任務一乙醇中少量水分的分析實驗目的

掌握氣相色譜儀使用熱導檢測器的操作及液體進樣技術；掌握內標法定量分析的原理和方法，能用氣相色譜儀分析乙醇中少量水分。課前準備

1.乙醇有什么用途？

2.本實驗所用的主要儀器是

；所用的試劑有

。

3.儀器操作條件是什么？

1．儀器氣相色譜儀（配熱導檢測器）、10uL微量注射器、帶膠蓋的小藥瓶。儀器操作條件：柱溫90℃；汽化溫度120℃；檢測器溫度120℃；載氣H2，流速30mL/min；橋電流150mA。2．試劑GDX-104（60～80目）、無水乙醇（在分析純試劑無水乙醇中，加入500℃加熱處理過的5A分子篩，密封放置一日，以除去試劑中的微量水分）、無水甲醇（按照與無水乙醇同樣的方法作脫水處理）實驗儀器和用品

1．峰高相對校正因子的測定將帶膠蓋的小藥瓶洗凈、烘干。加入約3mL試樣乙醇，稱量（稱準至0.0001g，下同）；再加入蒸餾水和無水甲醇各約0.1mL分別稱量。混勻。吸取5.0uL上述配制的標準溶液，進樣，記錄色譜圖，測量水和甲醇的峰高平行進樣兩次。2．乙醇試樣的測定將帶膠蓋的小藥瓶洗凈、烘干、稱量。加入3mL試樣乙醇，量；再加入適量體積的無水甲醇（視試樣中水含量而定，應使甲醇峰高接近試樣中水的峰高），稱量。混勻后吸取5.0uL進樣，記錄色譜圖，測量水和甲醇的峰高。平行進樣兩次。實驗步驟

3．數(shù)據(jù)處理（1）峰高相對校正因子實驗步驟＝（2）乙醇試樣中水的質量分數(shù)’fwmm甲醇h甲醇h水=××任務二肥皂的制備

實驗目的

了解皂化反應的原理及肥皂的制備方法；熟悉鹽析原理。課前準備

1.閱讀本實驗。實驗室中肥皂的制備需要的主要儀器

。

2.實驗室肥皂的制備原理（用化學方程式表示）

。3.本實驗需要的藥品有

。

實驗原理R1COOCH2|R2COOCH|R3COOCH2NaOH/H2OR1COONaR2COONa

R3COONa+CH2–OH|CH–OH|CH2–OH實驗用品

氫氧化鈉（40%）、飽和食鹽水、圓底燒瓶（250mL）、燒杯（400mL）、球形冷凝管、乙醇（95%）、減壓過濾裝置、電熱套、豬油。實驗步驟1.在圓底燒瓶中加入新煉制的5g豬油、15mL乙醇和15mL氫氧化鈉溶液。按照圖8-2安裝普通蒸餾裝置。用電熱套加熱，保持微熱40min。此間燒杯內產生大量泡沫，可從冷凝管上口滴少量1∶1的乙醇和氫氧化鈉混合液，以防泡沫沖入冷凝管中。1-圓底燒瓶2-冷凝管2.鹽析分離

皂化反應結束后，趁熱將反應混合液倒入盛有150mL飽和食鹽水的燒杯中，靜止冷卻。將充分冷卻后的皂化液倒入布氏漏斗中，減壓過濾。用冷卻水洗滌沉淀兩次，抽干。

3.濾餅取出后，隨意壓制成型，自然晾干后，稱量質量并計算產率。注意事項

1.在制備肥皂時加入乙醇，是因為酒精既能溶解堿，又能溶解油脂，是油脂和NaOH的共同溶劑，能使反應物融為均一的液體，使皂化反應在均勻的系統(tǒng)中進行，并且速率加快。2.可用長玻璃管從冷凝管上口插入燒杯中，蘸取幾滴反應液，放入盛有少量熱水的試管中。3.油脂在適量堿溶液中水解即生成高級脂肪酸鹽(肥皂)和甘油。加入NaOH溶液的作用，就是使油脂在堿性條件下水解，以制取肥皂。4.加入飽和NaCl溶液的作用，是高級脂肪酸鈉(肥皂)發(fā)生凝聚而從混合液中析出，并浮在表面，而皂化反應的另一副產物甘油、未作用的堿和酒精能在NaCl溶液中溶解，得到質地較好的肥皂。

5.豬油的化學式可表示為：（C17H35COO）3C3H5。6.氫氧化鈉的濃度一定要足夠大。7.飽和氯化鈉的量一定要控制好，否則都不利于肥皂的析出。學習掌握有關操作1.掌握普通回流裝置的安裝與操作方法；2.熟練掌握沉淀的洗滌及減壓過濾操作技術。

1.實驗室為什么使用新煉制的的豬油？制作肥皂時除豬油作原料外，還有哪些物質可以用來制肥皂?試舉例說明。2.制作肥皂的基本原理是什么？3.皂化反應后，為什么要進行鹽析分離？4.皂化反應過程中，為什么始終保持微熱？5.制作肥皂時為什么采用回流裝置？廢液中還有哪些副產品，怎么進行回收？6.皂化液和準備添加的混合液中乙醇含量較高，易燃燒，應注意什么？提問任務三蔬菜中葉綠素的提取、分離和含量測定

實驗目的了解植物組織中葉綠素的分布及性質；能獨立完成文獻查閱，掌握天然產物的分離提取、鑒定和含量測定等實驗技術。實驗內容與要求1.查閱資料通過查閱有關文獻資料，對蔬菜中葉綠素的提取、分離和含量測定擬定出實驗方案。2.提取蔬菜中葉綠素根據(jù)擬定的實驗方案，在實驗室內由學生自己準備所需儀器和試劑，經(jīng)實驗教師同意后進行實驗。3.蔬菜中葉綠素的分離根據(jù)擬定的方案進行分離，在實驗室內由學生自己準備所需的儀器和試劑，獨立進行實驗，對所提取的樣品進行分離。分離主要包括裝柱、洗滌劑的選擇等工作。實驗時強調學生注意安全。4.葉綠素含量的測定應用分光光度法測定蔬菜中葉綠素的含量。提問1.提取葉綠素需要哪些儀器、原料和試劑?2.提取葉綠素的原理是什么？Ⅰ葉綠體色素的提取、分離（紙層析法）設計實驗目的

通過實驗，掌握葉綠體色素提取、分離的基本原理和方法。實驗原理葉綠體中含有綠色素（葉綠素a和葉綠素b）和黃色素（胡蘿卜素和葉黃素）。這兩類色素均不溶于水，而溶于有機溶劑，故常用酒精或丙酮等提取。葉綠體色素可用色層分析法加以分離。其原理主要是色素種類不同，被吸附劑吸附的強弱就不同，當用適當溶劑推動時，不同色素的移動速度不同，色素便被分離。實驗步驟

1.葉綠體色素的提取稱取新鮮葉片2g剪碎于研缽中，加少量95﹪酒精（或80﹪丙酮）和少量CaCO3粉及石英砂，研磨成勻漿，再加95﹪酒精（或80﹪丙酮）l0ml稀釋研磨后，用濾紙過濾于小瓶中，濾液即為葉綠體色素提取液。

2.點樣取層析濾紙條（規(guī)格為1.5×10cm），在其一端距邊沿約1.5cm處畫一點樣線，用玻璃毛細管吸取葉綠體色素提取液點于點樣線上，每點一次樣待稍干后再點下一次，重復在原樣點點樣4～5次，然后將樣點完全吹干后進行色素層析分離。

3.層析取一支平底試管，加入推動劑溶液（石油醚：丙酮以10:1比例混合）約2ml，將己點好樣的濾紙條插入試管中，使點樣端浸入推動劑中（注意樣點不能浸入溶劑中），加塞，直立于暗處層析。約5min（推動劑到達距濾紙前沿約2cm處）后，將濾紙條取出，用鉛筆標出各色帶的位置。

結果鑒定

觀察濾紙條上的色帶分布，根據(jù)各色帶的顏色標明為何種色素。

Ⅱ葉綠素含量的測定方法一實驗目的

掌握葉綠素含量測定的基本原理和方法。

實驗原理葉綠素與其他顯色物質一樣，在溶液中如液層厚度不變則其吸光度與它的濃度成一定的比例關系。已知葉綠素a、b在652nm波長處有相同的比吸收系數(shù)（均為34.5）。因此，在此波長下測定葉綠素溶液的吸光度，即可計算出葉綠素a、b的總量。1.材料：菠菜葉；芥菜葉或其他植物葉片。2.儀器設備：電子分析天平；分光光度計；漏斗；25ml容量瓶；剪刀；濾紙；玻棒等。3.試劑：95﹪乙醇、石英砂、碳酸鈣粉。材料、儀器設備及試劑

1.葉綠素的提取稱取植物鮮葉0.20g（可視葉片葉綠素含量增減用量），剪碎放入研缽中，加少量碳酸鈣粉和石英砂及3～5ml95﹪乙醇研成勻漿，再加約10ml95﹪乙醇稀釋研磨后，用濾紙過濾入25ml容量瓶中，然后用95﹪乙醇滴洗研磨及濾紙至無綠色為止，最后定容至刻度，搖勻，即得葉綠素提取液。

2.測定取光徑為1cm的比色杯，倒入葉綠素提取液距杯口1cm處，以95﹪乙醇為空白對照，在652nm波長下讀取吸光度（A）值。實驗步驟

將測得的吸光度A652值代入公式(1),即可求得提取液中葉綠素濃度。所得結果再代入公式(2)，即可得出樣品中葉綠素含量（mg·g－1Fw）。

A652

C(mg·ml－1)=————……(1)34.5公式中：C—葉綠素（a和b）的總濃度(mg·ml－1)A652—表示在652nm波長下測得葉綠素提取液的吸光度

34.5為葉綠素a和b混合溶液在652nm波長的比吸收系數(shù)（比色杯光徑為1cm,樣品濃度為1g·L－1時的吸光度）。

C（mg·ml－1）×提取液總量（ml）葉綠素含量（mg·g－1Fw）=—————————————--------（2）

樣品鮮重（g）

計算實驗目的

掌握葉綠素a、b含量測定的基本原理和方法。

方法二葉綠素a、b分別在663nm和645nm波長處有最大的吸收峰，同時在該波長處葉綠素a.、b的比吸收系數(shù)K為已知，我們即可以根據(jù)Lambert－Beer定律，列出濃度C與吸光度A之間的關系式：A663=82.04Ca+9.27Cb……(1)A645=16.75Ca+45.6Cb……(2)（1）、（2）式中的A663.A645為葉綠素溶液在波長663nm和645nm時測得的吸光度。

Ca、、Cb為葉綠素a、b的濃度，單位為mg·L－1。82.04、9.27為葉綠素a、b在波長663nm下的比吸收系數(shù)。16.75、45.6為葉綠素a、b在波長645nm下的比吸收系數(shù)。解（1）、(2)式聯(lián)立方程，得：Ca=12.70A663–2.69A645……(3)Cb=22.9A645–4.68A663……(4)CT=Ca+Cb=20.21A645+8.02A663……(5)Ca、Cb為葉綠素a、b的濃度,CT為總葉綠素濃度，單位:（mg·L－1）’利用上面(3)、（4）、（5）式可以分別計算出葉綠素a、b及總葉綠素濃度。實驗原理

1.材料：菠菜葉、芥菜葉或其他植物葉片2.儀器設備：電子分析天平；分光光度計；恒溫水浴鍋；25ml刻度試管；剪刀；試管；試管架；玻棒等。3.試劑：80﹪乙醇。材料、儀器設備及試劑

1.葉綠素的提取從植株上選取有代表性的葉片數(shù)張（除去粗大葉脈）剪碎后混勻，快速稱取0.2g(可視樣品葉綠素含量高低而增減用量)，置于25ml刻度試管中，加80﹪乙醇10ml左右，加塞放入60～80℃水浴中保溫提取葉綠素（或常溫下放在暗處浸提12～24h），至葉片全部褪綠為止，冷卻后，用80﹪乙醇定容至刻度，此液即為葉綠素提取液。2.測定取光徑為1cm的比色杯，加入葉綠素提取液距比色杯口1cm處，以80﹪乙醇作為對照，分別于663nm及645nm波長下測定吸光度（A）值。實驗步驟將測定得到的吸光度A663、A645值分別代入上面(3)、(4)、（5）式計算出Ca

、Cb及CT(即葉綠素a、b及葉綠素總量濃度)。再按下式計算出葉綠素a、b及葉綠素總含量。Ca×提取液總量(ml)葉綠素a含量（mg·g－1Fw）=—————————————

樣品鮮重（g）×1000Cb×提取液總量(ml)葉綠素b含量（mg·g－1Fw）=————————————樣品鮮重（g）×1000CT×提取液總量(ml)

葉綠素總含量（mg·g－1Fw）=————————————樣品鮮重（g）×1000最后計算出葉綠素a/葉綠素b的比值，并加以分析。結果計算任務四蔬菜中農藥殘留物的檢測實驗目的探討農藥殘留的快速檢測方法；應用酶抑制法，確定分析方案，從而達到掌握殘留農藥測定的方法。

課前準備

1.閱讀本實驗。實驗中所需要的主要儀器

。

2.實驗室制備原理（用化學方程式表示）

。

3.本實驗需要的藥品有:

。

實驗內容1.查閱文獻通過查閱有關文獻資料，對蔬菜中農藥殘留物的檢測擬定實驗方案。2.蔬菜中農藥殘留物的檢測對所提取的樣品，根據(jù)擬定的方法進行分離，在實驗室內由學生自己準備所需的儀器和試劑，經(jīng)實驗教師同意后，學生獨立進行實驗，確定農藥殘留。實驗時強調學生注意操作安全。注意事項1.農藥殘留速測儀的檢測原理是利用速測卡中的膽堿酯酶（白色藥片）可催化靛酚乙酸酯（紅色藥片）水解為乙酸和靛酚，由于有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽堿酯酶的活性有強烈的抑制作用，因此，根據(jù)顏色變化程度的不同，即可判斷樣品中含有機磷或氨基甲酸酯類農藥的殘留情況。2.我國生產了很多快速測定蔬菜中農藥殘留物的檢測儀，可查有關資料了解用途及操作方法。提問1.殘留農藥速測儀的測定原理是什么？2.殘留農藥速測儀的操作步驟有哪些？任務五玉米秸稈制備乙醇

實