第十單元生物技術(shù)與工程第34講

細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程01動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)02動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體03動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物04目錄考點(diǎn)三動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體03指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。（4）結(jié)果：形成雜交細(xì)胞。即融合后形成的雜交細(xì)胞具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息。（2）原理：細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性細(xì)胞增殖（3）誘導(dǎo)方式物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒誘導(dǎo)法與植物原生質(zhì)體融合的方法相同——?jiǎng)游锛?xì)胞融合特有（1）概念：1、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)①突破有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能，種間、屬間、科間，甚至動(dòng)物和植物之間的細(xì)胞融合都已獲得成功；③利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。正在融合的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞（5）意義：1、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)②成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段；2、單克隆抗體及其應(yīng)用（1）制備原理：①B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)：一種B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。②骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn)：能在體外大量增殖。③雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。用抗原注射小鼠從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)取骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)已免疫B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合多種雜交細(xì)胞小鼠的脾臟中獲取2、單克隆抗體及其應(yīng)用（2）制備過程：克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)第二次篩選(抗原-抗體雜交技術(shù))多種雜交瘤細(xì)胞能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞陽性細(xì)胞多孔細(xì)胞培養(yǎng)板每一個(gè)孔中盡量只接種一個(gè)雜交瘤細(xì)胞抗體檢測(cè)板陽性孔2、單克隆抗體及其應(yīng)用（2）制備過程：注射到小鼠體內(nèi)體外培養(yǎng)分離、提純單克隆抗體能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)工程師在工作體內(nèi)或體外培養(yǎng)2、單克隆抗體及其應(yīng)用（2）制備過程：2、單克隆抗體及其應(yīng)用（3）單克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用①特點(diǎn)：準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特性結(jié)合，并且可以大量制備②應(yīng)用：作為診斷試劑，用于疾病診斷和病原體鑒定作為運(yùn)載藥物的載體用于治療疾病【概念辨析】1．植物原生質(zhì)體融合與動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是相同的。(

)2．雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，更容易控制培養(yǎng)條件。(

)3．制備單克隆抗體時(shí)，要選用已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞。(

)4．滅活的病毒能促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合，但不能促進(jìn)植物細(xì)胞融合。(

)5．雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，是為了獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎。(

)√√×√√植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合前的處理方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合成功的標(biāo)志主要用途意義細(xì)胞膜的流動(dòng)性植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性用果膠酶和纖維素酶去除細(xì)胞壁分散成單個(gè)細(xì)胞后誘導(dǎo)細(xì)胞融合電融合法、離心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法再生出細(xì)胞壁細(xì)胞核的融合獲得完整的雜種植株主要用于制造單克隆抗體打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植物新品種突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能1、比較植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合2、單克隆抗體制備過程中兩次篩選的方法及目的項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選篩選原因篩選方法篩選目的誘導(dǎo)融合后會(huì)得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“B—B”細(xì)胞、“瘤—瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B—瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞考法1圍繞動(dòng)物細(xì)胞融合，考查生命觀念和科學(xué)思維能力1．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的說法，不正確的是()A．動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程B．細(xì)胞融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞C．細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能D．常用的誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有PEG融合法、電融合法、滅活的病毒誘導(dǎo)法和紫外線照射等D考法1圍繞動(dòng)物細(xì)胞融合，考查生命觀念和科學(xué)思維能力2．(2022·廣東云浮期末)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)及其意義的敘述，錯(cuò)誤的是()A．融合后的動(dòng)物細(xì)胞具有原來兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核B．滅活病毒可以誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合與病毒表面的糖蛋白有關(guān)C．動(dòng)物細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)可加入CO2以維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定D．細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限，動(dòng)、植物細(xì)胞也可以融合AA．免疫的B淋巴細(xì)胞雖然可進(jìn)行補(bǔ)救合成途徑，但由于高度分化，不能在HAT培養(yǎng)基上增殖B．骨髓瘤細(xì)胞及其相互融合細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基上無法進(jìn)行上述途徑，因而不能增殖C．雜交瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基上可同時(shí)進(jìn)行上述兩個(gè)途徑，因此能大量增殖D．HAT培養(yǎng)基上篩選出的雜交瘤細(xì)胞，不一定都能產(chǎn)生所需的抗體考法2結(jié)合單克隆抗體及其應(yīng)用，考查科學(xué)探究能力和社會(huì)責(zé)任3．(2022·河北廊坊期末)如圖，核苷酸合成有兩個(gè)途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑。正常細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶。制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞缺乏轉(zhuǎn)化酶。現(xiàn)用加入H、A、T3種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”篩選出雜交瘤細(xì)胞。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()CA．注射抗原A的主要目的是刺激小鼠產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞B．經(jīng)特定的選擇培養(yǎng)基篩選出的細(xì)胞均為異種核融合的細(xì)胞C．可將細(xì)胞毒素與單克隆抗體結(jié)合實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的特異性殺傷D．該過程最終得到的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體能與多種抗原結(jié)合考法2結(jié)合單克隆抗體及其應(yīng)用，考查科學(xué)探究能力和社會(huì)責(zé)任4．(不定項(xiàng))(2022·河北承德期末)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種病因未明的以炎性滑膜炎為主的慢性系統(tǒng)性疾病。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，該病與TNF-α(腫瘤壞死因子-α)密切相關(guān)，有效治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎可以使用注射抗TNF-α單克隆抗體的辦法，該單克隆抗體制備的過程如圖所示。下列說法正確的是(

)ABC考法3圍繞單克隆抗體制備的應(yīng)用，考查社會(huì)責(zé)任5．(2022·山東卷)如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡(jiǎn)稱雙抗。下列說法錯(cuò)誤的是()A．雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞C．篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原D．同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞D考法3圍繞單克隆抗體制備的應(yīng)用，考查社會(huì)責(zé)任6．(2022·遼寧實(shí)驗(yàn)中學(xué)期末)抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)是將高特異性的單克隆抗體和小分子藥物，通過接頭進(jìn)行高活性結(jié)合而成，用以提高腫瘤藥物的靶向性，減少毒副作用。下圖是ADC作用原理，下列敘述正確的是()CA．ADC中的單克隆抗體是殺死腫瘤細(xì)胞的有效成分B．ADC與腫瘤細(xì)胞識(shí)別后，被腫瘤細(xì)胞以協(xié)助擴(kuò)散的方式吸收進(jìn)入細(xì)胞C．接頭既要在內(nèi)環(huán)境中保持穩(wěn)定，又能在細(xì)胞內(nèi)被斷開D．ADC進(jìn)入腫瘤細(xì)胞后會(huì)被溶酶體分解，從而喪失藥物活性1、有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞融合的敘述不正確的是()A．使遠(yuǎn)緣雜交成為可能B．雜交細(xì)胞具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息C．其基本原理是細(xì)胞膜的選擇透過性D．為制造單克隆抗體開辟了新途C2、用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是()A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B．用氯化鈣作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合C．篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體D．該雜交瘤細(xì)胞的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體B作業(yè)3、下列不屬于單克隆抗體在實(shí)踐上應(yīng)用的實(shí)例是()A．制成“生物導(dǎo)彈”，將藥物定向地帶到癌細(xì)胞所在部位B．利用同位素標(biāo)記的單克隆抗體定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病C．利