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文檔簡介

《臨床檢驗基礎》學習

指南

荷澤醫學專科學校臨床檢驗教研室編

荷澤醫學專科學校《臨床檢驗基礎》學習指南

一.血液生理概要

1.血液的組成

血液由血細胞(紅細胞、白細胞、血小板)和血漿組成。離體后血液自然凝固,分

離的淡黃色透明液體稱為血清。血液加抗凝劑后分離出來的淡黃色液體稱為血漿。血清

與血漿差別是:血清缺少某些凝血因子。

全血適用于臨床血液學檢查,如血細胞計數、分類和形態學檢查等。血漿除鈣離子

外,含有其他全部凝血因子,也適用于血栓與止血的檢查。血清適用于臨床化學和臨床

免疫學檢查。

2.血液的生理功能

(1)運輸功能(2)協調功能(3)維護機體內環境穩定(4)防御功能

二.米血方法:有靜脈米血法、皮膚米血法、真空米血法(負壓米血法)。真空米血

能有效保護血液有形成分,減少了溶血現象,使檢驗結果更可靠,有利于樣本收集運送

和保存,防止院內血源性傳染病。

—.血液涂片制備

1.手工推片法一張良好的血片,應厚薄適宜、頭體尾明顯、細胞分布均勻、血膜

邊緣整齊、并留有一定空隙。

2.載玻片壓拉法適用于血細胞活體染色。

3.棕黃層涂片法適用于白細胞減低患者的白細胞分類計數、紅斑狼瘡細胞檢查等

0

三.細胞染色

1.瑞氏染色法

(1)瑞氏染料由酸性染料伊紅(E)和堿性染料亞甲藍(M)組成,將適量伊紅、亞甲

藍(又名美藍)溶解在甲醇中,即為瑞氏染料。甲醇的作用:一是溶解伊紅和美藍;二

是固定細胞形態。

(2)染色原理既有物理的吸附作用,又有化學的親和作用。

(3)pH值的影響細胞各種成分均屬蛋白質,在偏酸性環境中正電荷增多易與伊紅結合

,染色偏紅,在偏堿性環境中負電荷增多,易與美藍結合,染色偏藍。

(4)注意事項血涂片干透后固定,再染色。沖洗時不能先倒掉染液,防止染料沉著在

血涂片上。沖洗時間不能過久,以防脫色。染色過淡可以復染,復染時應先加緩沖液,

然后加染液。

四.質量控制

制備涂片時,血滴越大、角度越大、推片速度越快,血膜越厚,反之則越薄。血細

胞染色時染色過深,過淺與血涂片中細胞數量、血膜厚度、染色時間、pH值、染液濃度

密切相關。染色過淺糾正方法是延長染色時間,調節pH值,染色過深糾正方法是縮短染

色時間、稀釋染液、調節pH值。

一、紅細胞計數

(一)參考值

1.成年男性(4?5.5)X1012/L;成年女性(3.5?5.0)X1012/L;新生兒(6.0?7.0

)X10l2/Lo

(二)臨床意義

1.紅細胞和血紅蛋白量減少

(1)急性、慢性紅細胞丟失過多:常見于各種原因出血。

(2)紅細胞破壞過多:各種原因溶血,如溶貧、遺傳性球形紅細胞增多癥、陣發性

睡眠性血紅蛋白尿等。

(3)造血原料不足:鐵缺乏或鐵失利用,如缺鐵性貧血、鐵粒幼細胞性貧血等。

(4)骨髓造血功能減退:如再生障礙性貧血、慢性系統性疾病伴發的貧血等。

2.紅細胞增多

(1)原發性紅細胞增多:如真性紅細胞增多癥,是一種原因不明紅系細胞增殖性疾

病,紅細胞計數在(7-10)X107L.

(2)繼發性紅細胞增多癥:是非造血系統疾病,發病的主要環節是血中促紅細胞生

成素增多。如各種先天性心血管疾病、肺部疾病等。

(3)相對性紅細胞增多癥:是因血漿容量減少,使紅細胞容量相對增加。如嚴重腹

瀉、嘔吐、多汗、大面積燒傷等。

(三)操作方法

1.紅血細胞計數操作和注意事項

(1)計數灌板(改良牛鮑計數板)后計數中央大方格內四角和正中5個中方格內

的紅細胞數。對壓線細胞采用數左不數右、數上不數下的原則。

(2)白細胞影響:白細胞過高者(WB0100X107L),紅細胞計數結果應進行校正。

應將患者的紅細胞數減去白細胞數,或直接在高倍鏡下計數紅細胞數。

二、血紅蛋白測定

測定方法很多,目前常用的方法是氟化高鐵血紅蛋白測定法和十二烷基硫酸鈉血紅

蛋白測定法。以氟化高鐵血紅蛋白(HiCN)測定法為例。

(一)檢測原理

血液中除硫化血紅蛋白(SHb)外的各種Hb均可被高鐵氧化鉀氧化為高鐵血紅蛋白

,再和CN結合生成穩定的氟化高鐵血紅蛋白(HiCN),后者在540nm處有一吸收峰,用

分光光度計直接測定或通過制備的標準曲線查得血紅蛋白濃度。

(二)參考值

成年:男性120?160g/L;女性110?150g/Lo新生兒170?200g/Lo

(五)臨床意義

1.生理性增多新生兒和高原地區居住者。上午7時Hb達高峰,隨后下降。

2.病理性變化

(1)某些疾病,血紅蛋白和紅細胞濃度不一定能正確反映全身紅細胞的總容量。

(2)發生大細胞性貧血或小細胞低色素性貧血時,紅細胞計數與血紅蛋白濃度不成

比例。

三、紅細胞形態檢查

(一)質量控制

1.選擇細胞分布均勻的區域。

2.注意檢查順序的完整性。

(二)參考值

瑞氏染色血涂片成熟紅細胞形態為雙凹圓盤形、細胞大小一致、平均直徑7.2pm(

范圍6?9.5um)、淡粉紅色、中央1/3為生理性淡染區、胞質內無異常結構。

(三)臨床意義

1.紅細胞大小改變

(1)小紅細胞:直徑〈6pm的紅細胞。小紅細胞生理性淡染區擴大,見于缺鐵性貧血

、珠蛋白生成障礙性貧血;生理性淡染區消失,見于遺傳性球形紅細胞增多癥。

(2)大紅細胞:直徑>10Um的紅細胞。見于溶血性貧血、巨幼細胞性貧血、惡性貧

血等。

(3)巨紅細胞:直徑>15um的紅細胞。見于巨幼細胞性貧血。

(4)紅細胞大小不均:見于缺鐵性貧血、巨幼細胞性貧血等,后者特別明顯。

2.紅細胞內血紅蛋白含量改變

(1)正常色素性:見于正常人、急性失血、再生障礙性貧血和白血病等。

(2)低色素性:見于缺鐵性貧血、鐵粒幼細胞性貧血、某些血紅蛋白病等。

(3)高色素性:見于巨幼細胞性貧血。

(4)多色性:屬于尚未完全成熟的紅細胞,見于正常人(占1%),骨髓造紅細胞功能

活躍(如溶血性或急性失血性貧血)。

(5)細胞著色不一:又稱雙形性貧血,見于鐵粒幼紅細胞性貧血。

3.紅細胞形狀改變

(1)球形紅細胞:見于遺傳性和獲得性球形細胞增多癥和小兒。

(2)橢圓形紅細胞:見于遺傳性橢圓形細胞增多癥、大細胞性貧血、巨幼細胞性貧

血等。

(3)靶形紅細胞:見于各種低色素性貧血、脾切除后或肝臟疾病等。

(4)口形紅細胞:見于小兒消化系統疾患引起的貧血、某些溶血性貧血及肝病患者

O

(5)鐮形紅細胞:見于鐮狀細胞貧血(HbS-S,HbS-C)、鐮狀細胞特性樣本(HbA-S

)O

(6)棘形紅細胞:見于棘紅細胞增多癥、脾切除后、酒精中毒性肝病、尿毒癥。

(7)裂紅細胞:見于彌漫性血管內凝血、微血管病性溶血性貧血、巨幼細胞性貧血

、嚴重燒傷等。

(8)緡線狀紅細胞:因為血漿中某些蛋白(纖維蛋白原、球蛋白)增高,使紅細胞

正負電荷發生改變所致。

(9)有核紅細胞(幼稚紅細胞):①溶血性貧血②造血系統惡性疾患或骨髓轉移性

腫瘤③慢性骨髓增生性疾病④脾切除后

(10)其他:①新月形紅細胞:見于某些溶血性貧血。②淚滴形紅細胞:見于貧血、

骨髓纖維化和正常人。③紅細胞形態不整:見于某些感染、嚴重貧血、巨幼細胞性貧血

O

4.紅細胞內出現異常結構

(1)嗜堿性點彩紅細胞:見于鉛中毒,貧血時見到點彩紅細胞多表明骨髓增生旺盛

或有紊亂現象。

(2)豪-喬小體(染色質小體,Howell-Jolly,sbody)見于脾切除后、脾功能低下

、紅白血病、某些貧血等。

(3)卡波環:見于巨幼細胞性貧血、白血病、鉛中毒、脾切除后等。

(4)寄生蟲:紅細胞胞質內可見瘧原蟲、微絲蝌、杜利什曼原蟲等病原體。

四、血細胞比容測定

(一)檢測原理

血細胞比容(HCT、Het、Ht或PCT)是指在一定條件下,經離心沉淀壓緊的紅細胞

在全血樣本中所占比值。

(二)質量控制

1.手工法當紅細胞增多時,Het明顯增高,血漿殘留量也會增加。

2.血液分析儀法要注意Het是否與RBC、MCV有關。

(三)參考值

溫氏法:男性0.40?0.50;女性0.37?0.47。

微量法:男性0.47±0.04;女性0.42±0.05

(四)臨床意義

1.增高見于各種原因引起的血液濃縮,如大手術后、腹瀉、失血、真性紅細胞增

多癥等

2.降低見于各種貧血,Het減少程度與RBC計數值不完全一致。

3.輸液評估有助于控制補液量和了解體液平衡情況。

4.計算平均值是紅細胞平均體積、紅細胞平均血紅蛋白濃度計算的基礎數據。也

是影響全血粘度的決定因素之一。

五、紅細胞平均指數

(一)檢測原理

1.手工法通過紅細胞計數、血紅蛋白量和血細胞比容值計算紅細胞平均指數。

2.血液分析儀能直接導出MCV值,再結合直接測定的RBC和Hb,計算出MCH(=Hb/RBC)

和MCHC(=MCHXMCV).

(二)質量控制

1.手工法RBC計數、Hb、Het測定數據必須準確可靠。

2.血液分析儀法用XB分析法或浮動均值法對血液分析儀進行質量控制。

(三)參考值見表

不同人群紅細胞指數的參考范圍

MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/L)

新生兒91?11229?36280?360

1?2歲70?8422?30320~380

成人80?10027?34320?360

老年人81-10327?35310—360

(四)臨床意義

紅細胞平均指數僅代表紅細胞平均值,有一定局限性。必須作血涂片檢查才能較為

準確地診斷。

六、紅細胞體積發布寬度(RDW)

(-)檢測原理

RDW反映樣本中紅細胞體積大小的異質程度,即反映紅細胞大小不等的客觀指標,常

用變異系數(CV)表示。

(二)臨床意義

1.貧血形態學分類MCV和RDW聯合檢測有助于對貧血形態學鑒別診斷。

2.作為缺鐵性貧血(IDA)篩選診斷和療效觀察的指標當鐵劑治療有效時,RDW開

始增大,隨后逐漸降至正常。

3.鑒別缺鐵性貧血和珠蛋白生成障礙性貧血

七、網織紅細胞計數(Ret)

(一)檢測原理

網織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞,其胞質內殘存嗜堿性物質RNA,經煌焦油藍或

新亞甲藍活體染色后,呈淺藍或深藍色的顆粒狀或網狀結構。

(二)質量控制

1.顯微鏡法影響因素較多,Miller窺盤法計數網織紅細胞可減少誤差。

2.儀器法Howell-Jolly小體、有核紅細胞、巨大血小板可使結果假性增高。

(三)參考值

顯微鏡計數法:成人0.008?0.02或(25?75)X109/L,新生兒0.02?0.06。儀器法:

RMI(網織紅細胞成熟指數):男性為9.1%?32.2%,女性為12.8%?33.7%。

(四)臨床意義

1.判斷骨髓紅細胞造血情況

(1)增多見于①溶血性貧血;②放療、化療后;③紅系無效造血。

(2)減少見于再生障礙性貧血、溶血性貧血再障危象。

2.觀察貧血療效貧血患者在抗貧血治療后,Ret開始升高,1周左右達高峰,2周

左右Ret逐漸下降,表明治療有效。

3.骨髓移植后監測骨髓移植后21天,如Ret大于15X107L,表示無移植并發癥

;小于15X107L,可能為骨髓移植失敗。

4.網織紅細胞生成指數(RPI)是網織紅細胞生成相當于正常人的倍數。在估計紅

細胞生成有效性方面,使用RPI較準確。

八、點彩紅細胞計數

(一)質量控制須選擇紅細胞分布均勻的區域。

(二)參考值<0.03%。

(三)臨床意義

增高見于1.中毒2.各類貧血。

九、紅細胞沉降率測定

(一)檢測原理

紅細胞沉降率(ESR)指離體抗凝血靜置后,紅細胞在單位時間內沉降的速度,分為

三期:①緡錢狀紅細胞形成期;②快速沉降期;③細胞堆積期。

(二)質量控制

影響紅細胞緡錢狀形成的主要因素有:

1.血漿蛋白質比例大分子蛋白如急性反應蛋白、免疫球蛋白、膽固醇、甘油三酯

等使血沉加快,小分子蛋白使血沉減慢。

2.紅細胞數量和形狀

(1)紅細胞數量:通常紅細胞數量減少,引起血沉加快。數量增多使血沉減慢,但

數量太少,會影響紅細胞緡錢狀形成,導致血沉也減慢。

(2)紅細胞直徑:直徑越大血沉越快,但球形紅細胞、鐮形紅細胞不易聚集而使血

沉減慢。

3.血沉管血沉管傾斜,會加速紅細胞沉降。

4.血樣本抗凝劑濃度增加、血液凝固使血沉減慢。

5.溫度室溫過高(>25℃)使血沉加快,室溫過低(<18℃)使血沉減慢。

(三)參考值男性:<15mm/h;女性:<20mm/h

(四)臨床意義

1.病理性增快

(1)各種炎癥(2)組織損傷及壞死(3)惡性腫瘤(4)高球蛋白血癥(5)貧血(6)

高膽固醇血癥

2.血沉減慢紅細胞增多癥、DIC消耗性低凝血期、肝病、腫瘤、其他嚴重疾病因未

產生急性反應蛋白等使血沉減慢。

一、白細胞計數

(一)檢測原理

白細胞計數是測定單位體積血液中各種白細胞總數。包括顯微鏡計數法和血液分析

儀計數法。

(二)質量控制

計數誤差:

1.技術誤差:通過熟練操作、儀器校準而減小,甚至避免。

2.固有誤差:是計數池內血細胞分布不均所致誤差,計數量越大,誤差越小。

3.有核紅細胞:若出現大量有核紅細胞,白細胞計數結果應進行校正。

(三)參考值

99

成人:(4-10)X107L;新生兒:(15?20)X10/L;兒童:(5?12)X10/Lo

二、白細胞分類計數

臨床意義

(一)中性粒細胞

1.中性粒細胞增多

(1)急性感染或炎癥:增高程度與病原體種類、感染程度及部位、機體反應性有關

O

(2)廣泛組織損傷或壞死

(3)急性溶血和急性失血:WBC增高可作為早期診斷內出血的指標之一。

(4)急性中毒

(5)惡性腫瘤

(6)白血病和骨髓增殖性疾病

(7)應用某些化學藥物或激素類藥物等

2.中性粒細胞減低

(1)某些感染:如傷寒、副傷寒、流感等

(2)血液病:如典型的再生障礙性貧血、少數急性白血病。

(3)慢性理化損傷:如電離輻射、長期服用氯霉素等。

(4)自身免疫性疾病:如系統性紅斑狼瘡。

(5)脾功能亢進

3.中性粒細胞核象變化:正常時,桿狀核與分葉核比值為1:13。

(1)核左移:外周血中桿狀核粒細胞增多或(和)出現晚幼粒、中幼粒、早幼粒等

細胞時成為核左移。常見于急性感染、急性中毒、急性溶血、急性失血等。

(2)核右移:中性粒細胞核分葉5葉以上者超過3%成為核右移。見于巨幼細胞性貧

血、應用抗代謝藥物、炎癥恢復期。在疾病的進行期,突然出現核右移,表示預后不良

O

(二)淋巴細胞

淋巴細胞病理性增多見于急性傳染病、某些慢性感染、腎移植術后、白血病、再生

障礙性貧血、粒細胞缺乏癥。

(三)嗜酸性粒細胞

I.增多

(1)寄生蟲病;(2)變態反應性疾病;(3)皮膚病;(4)血液病;(5)某些惡性腫

瘤(6)某些傳染病;(7)高嗜酸性粒細胞綜合征等。

2.減低

見于長期應用腎上腺皮質激素、某些急性傳染病,如傷寒極期。

三、白細胞形態檢查

異常白細胞形態臨床意義

(一)中性粒細胞

1.毒性變化:中性粒細胞可出現大小不均、中毒顆粒、空泡、Dohle體、退行

性變。

2.巨多分葉核中性粒細胞:見于巨幼細胞貧血、抗代謝藥物治療后。

3.棒狀小體:見于急性白血病,而急性淋巴細胞性白血病不出現棒狀小體。

4.Pelger-Huet畸形:為常染色體顯性遺傳性異常。

5.ChediakTligashi畸形:見于Chediak-Higashi綜合征,為常染色體隱性遺

傳。

6.Alder-Reilly畸形:見于脂肪軟骨營養不良、遺傳性粘多糖代謝障礙。

7.May-Hegglin畸形:見于嚴重感染。

(二)淋巴細胞

1.異型淋巴細胞:分為3型:

I型(空泡型,漿細胞型):

n型(不規則型,單核細胞型)

in型(幼稚型)

2.放射線損傷后淋巴細胞形態變化:核固縮、核破碎、雙核、衛星核淋巴細

胞。

3.淋巴細胞性白血病時形態學變化:會出現各階段原幼細胞。

模擬題

白細胞直方圖變化的部分原因

白細胞直方圖變化主要原因

淋巴細胞峰左側異有核紅細胞、血小板聚集、異淋、瘧原蟲、脂

常類顆粒等

淋巴細胞峰右移,與淋巴細胞性白血病、異型淋巴細胞

單個核細胞峰左側

相連并抬高

單個核細胞峰抬高原始或幼稚細胞、漿細胞、嗜酸性粒細胞增多、

增寬嗜堿性粒細胞增多、單核細胞增多

單個核細胞峰與中未成熟中性粒細胞、異常細胞亞群、嗜酸性粒

性粒細胞峰之間異細胞增多

中性粒細胞峰右移、中性粒細胞絕對值增多

抬高、增寬

直方圖多區出現異以上多種原因引起

MPV和PLT的臨床意義

MPVPLT常見病因和疾病

tt缺鐵貧、珠蛋白生成障礙性貧血、脾切除后

tI慢性ITP、甲亢、妊高征

It反應性PLT增多癥

II慢性腎衰、巨幼貧、艾滋病、未治療急性白血病

I正常骨髓功能低下的疾病(如再障)

貧血分類RDW正常RDW輕度增高RDW明顯增高

小細胞性貧輕型地中海貧血缺鐵性貧血鐵粒幼細胞性貧

血血

大細胞性貧溶貧、再障、巨幼貧巨幼貧巨幼貧治療初期

正細胞性貧慢性貧血、骨髓纖維化、骨髓纖維化、Hb早期或混合性營

血急性失血異常養不良

一、檢測原理

(一)電阻抗法血液分析儀檢測原理

接通電源后,稀釋細胞懸液通過傳感器時,引起瞬間電壓變化形成脈沖信號,脈沖

振幅越高,細胞體積越大,脈沖數量越多,細胞數量越多,由此得出血液中血細胞數量

和體積值。根據不同體積的白細胞通過傳感器時,脈沖大小不同,將白細胞分成三群,

即小細胞群(淋巴細胞為主),中間細胞群(包括單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細

胞、幼稚細胞及原始細胞等)和大細胞群(中性粒細胞為主),儀器根據各群占總體的比

例,計算出各亞群細胞的百分率和絕對值,顯示白細胞體積分布直方圖。稀釋血液加入

溶血劑后,紅細胞釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶血劑中的某些成分結合形成血紅蛋白

衍生物,在特定波長下比色,換算出血紅蛋白濃度。

(二)光散射法血液分析儀檢測原理

1.光散射法白細胞計數和分類計數原理

(1)激光與細胞化學法:根據各類細胞的過氧化物酶活性不同,將血液經過氧化物

酶染色后,用光散射法測量白細胞的酶反應強度和體積大小,測量數據經計算機處理后

得出白細胞總數和分類值。

(2)容量、電導、光散射(VCS)法:血液經特殊溶血劑處理后,白細胞仍保持與體

內形態相同的自然狀態,使白細胞單個通過檢測器,接受容量、電導、光散射三種技術

的同時檢測,檢測的數據經計算機處理后得出各種白細胞分類結果。

(3)電阻抗與射頻法:用各自專一的溶血劑將非己細胞溶解后,利用電阻抗法計數

嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞。采用電阻抗法和射頻法計數淋巴細胞、單核細胞、及粒

細胞。根據幼稚細胞膜上脂質較成熟細胞少的特性檢測幼稚細胞。

(4)多角度偏振光散射法:當激光束照射到單個細胞時,從4個角度測定散射光密

度,從而將嗜酸性粒細胞和其他細胞區分出來。

2.光散射法檢測紅細胞和血小板

3.網織紅細胞計數原理

(1)利用新亞甲藍使網織紅細胞RNA著色,然后采用VCS原理,得出網織紅細胞和

相關參數。

(2)利用某些熒光染料與網織紅細胞內的RNA結合,以激光束照射網織紅細胞,形

成二維顯示散點圖,得出網織紅細胞和相關參數。

(二)紅細胞直方圖

正常紅細胞直方圖,在36?360fl范圍內分布兩個群體,從50?125fl區域為正常大小

的紅細胞,從125?200fl區域為大紅細胞、網織紅細胞。

(三)血小板直方圖

正常血小板直方圖,在2?30fl范圍內分布,呈左偏態分布。

止凝血篩檢試驗臨床應用

㈠常用止凝血篩檢試驗PT、APTT和PLT結果的組合分析

1.PT延長、APTT正常、PLT正常①常見疾病:獲得性FVD缺乏(早

期肝病、維生素K缺乏、口服華發林)。②罕見疾病:FVD抑制物、

異常纖維蛋白原血癥、某些DIC、遺傳性FVD缺乏、某些FX變異

體。

2.PT正常、APTT延長、PLT正常①常見疾病:FVD、FIX、FXI缺乏

或抑制物VWD,肝素治療。②狼瘡抗凝物、某些FX變異體。

3.PT延長、APTT延長、PLT正常①常見疾病:維生素K缺乏、肝

病、使用華發林或肝素治療。②罕見疾病:FV、FX、FII、FI

缺乏或抑制物、低FH血癥、狼瘡抑制物;DIC、異常纖維蛋白原

血癥、原發性纖溶。

4.PT延長、APTT延長、PLT減低①常見疾病:DIC、肝病。②罕

見疾病:與血小板減低相關的肝素治療。

5.PT正常、APTT正常、PLT減低①常見疾病:血小板破壞增高性

疾病、血小板生成減低性疾病、脾功能亢進、血液稀釋。②罕見

疾病:某些遺傳性血小板病(如巨血小板癥、Aldrich綜合征)、

骨髓增生性疾病。

6.PT正常、APTT正常、PLT增高①常見疾病:輕型vVWD、獲得性

血小板異常(如尿毒癥)。②罕見疾病:遺傳性血小板異常、血管

性疾病、纖溶性疾病、異常纖維蛋白原血癥、輕型FVII、FIX、F

XI缺乏癥.。

三、臨床應用

1、紅細胞ABO血型系統有A、B、0三個等位基因,可組成6個基因型,4種表現型:即

A、B、0、ABO

2、ABO血型鑒定的原理:常用鹽水凝集法檢測紅細胞上存在的血型抗原,以及血清中存

在的血型抗體,依據抗原抗體存在的情況判定血型。

3、交叉配血的目的是檢查受血者與供血者是否存在血型抗原抗體不合的情況。常

用的方法除鹽水法外,還有抗人球蛋白試驗,酶法、凝聚胺法等。鹽水介質法只能

檢測出完全抗體,抗人球蛋白試驗,酶法、凝聚胺法等可檢測出不完全抗體。

4、ABO血型鑒定和交叉配血中常見錯誤主要有分型血清方面的原因,紅細胞方面的原因

和操作方面的原因。

5、ABO血型系統主要臨床意義;(1)ABO血型系統相合才能輸血;(2)ABO血型系統不合

可引起新生兒溶血病;(3)受血者與供血者ABO血型相符才能進行器官移植。

6、Rh血型系統的抗原牽涉到臨床問題的主要有5個,即D、C、c、E、e,Rh系統

血型鑒定主要是檢測D抗原。Rh血型系統的交叉配血是檢測不完全抗體,故應選用

酶法、抗人球蛋白法或聚凝胺法。Rh血型系統在臨床輸血和新生兒溶血病等方面有

重要的臨床意義。

7、具有臨床意義的HLA基因有A、B、C、DR、DQ、DP等位點。HLA檢測臨床意義主要是

器官移植和親子鑒定。

8、血小板血型系統檢查主要用于血小板輸血治療,診斷新生兒同種免疫性血小板減少性

紫瘢和診斷原發性血小板減少性紫瘢。

9、血液保存液的主要成分包括:枸檬酸鹽、枸檬酸、葡萄糖、腺喋吟、磷酸鹽。血液制

品的貯存溫度:全血和紅細胞制劑2—6C;濃縮血小板20—24C;濃縮粒細胞20—24C;

冰凍血漿、冷沉淀<-30C;冷凍紅細胞〈-65C。

一、尿液生成

1.腎組織基本結構:由腎單位和集合管組成。腎單位由腎小體和腎小管組成。

2.尿液生成機制:腎小球的濾過作用和腎小管和集合管的重吸收和腎小管的分泌作用

二、尿標本采集:

1.患者準備和標本容器準備:避免污染

2.尿液標本采集種類:

晨尿:有利于尿液形態學和化學成分分析,可用于腎臟濃縮能力評價;隨機尿

適合門診、急診患者;3h尿適于尿液有形成分排泄率檢查;餐后尿有利于病理性糖

尿、蛋白尿、尿膽原的檢出。有助于肝膽疾病、腎臟疾病、糖尿病、溶血性疾病等

的臨床診斷;24h尿有利于24小時不同時間內尿內排泄濃度不同的物質如肌酎、兒

茶酚胺等的分析;無菌尿用于腎臟或尿路感染者微生物學培養、鑒定及藥敏試驗。

3.尿液標本采集質量管理

包括尿液標本檢驗前、中、后的處理,防止院內外環境和人群的感染。著重于各種

防腐劑的適用條件。

L尿量:需準確完全,成年人1000-2000ml/24h,兒童按每公斤體重計排尿量,約為成人

的3-4倍。多尿,24小時尿總量超過2500ml者,見于生理性多尿及由內分泌、代謝性、

腎臟性疾病引起的病理性多尿;少尿,24小時尿量少于400ml,或每小時尿量持續小于

17nli,見于腎前性少尿、腎后性少尿、腎性少尿;無尿,尿量<100ml/24h或

2.尿顏色和透明度:正常為淡黃色、清晰透明

3.尿比密測定:化學試帶法、尿比密計法、其他。晨尿或通常飲食條件下:L015T.025

o隨機尿:成人1.003-1.035;新生兒:1.002-1.004

1.檢測方法:相差顯微鏡法、偏振光顯微鏡法、透射電鏡法

2.質量控制:新鮮隨機中段尿10ml,水平式離心15cm*1500rpm*5min,保留0.2ml沉渣

涂片。檢查細胞觀察10個高倍視野,檢查管型觀察20個低倍視野。

1.掌握尿液酸堿度測定的方法及評價:試帶法、指示劑法、滴定法、PH計法,晨尿正常

參考值5.5-6.5,隨機尿4.5-8.0,了解PH變化的臨床意義。

2.尿液蛋白質檢查:定義:>150mg/24h或>100mg/L時,蛋白定性陽性即為蛋白尿。檢測

方法:定性試驗分為試帶法、加熱乙酸法、磺基水楊酸法,其中磺基水楊酸法被NCCLS

作為干化學檢查尿蛋白的參考方法及確證試驗

3.尿糖定性試驗呈陽性的尿液稱為糖尿。

a)檢測方法及評價:班氏法、試帶法、薄層層析法。試帶法采用葡萄糖

氧化酶法,特異性強、靈敏度高。

b)質量控制:避免強氧化性物質、高濃度VC、酮體污染及久置標本

c)參考值:定性陰性,定量0.56-5.0mmol/24h

d)臨床應用:血糖增高性糖尿、血糖正常性糖尿、其他糖尿

4.尿液酮體檢查

e)定義:尿酮體是尿液中乙酰乙酸、B-羥丁酸及丙酮的總稱。

f)檢測方法:基本原理為亞硝基鐵氧化鈉法,又分為試帶法、濕化學法

、片劑法,其中試帶法為臨床最常用的通體篩檢方法。

g)質量控制:密閉冷藏保存標本,檢測前恢復至室溫,避免細菌污染。

h)參考值:定性陰性

i)臨床意義:糖尿病酮癥酸中毒、非糖尿病性酮癥者、中毒

5.尿液膽紅素檢查

j)概述:血漿膽紅素有3種,未結合膽紅素、結合膽紅素、6膽紅素,

當血中結合膽紅素增高超過腎閾值,尿膽紅素試驗陽性。

k)檢測方法及評價:重氮法、氧化法。其中重氮法為定性篩檢試驗

1)質量控制:避光、避免VC、亞硝酸鹽等影響

m)參考值:陰性

n)臨床意義:膽汁淤積性黃疸、肝細胞性黃疸、溶血性黃疸、先天性高

膽紅素血癥

6.尿液尿膽原和尿膽素檢查

o)檢測方法:尿膽原采用濕化學Ehrlich法、試帶法;尿膽素采用濕化

學Schleisinger法

P)參考值:尿膽原定性陰性或弱陽性;尿膽素定性陰性

q)臨床意義:溶血性黃疸、肝細胞性黃疸、梗阻性黃疸

7.尿血紅蛋白檢查

r)檢測方法及評價:濕化學法、試帶法、膠體金單克隆抗體法。濕化學

法不穩定,特異性低;試帶法影響因素多;膠體金法靈敏度高、特異性好。

s)質量控制:標本新鮮

t)參考值:陰性

u)臨床意義:紅細胞破壞、生物因素、紅細胞膜缺陷、不穩定血紅蛋白

疾病、免疫因素

8.尿液本周氏蛋白檢查:是游離的免疫球蛋白輕鏈,又稱凝溶蛋白。檢測方法有熱

沉淀一溶解法(假陰性率高)、對一甲苯磺酸法(比較敏感的篩檢法)、蛋白電泳法

、免疫電泳、免疫固定電泳、免疫速率散射濁度法(比較先進的方法)。正常陰性。

多見于多發性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、原發性淀粉樣變性及其它。

9.尿液微量清蛋白測定:是早期糖尿病腎病的臨床主要征象,檢測用免疫學方法。

10.尿液蛋白電泳:常用SDS法,主要用于蛋白尿的分型。

11.尿液肌紅蛋白檢查:是橫紋肌、心肌細胞內的一種含亞鐵血紅素單鏈蛋白質,可用隱

血試驗法、80%飽和硫酸鐵法檢測。正常陰性,見于橫紋肌、心肌損傷疾病。

12.尿液B2-微球蛋白測定:主要用于評估腎臟早期損傷時腎小球和近端腎小管功能。增

高見于腎小管一間質性疾病、藥物或毒物致早期腎小管損傷、腎移植術后。

13.尿液人絨毛膜促性腺激素檢查:含有a、B兩個亞基。臨床上均采用高效的抗hCGB

亞基單克隆抗體進行特異性hCG檢測。正常定性陰性。陽性用于早期妊娠診斷、流產診

斷和監察、異位妊娠診斷、妊娠滋養細胞疾病的診斷與病情觀察及其它。

14.尿液Tamm-Horsfall蛋白測定:尿中粘蛋白的一種,是腎特異性蛋白質,是管型的主

要基質成分。

15.尿液al-微球蛋白測定:反映和評價早期近端腎小管功能損傷、評估腎小球濾過功能

O

16.尿液纖維蛋白降解產物檢查:正常陰性。見于原發性腎小球疾病及DIC等。

17.尿乳糜液和脂肪檢查:尿液中有淋巴液而呈稀牛奶狀稱乳糜尿,尿液中出現脂肪小滴

稱脂肪尿。檢測方法有離心沉淀法、有機溶劑抽提法。正常陰性,見于臨床累及淋巴循

環疾病的輔助診斷、絲蟲病診斷及其它。

1.尿液干化學分析儀

尿液分析儀測試原理本質是光的吸收和反射。可檢測PH、SG、GLU、PRO、KET、BIL

、URO、RBC/Hb、NIT、WBC、VC等。為保證檢測結果的準確,應重視檢測前、中、后的質

量控制,尤其是尿化學分析與顯微鏡檢查的相互關系。

2.尿有形成分分析儀:即尿沉渣分析儀,主要有基于尿沉渣鏡檢影響分析原理和基于尿

沉渣流式細胞術和電阻抗檢測原理。

3.方法學評價:掌握尿液分析儀與顯微鏡檢查結果不符的情形。任何儀器不能完全替代

顯微鏡檢查。

1.糞便檢驗的主要目的為:①了解消化道以及肝臟、膽道、胰腺等器官有無炎癥、出血

、潰瘍、腫瘤及寄生蟲感染等。②根據糞便的性狀與組成,判斷肝、膽、胰腺等器官的

功能。③分析有無腸道致病菌或腸道菌群失調,以防治腸道傳染病。④糞便隱血試驗作

為消化道惡性腫瘤的過篩試驗。

2.送檢時間:標本采集后一般應于lh內檢驗完畢。

3.采集標本的性質應挑取含有黏液、膿血等異常成分的糞便。

4.隱血試驗標本隱血試驗時,應囑咐患者素食3d后留取標本,禁服維生素及

鐵劑等藥品。

5.寄生蟲檢驗標本檢查燒蟲時需要用透明薄膜拭子或棉拭子于清晨排便前拭

取肛門四周,并立即鏡檢。

6.黏液便:多提示腸道刺激或有炎癥,常見于各種腸炎、細菌性痢疾及阿米巴痢

疾;鮮血便:提示下消化道有出血,常見于肛裂、痔瘡、直腸息肉及結腸癌等;

膿便及膿血便:常見于細菌性痢疾、阿米巴痢疾、潰瘍性結腸炎、結腸癌或直腸

癌等,其中以阿米巴痢疾以血為主,血中帶膿,呈果醬樣;柏油樣便:上消化道

出血,超過50ml時糞便呈黑色或褐色,質軟有光澤;稀糊狀或稀汁樣便:見于

各種腹瀉,尤其是急性胃腸炎;白陶土樣便:膽道梗阻時,進入腸道的膽汁減少

或缺如,主要見于梗阻性黃疸等;米淚樣便:呈乳白色淘米水樣,多見于霍亂、

副霍亂。

7.顏色正常人的糞便因含糞膽素而呈黃色或褐色,嬰兒的糞便因含膽綠素故呈黃綠色

O糞便的顏色易受食物及藥物因素的影響。

8.胃腸道少量出血時,糞便用肉眼及顯微鏡均不能證明的出血稱為隱血。用化學法或免

疫法等方法來證實隱血的試驗,稱為隱血試驗。

㈠腦脊液檢驗的適應證和禁忌證

1.標本采集的時機:

⑴化膿性腦膜炎發病后「2天

⑵病毒性腦膜炎發病后3~5天

⑶結核性腦膜炎發病后1~3周

⑷皰疹性腦膜炎于流行性感冒前驅癥狀期開始后5~7天穿刺采集標本。

2.適應證:

⑴有腦膜剌激征者

⑵可疑顱內出血者、腦膜白血病和腫瘤顱內轉移者

⑶原因不明的劇烈頭痛、昏迷、抽捕或癱瘓者

⑷脫髓輔疾病者

⑸中樞神經系統疾病椎管內給藥治療、麻醉和椎管造影者

3.禁忌癥:

⑴顱內高壓者

⑵顱后窩占位性病變者???

⑶處于休克、全身衰竭狀態者

⑷穿刺局部有化膿性感染者

㈡標本采集與處理

⑴腰椎穿刺成功后立即測定腦脊液壓力(比重??)

⑵留取腦脊液標本于3個無菌試管中,每個試管「2ml。

①第一管做病原生物學檢驗

②第二管做化學和免疫學檢驗

③第三管做理學和細胞學檢驗。

⑶標本采集后應立即送檢,并于lh內檢驗完畢。??

⑷腦脊液標本應盡量避免凝固和混入血液。

因標本放置過久,可造成細胞破壞、葡萄糖等物質分解、細菌溶解等,影響檢驗結果。

(三)腦脊液的顏色

1、無色:見于正常腦脊液、病毒性腦炎、輕型結核性腦膜炎、脊髓灰質炎、神經梅毒;

2、紅色:見于穿刺損傷出血、蛛網膜下腔或腦室出血等原因;

3、黃色:多由黃變癥引起,見于出血、黃疸、淤滯和梗阻、黃色素、胡蘿卡素、黑色素

、脂色素增高;

4、白色:白細胞增高引起,見于腦膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性鏈球菌引起的化膿性腦

膜炎;

5、綠色:由于膿性分泌物增多,見于銅綠假單胞菌性腦膜炎、急性肺炎雙球菌性腦膜炎

6、褐色:見于腦膜炎黑色素肉瘤、黑色素瘤。

(四)透明度

1、腦脊液的透明度與其所含的細胞數量和細菌多少有關;

2、腦脊液白細胞超過300X106/L時,可呈渾濁;

3、腦脊液中蛋白質明顯增高或含有大量細菌、真菌時,也可使腦脊液渾濁;

4、結核性腦膜炎的腦脊液可呈毛玻璃樣的渾濁;

5、化膿性腦膜炎的腦脊液呈膿性或塊樣渾濁;

6、穿刺損傷性腦脊液可呈輕微的紅色渾濁。

(五)凝固性

1、正常腦脊液放置12~24h后不會形成薄膜、凝塊或沉淀;

2、腦脊液形成凝塊或薄膜與其所含的蛋白質、特別是與纖維蛋白原的含量有關;

3、腦脊液蛋白質含量超過10g/L時,可出現薄膜、凝塊或沉淀;

4、化膿性腦膜炎的腦脊液在l~2h內呈塊狀凝固;

5、結核性腦膜炎的腦脊液在12?24h內呈薄膜或纖細的凝塊;

6、神經梅毒的腦脊液可有小絮狀凝塊;

7、蛛網膜下腔梗阻的腦脊液呈黃色膠樣凝固;

8、蛛網膜下腔梗阻的腦脊液特點:腦脊液同時存在膠樣凝固、黃變癥和蛋白質-細胞分

離(蛋白質明顯增高,細胞正常或輕度增高),稱為Froin-Nonne綜合征。

(六)質量控制

⑴標本采集后應在lh內進行細胞計數,標本放置過久,細胞可能凝集成團或被破壞,影

響計數結果;

⑵標本必須混勻后方可進行檢查,否則會影響計數結果。

⑶因穿刺損傷血管,引起血性腦脊液,白細胞計數結果必須校正,以消除因出血帶來的

白細胞;

⑷細胞計數時,應注意紅細胞、白細胞與新生隱球菌的鑒別:

①新生隱球菌不溶于乙酸,加優質墨汁后可見未染色的英膜;

②白細胞也不溶于乙酸,加酸后細胞核和細胞質更加明顯;

③紅細胞加酸后溶解。

⑸白細胞直接計數法的試管與吸管中的冰乙酸要盡量去盡,否則可使結果偏低;⑹若標

本陳舊、細胞變形時,白細胞直接分類法誤差大,可采用涂片染色分類法分類計數;6⑺

涂片染色分類計數時,離心速度不能太快,否則會影響細胞形態,可采用玻片離心法、

沉淀室法收集細胞;

(6)涂片固定時間不能太長,更不能高溫固定,以免使細胞皺縮,影響檢驗結果。

(七)參考值

①紅細胞:無;

②白細胞極少;成人:(0~8)X107L,兒童:(「15)X107L,主要為單個核細胞,淋

巴細胞與單核細胞之比為7:30

(A)臨床意義

⑴腦脊液白細胞達(10~50)X107L為輕度增高,(50~100)*106兒為中度增高,大于200

X106/L為顯著增高。

⑵顯著增高:

①中性粒細胞升高,見于化膿性腦膜炎;

②紅細胞升高:見于蛛網膜下腔出血或腦出血、穿刺損傷;

⑶輕中度增高:

①早期中性粒細胞、后期淋巴細胞:見于結核性腦膜炎,且有中性粒細胞、淋巴細胞、

漿細胞同時存在的現象

②嗜酸粒細胞:寄生蟲感染

⑷正常或輕度增高:

淋巴細胞為主,見于漿液性腦膜炎、病毒性腦膜炎、腦水腫。

(九)酸堿度

①正常腦脊液pH值為7.31~7.34,且相對穩定。

②中樞神經系統炎癥時,腦脊液pH值低于正常,化膿性腦膜炎時腦脊液的pH值明顯減

低。

(十)蛋白質

1、定性試驗

(DPandy試驗:腦脊液中的蛋白質與苯酚結合形成不溶性蛋白鹽而出現白色渾濁或沉淀。

⑵硫酸核試驗:包括Ross-Jone試驗和Nonne-Apelt試驗。飽和硫酸鐵能沉淀球蛋白,出

現白色渾濁或沉淀。若球蛋白增多則Ross-Jone試驗陽性;Nonne-Apelt試驗可檢測球蛋

白和清蛋白。

⑶Lee-Vinson試驗:磺基水楊酸和氯化高汞均能沉淀腦脊液蛋白質,根據沉淀物的比例不

同,可鑒別化膿性和結核性腦膜炎。

2、定量法:利用比濁法、染料結合比色法和免疫學方法檢測腦脊液蛋白質含量。常用的

方法為磺基水楊酸-硫酸納比濁法。

3、質量控制

⑴因穿刺出血,可出現假陽性。

⑵試驗中所用試管和滴管須十分潔凈,否則易出現假陽性。

⑶苯酚不純可引起假陽性;室溫低于10°C、苯酚飽和度減低也可引起假陰性。

4、參考值

定性:陰性(或弱陽性);

定量:腰椎穿剌:0.20~0.40g/L;小腦延髓池穿刺:0.10~0.25g/L;腦室穿刺:

3

0.05^0.15g/L;蛋白商:0.4?0.8;Ra/b7X10

5、臨床意義

⑴腦脊液蛋白質含量增高是血-腦脊液屏障功能障礙的標志。

⑵由于腦脊液清蛋白只來自血清,因此,kJ腦脊液清蛋白(g/L)/血清清蛋白(g/L)]更能

反映血-腦脊液屏障完整性。

⑶蛋白商(球蛋白/清蛋白)反映了腦脊液球蛋白與清蛋白的比例變化。

①蛋白商增高:提示腦脊液球蛋白含量增高,見于多發性硬化癥、神經梅毒、腦脊髓膜

炎、亞急性硬化性全腦炎等。

②蛋白商減低:提示腦脊液清蛋白含量增高,見于化膿性腦膜炎急性期、腦腫瘤、脊髓

壓迫癥等。

(H—)葡萄糖

1、腦脊液葡萄糖含量大約為血糖的5O9C8O%(平均60%),其高低與血糖濃度、血-腦脊液

屏障的通透性、葡萄糖的酵解程度有關。

2、參考值

①腰椎穿刺:2.5~4.4mml/L;

②小腦延髓池穿刺:2.8~4.2mnol/L;

③腦室穿刺:3.0~4.4mmol/L。

3、臨床意義

⑴葡萄糖減低:

①細菌性腦膜炎和真菌性腦膜炎,以化膿性腦膜炎早期減低最明顯;

②腦寄生蟲病等;

③腦腫瘤;

④神經梅毒;

⑤低血糖昏迷、膜島素過量所致的低血糖狀態。

⑵葡萄糖增高:

①新生兒及早產兒;

②糖尿病或靜脈注射葡萄糖;

③腦或蛛網膜下腔出血所致的血性腦脊液;

④病毒性腦膜炎或腦炎;

⑤急性顱腦外傷、中毒、缺氧、腦出血等所致下丘腦損傷等。

(十二)氯化物

1、氯化物含量約為血漿L2~L3倍。

2、測定方法有硝酸柔滴定法、電量分析法、離子選擇性電極法和硫氟酸汞比色法;臨床

常用電極法。

3、臨床意義

⑴氯化物減低:

①細菌或真菌感染,特別是化膿性、結核性和隱球菌性腦膜炎的急性期、慢性感染的急

性發作期;

②細菌性腦膜炎的后期,由于腦膜有明顯的炎癥浸潤或粘連,局部有氯化物附著,使腦

脊液氯化物減低;

③嘔吐、腎上腺皮質功能減退時,由于血氯減低,使腦脊液氯化物含量亦減低。

⑵氯化物增高:主要見于尿毒癥、腎炎、心力衰竭、病毒性腦膜炎或腦炎。

()百每

1、正常情況下血清酶不能透過血腦屏障,因此腦脊液中各種酶的含量遠低于血清。

2、血腦屏障通透性增高、各種原因引起的腦組織損傷、腦腫瘤、顱內壓增高等均可導致

腦脊液各種酶含量增高。

(十四)蛋白電泳

1、腦脊液中蛋白質的特點為:

①有較多的前清蛋白;

②B球蛋白較多,且高于血清,而Y球蛋白僅為血清的50%;

③清蛋白主要來自血清。

2、參考值

①前清蛋白2%?6%;

清蛋白55%~65%;

a?球蛋白3%?8%;

a2球蛋白4%~9%;

B球蛋白10%"18%;

Y球蛋白4%~13虬

(十五)免疫球蛋白

1、IgG增高:多見于細菌性腦膜炎、亞急性硬化性全腦炎、多發性硬化癥、急性感染性

多發性神經根神經炎,且結核性腦膜炎IgG增高較化服性明顯;

2、IgG減低:癲痛、放射線損傷和服用類固醇藥物等;

3、IgM增高:多見于化膿性腦膜炎,也見于多發性硬化癥、腫瘤和血管通透性改變等;

IgM明顯增高可排除病毒性感染;

4、IgA增高:多見于化膿性腦膜炎、結核性腦膜炎和病毒性腦膜炎等。

(十六)其他檢查

①淋巴細胞亞群

②抗結核抗體

③髓鞘堿性蛋白

④谷氨酰胺

⑤乳酸

(十七)臨床應用

1.診斷與鑒別診斷中樞神經系統感染性疾病

2.診斷與鑒別診斷腦血管疾病

①若腦脊液為均勻一致的紅色,則可能為腦出血、蛛網膜下腔出血;

②若第1管腦脊液為紅色,以后逐漸變清,則多為穿刺損傷出血;

③若頭痛、昏迷或偏癱患者的腦脊液為無色透明,則多為缺血性腦病;

④可選用LD、AST、CPK等指標診斷或鑒別診斷腦血管病。

3.輔助診斷腦腫瘤

⑴大約70%惡性腫瘤可轉移至中樞神經系統,此時的腦脊液中,單核細胞增加、蛋白質增

高、葡萄糖減少或正常。

⑵腦脊液細胞計數和蛋白質正常,可排除腫瘤的腦膜轉移。

⑶白血病患者腦脊液發現白血病細胞,則可診斷為腦膜白血病。

⑷腦脊液涂片或免疫學檢查發現腫瘤細胞,則有助于腫瘤的診斷。

(5))2-M、LD、PHI、溶菌酶等。

4.診斷脫髓鞘病

⑴腦脊液常規檢查

⑵LBP、免疫球蛋白、AChE等

㈠標本采集與保存的方法:

1.標本分別行胸腔穿刺術、腹腔穿刺術和心包腔穿刺術采集。

2.穿刺成功后,留取中段液體于無菌的容器內。

3.理學檢查、細胞學檢查和化學檢查各留取2ml,厭氧菌培養留取1ml,結核桿菌檢

查留取10mlo

4.標本留取后應及時送檢,不能及時送檢的標本可加入適量乙醇以固定細胞成分。

5.理學檢查和細胞學檢查宜采用EDTA-Na?抗凝,化學檢查宜采用肝素抗凝。

6.另外留取1份不加任何抗凝劑,用于檢查積液的凝固性。

理學檢杳.

1.量正常漿膜腔內均有少量的液體。病理情況下液體增多,可至上千毫升。

2.顏色正常漿膜腔液為淡黃色。滲出液顏色隨病情而改變,漏出液顏色較淺。

3.透明度正常漿膜腔液清晰透明。

⑴滲出液因含有大量細菌、細胞而呈不同程度的渾濁;

⑵乳廉液因含有大量脂肪呈渾濁外觀;

⑶漏出液因其所含細胞、蛋白質少,且無細菌而呈清晰透明外觀。

4.凝塊正常漿膜腔液無凝塊。

⑴漏出液一般不易凝固或出現凝塊;

⑵滲出液由于含有較多的纖維蛋白原和細菌,細胞破壞后釋放凝血活酶,可自行凝固。

5.比密比密高低與其所含溶質的多少有關。

⑴漏出液比密常小于1.015;

⑵滲出液比密常大于1.018o

(二)關節腔積液檢查標本采集與保存:

標本應分裝在3支無茵試管內。

第一管做理學和微生物學檢查;

第二管加適量肝素抗凝做化學檢查和細胞學檢查;

第三管不加抗凝劑用于觀察積液的凝固性。

理學檢查:

1.量正常關節腔內液體極少,約0.廣2.0ml。在關節炎癥、創傷和化服性感染時,關節

腔液量增多,且積液的多少可初步反映嚴重程度。

2.顏色正常關節腔液為淡黃色、草黃色或無色粘稠液體。

3.透明度正常關節腔液清晰透明,其渾濁主要與細胞成分、細菌、蛋白質增多有關,多

見于炎性積液。

4.粘稠度

⑴正常關節腔液高度粘稠,其高低與透明質酸的濃度和質量呈正相關。

⑵炎性積液的粘稠度減低,關節炎癥越嚴重,積液的粘稠度越低。

⑶粘稠度增高見于甲狀腺功能減退、系統性紅斑狼瘡、臆黯囊腫及骨關節炎引起的粘液

囊腫等。

5.凝塊形成正常關節腔液無凝固現象。

6.細胞分類采用染色分類法。

臨床應用:

1.非炎性積液

⑴病因:骨關節病、創傷性關節病

⑵外觀:淡黃色、清亮

⑶白細胞升高、乳酸升高

2.炎癥性積液

⑴病因:類風濕性、晶體性關節炎

⑵外觀:黃色、微渾

⑶白細胞升高、乳酸升高、蛋白質升高、葡萄糖減低

3.化膿性積液

⑴病因:化膿性、結核性關節炎

⑵外觀:黃色或乳白色、渾濁

⑶白細胞、乳酸、蛋白質明顯升高;葡萄糖中度減低

4.出血性積液

⑴病因:關節創傷、出血性疾病、過度的抗凝治療

⑵外觀:紅色、渾濁

⑶白細胞、蛋白質升高,乳酸正常

陰道分泌物病原學檢查中可引起滴蟲性陰道炎的陰道毛滴蟲。陰道毛滴蟲可引起滴蟲性

陰道炎。為寄生于陰道的致病性原蟲,呈梨形,大小為白細胞的2-3倍,前端有4根前

鞭毛,生長的最適pH為5.5-6.0,適宜溫度為25℃-42℃,故檢查時需注意保溫,方可

觀察到毛滴蟲的活動。檢測方法中直接濕片高倍鏡檢查法簡便易行,是最常用的方法,

標本送檢時需注意保溫;膠乳凝集快速檢查法(LAT)優于直接濕片鏡檢和培養法,適合

于臨床常規應用。

掌握陰道分泌物的外觀,清潔度檢查的檢測方法及臨床意義。正常陰道分泌物為白色稀

糊狀、無氣味、量多少不等。大量無色透明粘白帶:常見于應用雌激素藥物及卵巢顆粒

細胞瘤;膿性白帶:黃色有臭味,化膿性細菌感染引起,見于慢性宮頸炎、老年性陰道

炎、子宮內膜炎、宮腔積膿、陰道異物等;黃色泡沫狀膿性白帶,常見于滴蟲性陰道炎

;豆腐渣樣白帶:常見于真菌性陰道炎;血性白帶:有特殊臭味,見于宮頸癌、宮頸息

肉孑右粘瞳下明耐,渥,洋黃庶古硒光1箋

清;吉度A查:標本加工畝鹽水一嬴涂片看高倍鏡檢查,根據所見的上皮細胞、白細胞

、(或膿細胞)、陰道桿菌與雜菌的數量進行判斷,并劃分清潔度:I、n度為正常,in

、w度為不清潔。

陰道清潔度判斷標準

I++++++++0-5—正常

II++++5T5—正常

m——15-30++提示炎癥

IV——>30++++嚴重陰道炎

(一)脫落細胞學的概念

1、屬于細胞病理學的一個分支;

2、采集人體各組織、器官表面刮取物或刷取物和自然脫落的細胞;

3、通過染色后在鏡下對其類別、形態與病變性質的觀察和分析來協助臨床診斷疾病

(二)正常脫落上皮細胞的形態:

1、復層鱗狀上皮(復層扁平上皮)細胞

由多層細胞組成

分布于體表、口腔、食管、肛管、陰道等部位

可以分為基底層細胞、中層細胞和表層細胞。

(三)核異質的概念:

⑴核異質是指脫落細胞核的形態與染色質結構的異常改變。

⑵基本特征是在細胞核增大的基礎上伴有一定程度的深染和畸形。

⑶核異質細胞是介于良性和惡性之間的過渡型細胞。

⑷主要表現為核增大、形態異常、染色質增多、分布不均、核膜增厚、染色較深。⑸可

分為輕度核異質和重度核異質。

(四)惡性腫瘤細胞的主要形態特征:

1.細胞核的改變

⑴核增大:為同類正常細胞「5倍,有時可達10倍以上。

⑵核大小不一:相差懸殊。

⑶核深染:呈藍紫色似墨滴狀。

⑷核畸形明顯。

⑸核染色質異常增多。

⑹核仁異常:可增大、增多、異形,若核仁達5um以上,樹目3個以上,常是惡性細

胞特征之一。

⑺核分裂異常:可見各種核異常分裂,如不對稱分裂、多極分裂、環狀分裂。

⑻多核:多核細胞其核的大小、形態差異明顯,無一致性,且具惡性特征。

⑼裸核:惡性細胞過度增生,導致細胞質過早的老化、退化消失而形成裸核。此裸核

具惡性特征。

2.細胞質的改變

⑴量少畸形:胞質相對減少,分化程度越低,胞質量越少。畸形變化,細胞分化程度

越高,畸形越明顯。

⑵染色加深:由于胞質內含蛋白質較多,HE染色呈紅色,且著色不均。

⑶空泡變異:腺癌細胞較為突出,常形成戒指樣細胞。

⑷吞噬異物:如血細胞、細胞碎片等。偶見胞質內封入另一個癌細胞,稱為

封入細胞或鳥眼細胞。

第一章血液標本的采集與抗凝

重點難點解析

--、明確全血、血清和血漿三個基本概念,理解血漿和血清的區別。

二、血液標本的采集

掌握血液標本采集的兩種基本方法:毛細血管采血法和靜脈采血法。包括采血部位、操

作方法、注意事項,并歸納比較其優缺點。

三、血液標本的抗凝

(-)理解抗凝及抗凝劑的概念:

抗凝及抗凝劑的概念:用物理或化學的方法,除抹或抑制血液中某些凝血因子以阻止血

液凝固的方法,稱之為抗凝。能阻止血液凝固的化學試劑稱為抗凝劑。

(二)掌握常用的抗凝劑的種類,抗凝原理,適用范圍

1.枸椽酸鈉

也稱檸檬酸鈉。其抗凝原理是枸檬酸鈉能與血液中的鈣離子形成可溶性螯合物,從而阻

止血液凝固。通常抗凝劑與血液以1:9(V:V)比例用于血栓與止血檢驗,以1:4(V:V)比例

用于紅細胞沉降率的測定。也多用于配制血液保養液。

2.乙二胺四乙酸(EDTA)鹽

EDTA有二鈉、二鉀和三鉀鹽(鉀鹽溶解度大于鈉鹽),均可與血液中的鈣離子結合形成

螯合物,從而阻止血液凝固。EDTA-K特別適用于全血細胞分析儀及血細胞比容測定。EDTA

鹽影響血小板聚集,故不適于血栓與止血檢查及血小板功能檢查。Z

3.肝素

肝素可加強抗凝血酶HI(AT-III)滅活絲氨酸蛋白酶,從而具有阻止凝血酶形成和抑制

血小板聚集等多種作用。不能用于白細胞計數和分類計數。

學習方法:

記憶、理解、實踐操作、復習鞏固

自測題:

單項選擇題(A)型題

1.成人靜脈采血時,通常采血的部位是

A手背靜脈B股靜脈C肘部靜脈D內踝靜脈E頸部靜脈

2.EDTA鹽抗凝劑不宜用于

A紅細胞計數B白細胞分類計數C血小板計數D白細胞計數E凝血象檢查和血小板功能試

3.枸椽酸鈉的抗凝原理是

A阻止凝血酶的形成B阻止血小板聚集C除去球蛋白D與血液中的鈣離子形成鰲合物E除

去纖維蛋白原

4.肝素抗凝主要是加強哪種抗凝血酶的作用

A抗凝血酶IB抗凝血酶IIC抗凝血酶IIID抗凝血酶IVE抗凝血酶V

5.瑞氏染液中的酸性染料是

A伊紅B亞甲蘭C沙黃D甲醇E甘油

6.關于瑞氏染色細胞著色后情況,錯誤的是

A中性顆粒為淡紫紅色B單核細胞胞質為灰蘭色C嗜堿性顆粒為紫紅色D嗜酸性顆

粒為橘紅色E淋巴細胞胞質為藍色

7.造成血細胞目視計數固有誤差的原因是

A使用器材不符合要求B稀釋倍數不準C采血部位不當D血液發生凝固E充池后

細胞在計數室內分布不可能完全相同

8.全血抗凝離心后除去血細胞成分即為

A.血漿B.血清C.全血D.濃縮血細胞E.血清因子

9.可用于輸血保養液的是

A.EDTA-K2B.枸椽酸鈉C.草酸鈉D.雙草酸鹽E.草酸鉀

10.吉姆薩染色法較瑞氏染色法的優點在于

A.試劑便宜B.標本色彩艷麗C.染料滲透性強D.對細胞核著色較好

E.對胞質和中性顆粒著色較好

(-)名詞解釋

抗凝

(三)簡答

臨床常用的抗凝劑有哪幾種?

答案:

(一)單項選擇題(A)型題

1-5:CEDCA6-10:CEABC

(二)名詞解釋

抗凝:指用物理或者是化學方法去除或抑制血液中的凝血因子,從而阻止血液的凝固,

這樣一個過程,稱為抗凝。

(三)簡答

臨床常用的抗凝劑有:二乙胺四乙酸(EDTA)鹽,枸梅酸鹽,肝素、草酸鹽等

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