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文檔簡介
1本標準規定了平菇原生質體再生育種的術語和定義、人員和設備、出發菌株制備、再生育種流本標準適用于平菇（Pleurotusostreatus）原生質體再生育種。白靈菇（Pleurotusferulae）和杏鮑菇（Pleurotuseryngii）等其它食用菌的原生質體再生育種可參照執行。下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。實驗室生物安全通用要求GB/T23189NY/T1730食用菌菌種真實性鑒定ISSR法NY/T1845食用菌菌種區別性鑒定拮抗反應JJG552血細胞計數板試行檢定規程3.13.23.323.4試驗人員應熟悉基本微生物操作，在開展相關試驗前應充分掌握安全操作規范，試驗過程中做好相應防護。將菌種接種至PDA培養基上培養5d~7d，產生大量生長旺盛的菌絲即獲得出發菌株。制作過36.1.1.3加入1.0mL2%溶壁酶，35℃水浴2.5h～3.5h；利用光學顯微鏡觀察原生質體，按照JJG552的要求進行原生質體計數，計算原生質體懸液的濃度（個/mL）。 A——原生質體懸液的原生質體數目；B——原生質體再生培養基上的單菌落數目。將再生過程中產生的單菌落分別在PDA培養基上單獨培養2~3代，選擇各代培養時菌絲和菌落形態均一致的單菌落作為再生菌株。再生菌株應單獨編號保存，不能與其它再生菌株混雜。4b)遺傳學鑒定：按NY/T1730的要求進行。選擇ISSR指紋圖譜與初始菌株具有明顯差異的再生菌株。種類少、發病率顯著低于(p<0.05)出發
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