīng)清亮，無(wú)溶血、無(wú)污染。8.2.1血清樣本若在一周內(nèi)檢測(cè)，可置2℃~8℃條件下保存。若超過(guò)一周檢測(cè)，應(yīng)置于-20℃以運(yùn)輸。按照《NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范》進(jìn)行樣本的保存。9操作步驟樣本與陰性對(duì)照發(fā)光值之比＞0.5，樣本判定為布魯XX/TXXXXX—XXXX5A.1取0.3mg布魯氏菌LPS抗原，裝入透析袋中，置PBS中室溫（15℃~25℃)透析4h。溶液，搖勻后固定在混勻器上室溫（15℃~25℃)反應(yīng)30min。反應(yīng)結(jié)束后，磁分離，移除上清，用A.4抗原偶聯(lián)上述磁珠用800μL總體積1mL，搖勻后固定在混勻器上室溫（15℃~25℃)反應(yīng)4h。反應(yīng)結(jié)束后，磁分離，移除上清，2℃~8℃保存?zhèn)溆谩X/TXXXXX—XXXX結(jié)合物），（15℃~25℃)透析4h。取出透析后的抗體溶液，加入潔凈玻璃瓶中，再將吖啶酯溶液（濃度5.0mmoL/L將得到布魯氏菌標(biāo)記單抗用PBS（0.01moL/L，pH值7.4）按照1:2000稀釋，加入0.02%Proclin-300混勻后經(jīng)0.22μm濾器過(guò)濾，無(wú)菌分裝，于2℃~8℃保存。XX/TXXXXX—XXXX7對(duì)1頭沒(méi)有感染布魯氏菌病的健康動(dòng)物進(jìn)行頸部靜脈大量采血，經(jīng)布魯氏菌補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)為室溫（15℃~25℃)待血液凝固后，37℃靜置2h，然后2℃~8℃靜置1h，將析出的血清測(cè)抗體效價(jià)不低于1:512時(shí)，無(wú)菌采集室溫（15℃~25℃)待血液凝固后，37℃靜置2h，然后2℃~8℃靜置1h，將析出的血清X(qián)X/TXXXXX—XXXX8相關(guān)試劑量取200mL純化水，加入37%濃鹽酸溶液均勻加純化水定容至1000mL。定量分裝，2℃~8℃保存。X-1002.5mL，攪拌均勻加純化水定容至1000mL。定量分裝，2℃~8℃保存。800mL純化水?dāng)嚢枞芙猓偌蛹兓ㄈ葜?000mL，經(jīng)0.22μm過(guò)濾，置2℃~8℃保存。經(jīng)0.22μm過(guò)濾，置2℃~8℃保存。攪拌均勻，PBS定容至1000mL，經(jīng)0.22μ