高級中學名校試卷PAGEPAGE1江蘇省徐州市銅山區2023-2024學年高二下學期4月期中考試試題注意事項：考生在答題前請認真閱讀本注意事項及各題答題要求1.本試卷共8頁，滿分為100分，考試時間為75分鐘。考試結束后，請將答題卡交回。2.答題前，請務必將自己的姓名、考試號等用0.5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在答題卡的規定位置。3.請認真核對答題卡表頭規定填寫或填涂的項目是否準確。4.作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他〖答案〗。作答非選擇題，必須用0.5毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效。5.如需作圖，必須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑加粗。一、單項選擇題：本部分包括14題，每題2分，共計28分。每題只有一個選項最符合題意。1.培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養基質。下列關于培養基的敘述錯誤的是（）A.培養霉菌時需要將培養基調至堿性B.制作固體培養基時可以加入瓊脂C.對培養基進行滅菌可以采用濕熱滅菌D.培養乳酸桿菌時需要在培養基中添加維生素〖答案〗A〖祥解〗培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養基質；根據物理性質分為固體培養基和液體培養基，培養基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物種和氧氣的要求。【詳析】A、培養霉菌時需將pH調至酸性，培養細菌時需將pH調至中性或是微堿性，A錯誤；B、培養基中的凝固劑瓊脂，通常在98℃以上熔化，44℃以下凝固，在液體培養基中加瓊脂制成的固體培養基，B正確；C、對培養基進行滅菌可以采用濕熱滅菌，如高壓蒸汽滅菌法，C正確；D、培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養基質，如培養乳酸桿菌時需要在培養基中添加維生素，以滿足生長所需，D正確。故選A。2.制備篩選支原體的培養基時，需要在基礎培養基里添加動物血清、酵母浸液、青霉素等。多數4～5d長出“油煎蛋”狀菌落。下列相關敘述錯誤的是（）A.動物血清可以提供營養和生長因子促進支原體的生長和增殖B.可以在篩選支原體的培養基里添加青霉素以防止雜菌污染C.實驗時用無水乙醇對實驗員的手消毒效果差且有安全隱患D.臨床上根據菌落特征確診是否支原體感染是高效而準確的〖答案〗D〖祥解〗固體培養甚主要用于微生物的分離、鑒定。選擇培養基是根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，而提高該菌的篩選率。【詳析】A、支原體的生長和增殖需要培養基中提供營養和生長因子，動物血清可以滿足，A正確；B、添加青霉素可以殺死其他雜菌，可以篩選出支原體，B正確；C、對實驗員的手消毒需要用70%的酒精，不能用無水乙醇，C正確；D、臨床上篩選支原體感染，需要制備篩選支原體的培養基，過程繁瑣，且支原體菌落特征不明顯，不好區分其他雜菌的菌落，運用核酸和抗原檢測是高效且準確的，D錯誤。故選D。3.野生型大腸桿菌菌株能在基礎培養基上生長，氨基酸營養缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養基上生長。下圖為純化某氨基酸營養缺陷型突變株的部分流程示意圖。下列敘述正確的是（）A.圖中③為基本培養基，可用高壓蒸汽滅菌鍋或者干熱滅菌箱進行滅菌B.接種環截取菌液后在②表面涂布接種，待形成菌落后用無菌絨布按壓C.C過程原位影印時用兩塊無菌絨布原位影印③④號培養基D.可從④中挑取E進行純化培養以獲得某氨基酸營養缺陷型突變株〖答案〗C〖祥解〗題圖分析，圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細菌，然后運用影印法將菌種接種基本培養基、完全培養基；在基本培養基中，某氨基酸突變株不能生長，而在完全培養基中能夠生長，據此可以選擇出氨基酸突變株。【詳析】A、圖中①②④為完全培養基，③為基本培養基，培養基不能用干熱滅菌箱進行滅菌，A錯誤；B、用接種槍將菌液滴加到培養基表面，再用涂布器將菌液均勻的涂布在②表面，待形成菌落后用無菌絨布按壓，B錯誤；C、若先影印④，由于④為完全培養基，會導致絨布上含有④的成分，用同一塊無菌絨布無法起到篩選作用，因此，C過程原位影印時用兩塊無菌絨布原位影印③④號培養基，C正確；D、由圖觀察可知，D在基本培養基中無法生長，而在完全培養基上能夠生長，據此推測D是氨基酸營養缺陷型菌株，可從④中挑取D進行純化培養以獲得某氨基酸營養缺陷型突變株，D錯誤。故選C。4.下列關于果酒、果醋制作的敘述，正確的是（）A.果酒，果醋制作中涉及的微生物的代謝類型完全相同B.果酒、果醋發酵過程中，發酵液的密度降低、pH下降C.果酒中的酒精可以為醋酸菌發酵提供碳源、氮源和能源D.醋酸菌利用果酒中的酒精進行醋酸發酵過程中會產生大量氣泡〖答案〗B〖祥解〗1、在利用酵母菌發酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環境下一段時間使其繁殖，再隔絕氧氣進行發酵；酒精發酵的最佳溫度是在18℃～30℃，pH最好是弱酸性。2、醋酸菌好氧型細菌，當缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。【詳析】A、制作果酒的微生物是酵母菌，制作果醋的微生物是醋酸菌，酵母菌是異養兼性厭氧菌，醋酸菌屬于異養好氧菌，代謝類型不同，A錯誤；B、果酒制作過程中產生的二氧化碳和果醋制作過程中產生的醋酸都會使發酵液的pH逐漸降低，B正確；C、果酒中的酒精可以為醋酸菌發酵提供碳源和能源，不能提供氮源，C錯誤；D、醋酸菌利用果酒中的酒精進行醋酸發酵過程中不會產生氣體，沒有氣泡產生，D錯誤。故選B。5.酵母菌的品質影響葡萄酒的產量和質量，研究人員為分離出產酒精能力強的酵母菌菌株，進行了以下實驗，甲、乙、丙、丁錐形瓶內分別加入100ml完全培養基，隨培養時間的延長，乙、丙、丁培養基均出現渾濁現象。下列說法錯誤的是（）A.葡萄酒發酵過程中，缺氧酸性環境、酵母菌產生的次生代謝產物酒精等可抑制雜菌的繁殖B.用稀釋涂布平板法計算出葡萄酒過濾液的活菌數為6．8×109個/L，此數值可能低于實際的活菌數C.對培養基進行滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌法，菌種接種過程中的試管口、瓶口等需灼燒滅菌D.由圖二可知，乙、丙、丁培養基渾濁的原因是培養基滅菌不徹底，丁組酵母菌產酒精能力比乙強〖答案〗D〖祥解〗1、初生代謝是生物生長和生存所必需的代謝活動，因此在整個生命過程中它一直進行著。初生代謝物有糖類、脂質、蛋白質和核酸等。次生代謝不是生物生長所必需的，一般在特定的組織或器官中，并在一定的環境和時間條件下才進行。2、稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目低。這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。【詳析】A、次生代謝不是生物生長所必需的，一般在特定的組織或器官中，并在一定的環境和時間條件下才進行，葡萄酒發酵過程中，酵母菌在缺氧、酸性環境中產生的次生代謝產物酒精等可抑制雜菌的繁殖，A正確；B、分析題圖可知，培養基中平均菌落數為（62+68+74）÷3=68，因此用稀釋涂布平板法計算出葡萄酒過濾液的活菌數為：（68÷0.1）×103×104=6.8×109個/L，計數過程中兩個或兩個以上細胞連在一起，平板上生長出一個菌落，所以此數值可能低于實際的活菌數，B正確；C、培養基滅菌采用高壓蒸汽滅菌，玻璃器皿、接種用具可采用干熱滅菌，菌種接種過程中的試管口、瓶口等都需在酒精燈火焰處進行灼燒滅菌，C正確；D、乙、丙、丁挑取不同的菌落培養，丙瓶與乙、丁瓶相同條件培養，但培養液沒有酒精產生，且瓶內活菌數量不低，推測丙瓶是通氣培養；甲接種無菌水，瓶中無菌，說明培養基滅菌徹底，無菌操作正常，丁組的活菌數比乙組少，但是產生的酒精和乙組一樣多，所以丁組產生酒精能力比乙強，D錯誤。故選D。6.植物組織培養技術越來越多的用于商業化生產。下列相關敘述錯誤的是（）A.可利用發酵罐來大規模培養植物細胞以實現代謝產物的工業化生產B.脫分化和再分化所用培養基中生長素和細胞分裂素相對含量不同C.對試管苗煉苗（馴化）的操作步驟之一是用流水除去根部培養基D.用同一植株體細胞離體培養獲得的再生苗不會出現變異〖答案〗D〖祥解〗植物組織培養過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養依據的原理是植物細胞的全能性。【詳析】A、可利用發酵罐來大規模培養植物細胞以實現代謝產物的工業化生產，發酵罐培養植物細胞，它不受季節、天氣等限制，不占用耕地，A正確；B、脫分化和再分化所用培養基中生長素和細胞分裂素相對含量不同，脫分化過程中生長素和細胞分裂素比值為1:1，再分化過程生長素和細胞分裂素比值小于1:1時分化為芽，大于1:1時分化為根，B正確；C、對試管苗煉苗（馴化）的操作步驟之一是用流水除去根部培養基，再將幼苗移植到消毒過后的蛭石或珍珠巖等環境中，C正確；D、用同一植株體細胞離體培養過程中，在細胞分裂時可能會發生變異，因此獲得的再生苗可能會出現變異，D錯誤；故選D。7.2017年中國科學家利用“聰明的化學方法和操作技巧（10s內去核，15s內核移植）”成功培育了體細胞克隆猴，流程如下，下列敘述錯誤的是（）A.科學家多年的反復實驗帶來的嫻熟技術使卵細胞受損減少B.核移植前用“滅活病毒短暫處理”主要目的是誘導細胞融合C.“聰明的化學方法”主要指圖中①②，通過調節組蛋白修飾而抑制基因表達D.上述技術有助于加速針對阿爾茨海默病、免疫缺陷、腫瘤等的新藥研發進程〖答案〗C〖祥解〗動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體。核移植得到的動物稱克隆動物。【詳析】A、科學家多年的反復實驗帶來的嫻熟技術減少對卵細胞的傷害，A正確；B、誘導動物細胞融合的方法可以是滅活的病毒，故B正確；C、重構胚中有部分基因進行選擇性表達，本質是可能是表觀遺傳修飾，所以需要用組蛋白去甲基化酶的mRNA來降低組蛋白甲基化水平，組蛋白脫乙酰化抑制劑來提高組蛋白乙酰化水平，但不一定會抑制基因表達，C錯誤。D、上述技術有助于加快靈長類動物的克隆技術進步，加速針對阿爾茨海默病、免疫缺陷、腫瘤等的新藥研發進程，D正確。故選C。8.下列有關“培養”的敘述錯誤的是（）A.宜采用通氣培養并攪拌以獲取更多的紫杉醇B.可采用稀釋涂布平板法分離純化培養乳酸菌C.可在96孔板上培養和篩選特定的雜交瘤細胞D.采集到的卵母細胞需要在體外進行成熟培養〖答案〗B〖祥解〗將接種于培養基內，在合適條件下形成的含有特定種類微生物的群體稱為培養物。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養物，獲得純培養物的過程就是純培養。【詳析】A、植物細胞需要進行有氧呼吸，采用通氣培養并攪拌以利于細胞呼吸和獲得更多養料，進而獲取更多的紫杉醇，A正確；B、稀釋涂布平板法適于分化有氧呼吸的生物，不適合用來分離純化乳酸菌，B錯誤；C、可在96孔板上利用抗原抗體雜交技術，可培養和篩選特定的雜交瘤細胞，C正確；D、采集到的卵母細胞需要在體外進行成熟培養，培養到減數第二次分裂中期，D正確。故選B。9.為了檢測藥物X、Y和Z的抗癌效果，采用細胞培養板添加溶于DMSO溶劑的三種藥物培養肺癌細胞，培養過程及結果如圖所示。下列說法正確的是（）A.細胞培養液中通常需要加入一定量的血清和抗生素，防止病毒污染B.對照組中應加入等體積的生理鹽水在CO2培養箱中培養肺癌細胞C.起始肺癌細胞數量應保持一致，計數時應用胃蛋白酶處理貼壁細胞D.根據實驗結果，藥物X的抗癌效果比Y好，藥物Z沒有抗癌作用〖答案〗D〖祥解〗1、分析題意可知：該實驗目的是檢測藥物X、Y和Z的抗癌效果，自變量是檢測藥物X、Y和Z，因變量是檢測細胞數量。2、動物細胞培養的條件：（1）無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養液，以清除代謝廢物。（2）營養物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質。（3）溫度和pH。（4）氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（CO2的作用是維持培養液的pH）。【詳析】A、抗生素具有殺菌（不是殺病毒）作用，為防止培養液被污染，可在培養液中加入一定量的抗生素，A錯誤；B、由題干信息可知，三種藥物是溶于DMSO溶劑的，則對照組中應加入等體積的DMSO溶劑，以排除體積和溶劑等無關因素的影響，B錯誤；C、遵循實驗的單一變量原則，無關變量起始肺癌細胞數量應保持一致，計數時要使貼壁細胞從瓶壁上分離下來，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，C錯誤；D、分析實驗結果，加入X的癌細胞個數是6.7×104，加入Y的癌細胞個數是5.3×105，說明藥物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌細胞個數是8.0×106，與空白對照相比，藥物Z無抗癌作用，D正確。故選D。10.6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G-6PD）有F和S兩種類型，分別由一對等位基因XF和XS編碼。基因型為XFXS女性體細胞中的兩個X染色體，會有一個隨機失活。將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理后先進行細胞的原代培養，再對不同的細胞分別進行單克隆培養。分別對原代培養和單克隆培養的細胞進行G-6PD蛋白電泳檢測，結果如圖所示。下列說法錯誤的是（）A.該過程用到的主要細胞工程技術是動物細胞培養B.用胰蛋白酶處理皮膚組織可使其分散成單個細胞C.原代培養細胞電泳圖有2個條帶是因為同時檢測了多個細胞D.單克隆培養的細胞1、2、4、5、8、9與3、6、7所含基因不同〖答案〗D〖祥解〗1、動物細胞培養過程:取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液中(原代培養)→放入二氧化碳培養箱培養→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養液(傳代培養)→放入二氧化碳培養箱培養。2、動物細胞培養是動物細胞工程技術的基礎。3、動物細胞培養的原理是細胞增殖。【詳析】A、無論是原代培養還是單克隆培養，用到的主要細胞工程技術是動物細胞培養，A正確；B、動物細胞之間的蛋白質，被胰蛋白酶或膠原蛋白酶分解，分散成單個細胞，B正確；C、結合題干，基因型為XFXS女性體細胞中的兩個X色體會有一個隨機失活，故一個細胞中6-磷酸葡萄糖脫氫酶，電泳后只顯示一個條帶，原代培養的細胞電泳有2個條帶，故同時檢測了多個細胞，C正確；D、單克隆培養的細胞，是通過有絲分裂得到的增殖的細胞，故單克隆培養的細胞1、2、4、5、8、9與3、6、7，所含基因相同，表達的基因不相同，D錯誤。故選D。11.基因工程中需使用多種工具酶，幾種限制酶的切割位點如圖所示。下列說法正確的是（）A.限制酶Smal和EcoRV切割形成的末端，可以通過E.coliDNA連接酶相互連接B.DNA連接酶、DNA聚合酶和RNA聚合酶均可催化磷酸二酯鍵的形成C.限制酶EcoRI進行一次切割，會切斷2個磷酸二酯鍵，形成1個游離的5’末端D.若兩種限制酶的識別序列相同，則形成的末端一定能通過DNA連接酶相互連接〖答案〗B〖祥解〗1、限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。2、DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。【詳析】A、限制酶EcoRI和PstI切割形成的是黏性末端，限制酶SmaI和EcoRV切割形成的是平末端，E.coliDNA連接酶只能連接黏性末端，而T4-DNA連接酶可連接黏性末端和平末端，但連接效率較低，A錯誤；B、DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵；DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯鍵；RNA聚合酶將單個核糖核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯鍵，B正確；C、一個限制酶切割一次，使DNA雙鏈斷開，會有兩個磷酸二酯鍵斷裂，形成2個黏性末端或平末端，形成2個游離的5’末端，C錯誤；D、若兩種限制酶的識別序列相同，但由于識別的位點不同，切割形成的末端不同，故不一定能通過DNA連接酶相互連接，D錯誤。故選B。12.不對稱PCR的基本原理是采用不等量的引物，產生大量的單鏈目標DNA。這兩種引物分別稱為限制性引物與非限制性引物；其最佳比例一般為1：50~1：100。在PCR反應的早期循環（約20次）中，擴增產物主要是雙鏈DNA，當后期數量較少的限制性引物耗盡后，數量較多的非限制性引物將引導合成大量目標DNA，過程如圖所示。下列相關敘述錯誤的是（）A.PCR反應緩沖液中一般需添加Mg2+，以激活DNA聚合酶B.復性時引物與模板鏈3'端的堿基序列通過互補配對結合C.PCR進行最初20次循環的目的是增加模板DNA的量D.不對稱PCR產生的大量單鏈DNA是由限制性引物延伸而來〖答案〗D〖祥解〗PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。【詳析】A、PCR反應緩沖液中一般要添加Mg2+，以激活耐高溫的DNA聚合酶，A正確；B、復性時引物會與模板鏈3'端的堿基序列互補配對，B正確；C、PCR進行最初20次循環的目的是增加模板DNA的量，C正確；D、不對稱PCR產生大量的單鏈DNA是由非限制性引物延伸而來，D錯誤。故選D。13.螢火蟲的熒光素酶能催化ATP激活的熒光素氧化發光，這一現象在生物檢測和成像方面有重要的應用價值。為了解決天然熒光素酶不能高效催化人工合成的熒光素DTZ發光的問題，研究人員采用蛋白質工程（又稱為第二代基因工程）對它進行了改造。下列關于蛋白質工程改造天然熒光素酶的敘述，正確的是（）A.通過化學誘變劑可定向改造天然熒光素酶的基因序列B.改造天然熒光素酶所用的基因表達載體不需要啟動子和終止子C.可用PCR方法檢測突變的熒光素酶基因是否翻譯成蛋白質D.改造后的熒光素酶在一定條件下催化DTZ發光是將化學能轉化為光能〖答案〗D〖祥解〗1、蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規律及其生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需求（基因工程在原則上只能生產自然界已存在的蛋白質）。2、蛋白質工程的基本途徑：從預期的蛋白質功能出發，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列（基因），以上是蛋白質工程特有的途徑；后續按照基因工程的一般步驟進行。【詳析】A、通過化學誘變劑可以讓天然熒光素酶的基因序列進行隨機突變，但化學誘變通常是不定向的，A錯誤；B、改造天然熒光素酶所用的基因表達載體必須包含啟動子和終止子，啟動子是驅動基因轉錄的元件，而終止子是指示轉錄終止的位置，B錯誤；C、PCR

方法主要用于檢測

DNA

的存在或者染色體

DNA

上是否插入目的基因，檢測目的基因是否翻譯為蛋白質的方法為抗原﹣抗體雜交，C錯誤；D、改造后的熒光素酶在一定條件下催化DTZ發光是將化學能轉化為光能，D正確。故選D。14.下列關于生物技術安全性與倫理問題的敘述，正確的是（）A.我國對農業轉基因生物實行標識制度，必須在標簽上警示性注明可能危害B.生殖性克隆人能豐富人類基因的多樣性，可在特定人群中進行相關實驗C.可通過基因編輯技術對基因進行敲除、插入等，來設計完美試管嬰兒D.針對轉基因技術的應用，我國的方針是研究上要大膽，推廣上要慎重〖答案〗D〖祥解〗1、轉基因技術給人類帶來了琳瑯滿目的產品，也引發了社會對轉基因產品安全性的關注和爭論。2、生殖性克隆是指通過克隆技術產生獨立生存的新個體，它面臨很多倫理問題。我國不贊成、不允許、不支持、不接.受任何生殖性克隆人實驗。3、生物武器的種類包括致病菌、病毒和生化毒劑等，它曾對人類造成嚴重的傷害。我國反對生物武器及其技術和設備的擴散。【詳析】A、我國對農業轉基因生物實行標識制度，要求對轉基因生物產品和加工品進行標識，維護了消費者對轉基因產品的知情權和選擇權，A錯誤；B、克隆為無性繁殖，可見生殖性克隆人不能豐富人類基因的多樣性，我國禁止生殖性克隆人實驗，B錯誤；C、利用基因編輯技術設計試管嬰兒，設計完美試管嬰兒，已經涉及到新生命的誕生，會造成生物技術安全與倫理問題，C錯誤；D、針對轉基因技術的應用，我國的方針是研究上要大膽，堅持自主創新；推廣上要慎重，做到確保安全，D正確。故選D。二、多項選擇題：本部分包括4題，每題3分，共計12分。每題有不止一個選項符合題意。每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯選或不答的得0分。15.小鼠胚胎干細胞經定向誘導可獲得多種功能細胞，制備流程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.為獲得更多囊胚，采用激素注射促進雄鼠產生更多的精子B.細胞a和細胞b內含有的核基因相同，但全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細胞D.胚胎干細胞和誘導出的各種細胞都需在CO2培養箱中進行培養〖答案〗BD〖祥解〗1、胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）；2、ES細胞在飼養層細胞上或在添加抑制因子的培養液中，能夠維持不分化的狀態；在培養液中加入分化誘導因子，如牛磺酸、丁酰環腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向不同類型的組織細胞分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段。【詳析】A、為了獲得更多的囊胚，可以采用激素注射促進成熟雌性個體超數排卵，然后將卵母細胞從母體內取出，在試管內與人工采集的獲能精子進行體外受精，培育成胚胎，A錯誤；B、細胞a和細胞b是由同一個受精卵經過有絲分裂形成的，故核基因相同，但全能性高低不同，B正確；C、運用細胞培養技術可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞，首先必須用胰蛋白酶處理內細胞團（細胞a處），分解細胞間的蛋白質等，使之分散成單個細胞，C錯誤；D、動物細胞培養時需要在5%CO2的培養箱中進行培養，以維持培養液的pH，D正確。故選BD。16.下表是培養某種微生物的培養基的成分列表，相關敘述正確的有（）成分含量成分含量葡萄糖10gK2HPO4·3H2O0.2gNaCl0.2gMgSO4·7H2O0.2gK2SO40.2gCaCO35g瓊脂20g蒸餾水約1000mLA.該培養基從化學成分上分類屬于合成培養基B.制備固體培養基時一般需要添加凝固劑C.該培養基可用于篩選固氮微生物D.在燒杯中配置培養基后應分裝到培養皿中進行高壓蒸汽滅菌〖答案〗ABC〖祥解〗1、微生物的營養物質主要包括碳源、氮源、水和無機鹽等。有些微生物還需要特殊的營養物質，如維生素、生長因子等。2、培養基中含有瓊脂的一般為固體培養基。3、選擇培養基是指允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基。【詳析】A、該培養基中成分和含量明確，合成培養基，A正確；B、固體培養基是在液體培養基中加入凝固劑后制成的，制備固體培養基時一般需要添加凝固劑，B正確；C、固氮微生物可利用空氣中的N2，該培養基沒加氮源，不能固氮的微生物不能在該培養基上生長，故該培養基可用于篩選固氮微生物，C正確；D、在燒杯中配置培養基后應分裝到錐形瓶中，加棉塞，包上牛皮紙并用橡皮扎緊，放入高壓蒸汽鍋中，之后冷卻至一定溫度再將培養基分裝到培養皿中，D錯誤。故選ABC。17.花椰菜（2n=18）易患黑腐病導致減產，黑芥（2n=16）則有較好的黑腐病抗性。科研人員基于下圖所示過程，培育出抗性花椰菜植株m、n和s，它們均含有花椰菜的全部染色體。下列敘述錯誤的有（）A.可用聚乙二醇誘導原生質體融合B.融合的原生質體中來自黑芥的染色體介于4-8之間C.植株m、n、s中的抗性基因來自黑芥D.植株n、s中來自黑芥的染色體構成一個染色體組〖答案〗BD〖祥解〗植物細胞壁的主要成分為纖維素和果膠酶，根據酶的專一性，為獲得原生質體時需用纖維素酶和果膠酶處理。【詳析】A、誘導原生質體融合的方法包括物理法和化學法，其中化學法可用聚乙二醇誘導原生質體融合，A正確；B、題意顯示，m、n和s均含有花椰菜的全部染色體，而花椰菜的染色體數是18，融合的原生質體經過組織培養得到的植株中的染色體數是20、25、26，所以融合的原生質體中來自黑芥的染色體條數分別為2、7、8，故介于2～8之間，B錯誤；C、題意顯示“黑芥（2n=16）有較好的黑腐病抗性，因而可知植株m、n、s中的抗性基因來自黑芥的染色體，C正確；D、一個染色體組指細胞中的一組非同源染色體，結合B選項的分析可知，植株n、s中來自黑芥的染色體條數分別為7、8，可知植株n、s中來自黑芥的染色體不一定構成一個染色體組，D錯誤。故選BD。18.基因工程在農牧業、醫藥衛生和食品工業等多方面的應用發展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（）A.若某基因是從人的細胞內提取mRNA經逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列B.擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3'-端進行子鏈合成C.導入人血清白蛋白基因綿羊受體細胞是乳腺細胞D.利用農桿菌轉化法可將含有目的基因的重組質粒整合到植物受體細胞的染色體DNA上〖答案〗BCD〖祥解〗將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法，農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可整合到受體細胞的染色體DNA上。基因表達載體常包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因。標記基因是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。【詳析】A、mRNA是由基因啟動子后面的序列編碼而來的，若某基因是從人的細胞內提取mRNA經逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列，A正確；B、擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'-端進行子鏈合成，B錯誤；C、導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞不是乳腺細胞，而是受精卵或早期胚胎細胞，C錯誤；D、農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據農桿菌的這一特點，將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上，將基因轉入動物細胞常用顯微注射法，D錯誤。故選BCD。三、非選擇題：本部分包括5題，共計60分。19.啤酒是以大麥芽、啤酒花、水為主要原料，經酵母發酵作用釀制而成的。啤酒在體內產生大量的熱量，被稱為“液體面包”。圖1是啤酒生產工藝流程簡圖。（1）圖中焙烤的目的是降低麥芽水分，并______，然后去根制成成品麥芽。將粉碎的麥芽等原料用溫水分別在糊化罐、糖化罐中混合，調節溫度以制造麥汁，加水糊化之前粉碎成品麥芽的目的是______。（2）發酵罐內的發酵是發酵工程的中心環節。麥汁冷卻后再加入啤酒酵母使其發酵，冷卻的目的是______。在發酵過程中，要隨時檢測培養液中的微生物數量、產物濃度等，以了解發酵進程；并及時添加必需的營養物質組分，其目的是______；還要嚴格控制______等發酵條件（至少寫出2個），以獲得所需的發酵產物。（3）圖2為大型發酵罐示意簡圖，酵母菌酒精發酵過程中要“先通氣后密封”，通過空氣入口______來控制溶解氧。（4）為提高菌株H對蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液體培養基中將蔗糖作為______，并不斷提高其濃度，經多次傳代培養（指培養一段時間后，將部分培養物轉入新配的培養基中繼續培養）以獲得目標菌株。培養過程中定期取樣并用______的方法進行菌落計數，評估菌株增殖狀況。此外，培育優良菌株的方法還有______等。（答出兩種育種方法）〖答案〗（1）①.加熱殺死大麥種子胚但不使淀粉酶失活②.破碎有利于淀粉酶與淀粉充分接觸（2）①.防止接種時酵母菌被殺死②.延長菌體生長穩定期的時間，以得到更多的發酵產物③.溫度、pH、溶解氧、通氣量與攪拌（3）⑤（4）①.唯一碳源②.稀釋涂布平板法③.誘變育種、基因工程育種〖祥解〗發酵罐內的發酵，是發酵工程的中心環節，環境條件不僅會影響微生物的生長繁殖，還會影響微生物代謝物的形成，因此在發酵過程中，要隨時監測培養液中微生物數量、產物濃度等以了解發酵進程，還要及時添加必需的營養組分，要嚴格控制溫度、pH和溶氧量等發酵條件。（1）圖中焙烤的目的是降低麥芽水分，并加熱殺死大麥種子胚但不使淀粉酶失活，然后去根制成品麥芽。將粉碎的麥芽等原料用溫水分別在糊化罐、糖化罐中混合，調節溫度以制造麥汁，而后加水糊化之前粉碎成品麥芽，這樣麥芽經過破碎有利于淀粉酶與淀粉充分接觸，進而促進淀粉的分解。（2）發酵罐內的發酵是發酵工程的中心環節。麥汁冷卻后再加入啤酒酵母使其發酵，這樣可以防止接種時酵母菌被殺死，保證后續發酵過程的正常進行。在發酵過程中，要隨時檢測培養液中的微生物數量、產物濃度等，以了解發酵進程；并及時添加必需的營養物質組分，這樣可以延長菌體生長穩定期的時間，以得到更多的發酵產物；還要嚴格控制溫度、pH、溶解氧、通氣量與攪拌等發酵條件，以保證獲得所需的發酵產物，因為發酵條件的改變會導致產生不同的發酵產物，進而可能不能達到相應的目的。（3）圖2為大型發酵罐示意簡圖，酵母菌酒精發酵過程中要“先通氣后密封”，通過空氣入口⑤來控制溶解氧，其中先通氣的目的是為了促進酵母菌大量繁殖，而后密封的目的是讓酵母菌發酵產生酒精。（4）為提高菌株H對蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液體培養基中將蔗糖作為唯一碳源，并不斷提高其濃度，經多次傳代培養，該方法是通過高濃度的蔗糖對耐高糖的菌種進行篩選，進而可以獲得目標菌株。培養過程中定期取樣并用稀釋涂布平板法進行菌落計數，評估菌株增殖狀況。此外，培育優良菌株的方法還有誘變育種、基因工程育種等，其中誘變育種的原理是基因突變，后者的原理是基因重組，該方法可以定向改造菌種。20.細胞工程是細胞生物學理論與現代工程技術相結合，綜合應用于農業、醫藥及食品等領域的科學技術。Ⅰ、在農業方面：甘蔗新臺糖22號（ROC22）具有高產高糖等優良特性但耐寒性差，桂糖28號（GT28）是耐寒品種，用ROC22和GT28進行體細胞融合，可望獲得耐寒性更強且農藝性狀優良的雜交后代。下圖為培育過程示意圖，請分析回答：Ⅱ、在醫藥食品方面：人參和西洋參含有的人參皂苷具有抗腫瘤等作用。科研人員選用人參和西洋參有性雜交獲得的雜種胚細胞以及人參種子胚、西洋參種子胚的愈傷組織進行懸浮細胞培養，建立其單細胞株系并對三者的部分特性進行比較研究，下圖1是主要流程：（1）運用體細胞融合技術培育出ROC22和GT28的雜交后代過程中，所運用的生物學原理有______。過程a所需的酶是______，細胞融合完成的標志是______。（2）過程①稱為______。過程④優化懸浮細胞培養體系，最重要的條件是蔗糖濃度的篩選，蔗糖濃度過低和過高均不利于懸浮細胞的培養，原因是______。（3）科研人員研究了三種愈傷組織中的人參皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，結果見下圖2，其中Re具有治療心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。雜種胚中的大多數種類的皂苷的含量均高于其他兩種，這體現了______。若要獲得具有抗癌作用的藥物應優先選擇______的愈傷組織。（4）科研人員繼續研究了Rg3和常見的化療藥物5-FU對腫瘤的抑制效果：①首先培養胃癌細胞，培養液中加入胎牛血清的目的是______。培養條件為：5%CO2，作用是______、飽和濕度，溫度為37℃。將準備好的胃癌細胞懸濁液皮下接種于小鼠裸鼠，每只裸鼠接種0.1mL細胞懸濁液。接種后2周可見背部長出腫塊，證明接種成功。②將上述40只裸鼠隨機分為四組，生理鹽水組對照組、5-FU組、Rg3組和5-FU+Rg3組（聯合給藥組）。各組均采用腹腔注射給藥，給藥前測定腫瘤的體積，給藥后每2日測量1次腫瘤體積。根據實驗結果可以得出的結論有______。〖答案〗（1）①.細胞膜的流動性和植物細胞的全能性②.纖維素酶和果膠酶③.雜種細胞再生出細胞壁（2）①.脫分化②.蔗糖濃度過低不能給細胞提供足夠的碳源和能源，過高會造成滲透壓過高細胞失水死亡（3）①.雜種優勢②.人參（4）①.補充未知的營養物質②.維持培養液的pH③.5-FU和Rg3均能抑制腫瘤生長，5-FU和Rg3聯合給藥效果更好〖祥解〗植物的組織培養指的是在無菌的條件下，將植物的莖尖、莖段或是葉片等切成小塊，培養在特制的培養基上，通過細胞的增殖和分化，使它逐漸發育成完整的植物體。（1）運用體細胞融合技術培育出ROC22和GT28的雜交后代過程中，運用了植物體細胞雜交技術，該過程所運用的生物學原理有細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。圖中過程a所需的酶是纖維素酶和果膠酶，因為植物細胞壁的成分是纖維素和果膠，雜種細胞再生出細胞壁是細胞融合完成的標志，而后對雜種細胞進行植物組織培養獲得雜種植株。（2）過程①稱為脫分化過程，其實質是使細胞失去原有的結構和功能的過程。過程④優化懸浮細胞培養體系，最重要的條件是蔗糖濃度的篩選，蔗糖濃度過低和過高均不利于懸浮細胞的培養，這是因為蔗糖濃度過低不能給細胞提供足夠的碳源和能源，過高會造成滲透壓過高細胞失水死亡，因而可通過實驗確定細胞懸浮培養所需要的適宜濃度。（3）科研人員研究了三種愈傷組織中的人參皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，結果見下圖2，其中Re具有治療心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。雜種胚中的大多數種類的皂苷的含量均高于其他兩種，這體現了雜種優勢。圖中結果顯示，Rg3具有抗癌作用，因此，若要獲得具有抗癌作用的藥物應優先選擇人參（種子胚）的愈傷組織。（4）①首先培養胃癌細胞，培養液中加入胎牛血清的目的是補充未知的營養物質。培養的氣體條件為5%CO2，其作用是維持培養液的pH、飽和濕度，培養溫度為37℃。將準備好的胃癌細胞懸濁液皮下接種于小鼠裸鼠，每只裸鼠接種0.1mL細胞懸濁液。接種后2周可見背部長出腫塊，證明接種成功。②將上述40只裸鼠隨機分為四組，生理鹽水組對照組、5-FU組、Rg3組和5-FU+Rg3組（聯合給藥組）。各組均采用腹腔注射給藥，給藥前測定腫瘤的體積，給藥后每2日測量1次腫瘤體積。根據圖3計算腫瘤體積變化的公式：給藥后腫瘤體積/給藥前腫瘤的體積。實驗結果顯示，三種處理方式均會使腫瘤體積變小，且共同使用的效果更好，因而可以得出的結論有5-FU和Rg3均能抑制腫瘤生長，5-FU和Rg3聯合給藥效果更好。21.雙特異性單克隆抗體是指可同時與癌細胞和藥物結合的特異性抗體。下圖是科研人員通過雜交瘤細胞技術（免疫的B細胞和骨髓瘤細胞雜交技術）生產能同時識別癌胚抗原和長春堿（一種抗癌藥物）的雙特異性單克隆抗體的部分過程。回答下列問題：（1）過程①處理后______（填“需要”或“不需要”）對小鼠進行抗體檢測，理由是______。（2）過程②與植物體細胞雜交技術相比，誘導骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合特有的方法是______。其作用機理是______。（3）過程③得到的雜交瘤細胞的特征是______。（4）過程④一般在多孔細胞培養板上進行：先將細胞懸浮液稀釋到7~10個細胞/mL，再在每個培養孔中滴入0.1mL細胞稀釋液，其目的是______。（5）請簡述圖中過程⑤的操作目的是獲取能產生______的單克隆雜交-雜交瘤細胞。制備單克隆抗體依賴的生物技術有______（答出2點）。（6）雙特異性單克隆抗體在癌癥的治療方面有多種應用，還可生產______的雙特異性單克隆抗體，以增強殺傷癌細胞的作用，使癌細胞裂解死亡。〖答案〗（1）①.需要②.確保小鼠已產生分泌識別癌胚抗原（相應）抗體的漿細胞（2）①.滅活病毒誘導法②.細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布（3）既能迅速大量繁殖，又能產生（特異性）抗體（4）使每個培養孔盡量只接種一個雜交瘤細胞（5）①.所需雙特異性單克隆抗體②.動物細胞培養、動物細胞融合（6）既能招募（聚集）更多細胞毒性T細胞又可特異性結合癌細胞表面癌胚抗原〖祥解〗單克隆抗體制備流程：（1）對小鼠注射特定的抗原使小鼠產生免疫反應；（2）從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；（3）將小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，再用特定的選擇培養基進行篩選；（4）在該培養基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜種細胞才能生長；（5）對上述雜交瘤細胞還需進行克隆化培養和抗體檢測，經多次篩選就可獲得足量的能分泌所需抗體的細胞；（6）最后，將雜交瘤細胞在體外條件下做大規模培養，或注射到小鼠腹腔內增殖。這樣從細胞培養液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體。（1）分析題圖可知，過程①是給小鼠注射癌胚抗原，其目的是使小鼠產生能分泌識別癌胚抗原抗體的漿細胞，處理后需要對小鼠進行抗體檢測，因為抗體和抗原的結合具有特異性，故可以通過抗體檢測確保小鼠已產生分泌識別癌胚抗原（相應）抗體的漿細胞（B淋巴細胞）；（2）過程②與植物體細胞雜交技術相比，誘導骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合特有的方法是用滅活的病毒來誘導融合，作用機理為使細胞互相凝集，細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發生融合；（3）分析題圖可知，過程③使用HAT培養基為選擇性培養基，通過篩選，只有雜交瘤細胞可以在此培養基生長，其他細胞如B淋巴細胞和骨髓瘤細胞均不能在HAT培養基上生長。故過程③得到的雜交瘤細胞的特征是既能迅速大量繁殖，又能產生抗體；單克隆抗體本質是蛋白質，在細胞內的合成和加工過程體現了細胞器之間的協調配合；（4）過程④一般在多孔細胞培養板上對過程③獲得的雜交瘤細胞進行篩選和培養，可以獲得產生單克隆抗體的細胞，在此過程中需要保證使每個培養孔盡量只接種一個雜交瘤細胞；（5）過程⑤的操作目的是獲取能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的單克隆雜交-雜交瘤細胞，制備單克隆抗體依賴的生物技術有動物細胞培養、動物細胞融合等；（6）雙特異性單克隆抗體在癌癥的治療方面有多種應用，可以生產能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體，也可以生產既能招募細胞毒性T細胞又可特異性結合癌細胞表面癌胚抗原的雙特異性單克隆抗體，以增強殺傷癌細胞的作用。22.我國中科院的研究團隊利用細胞工程和基因編輯技術，成功培育出世界上首例只有雙母親來源的孤雌小鼠和雙父親來源的孤雄小鼠，實現了哺乳動物的同性繁殖。實驗流程如下圖所示，請分析回答：（1）體外培養動物細胞時，首先應保證其處于______的環境，除了適宜的營養物質、溫度等條件外，還需要控制的氣體條件是______。（2）用促性腺激素對雌性小鼠進行______處理可得到大量卵母細胞。（3）要培育孤雄小鼠需要將精子和具卵細胞細胞核特點的ahESC同時注入去核的卵母細胞形成重構胚，此卵母細胞應在體外培養到______期，得到的重構胚通常需要發育到______階段才能進行胚胎移植。可利用______的方法對乙進行處理得到了多只孤雄小鼠。（4）ahESC與精子和去核卵母細胞融合后，得到的融合細胞的性染色體組成可能是______。（5）據圖分析只依賴雄性小鼠______（填“能”或“不能”）得到孤雄小鼠，請寫出兩個理由支持你的判斷。理由1：______；理由2：______。〖答案〗（1）①.無菌無毒②.95%的空氣和5%的CO2（2）超數排卵（3）①.MⅡ②.囊胚或桑葚胚③.胚胎分割（4）XX、XY、YY（5）①.不能②.理由1：需要將ahESC和另一個精子一起注入到一個去核卵細胞中③.理由2：重構胚必須移植到雌性小鼠的體內才能發育為個體〖祥解〗1、卵細胞激活轉化成phFSC，通過基因編輯技術獲得具精子細胞核特點的phESC，獲得甲，從而得到孤雌小鼠。2、精子激活轉化成ahFSC，通過基因編輯技術獲得具卵細胞細胞核特點的ahESC，獲得乙，從而得到孤雄小鼠。（1）體外培養動物細胞時，由于培養液中含有豐富的營養，因此，為了避免雜菌污染，首先應保證其處于無菌