氣相色譜實驗風油精中薄荷腦的含量測定——氣相色譜法實驗?zāi)康?.掌握氣相色譜法測定的方法和原理。2.掌握薄荷腦含量測定的操作條件及要點。【處方】

薄荷腦320g水楊酸甲酯260g樟腦30g桉油30g丁香酚30g

【制法】

以上五味，取薄荷腦、樟腦，加入液狀石臘適量，再加入桉油、水楊酸甲酯、丁香酚、香精100g、葉綠素適量，加液狀石臘使成1000g,混勻，靜置24小時，取澄清液，分裝，即得。

實驗原理內(nèi)標法

內(nèi)標物要滿足以下要求：（a）試樣中不含有該物質(zhì)；（b）與被測組分性質(zhì)比較接近；（c）不與試樣發(fā)生化學反應(yīng)；（d）出峰位置應(yīng)位于被測組分附近，且無組分峰影響。實驗原理校正因子（f）=(As/Cs)/(AR/CR)

AR

為對照品的峰面積或峰高；

Cs為內(nèi)標物質(zhì)的濃度；

CR為對照品的濃度。同一檢測器對不同物質(zhì)的響應(yīng)值不同，所以當相同質(zhì)量的不同物質(zhì)通過檢測器時，產(chǎn)生的峰面積（或峰高）不一定相等。為使峰面積能夠準確地反映待測組分的含量，就必須先用已知量的待測組分測定在所用色譜條件下的峰面積，計算定量校正因子。

實驗原理含量（CX）=f?AX/(As/Cs)標示量%=C測/C標*100%實驗材料儀器：GC112A氣相色譜儀

氫火焰離子

檢測器。微量注射器試藥：風油精（含薄荷腦32%）；薄荷腦對照品正辛醇、乙酸乙酯薄荷腦分子質(zhì)量:156.26沸點:212℃

正辛醇沸點196℃。

實驗步驟：（一）毛細管柱色譜條件色譜柱：SE-30熔融石英毛細管柱（30m×0.32mmI.D.×0.33μm，T300℃）；

柱溫：120℃;

進樣口溫度：200℃;

氫火焰檢測器溫度：200℃;

載氣：氮氣;

進樣量：1μl。內(nèi)徑液膜厚度實驗步驟：（二）系統(tǒng)適用性試驗按薄荷腦計算理論塔板數(shù)不得低于300，在此條件下薄荷腦與內(nèi)標峰的分離度應(yīng)大于2。實驗步驟：（三）校正因子的測定取薄荷腦對照品50mg，精密稱定，置10ml容量瓶中，精密加內(nèi)標正辛醇100μl，密塞，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度。取1μl注入氣相色譜系統(tǒng)，計算校正因子。實驗步驟：（四）樣品含量測定精密吸取風油精樣品100μl，置10ml量瓶中，精密加內(nèi)標正辛醇100μl，密塞，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度。取1μl注入氣相色譜儀測定，按內(nèi)標法計算標示量百分含量。實驗結(jié)果：校正因子計算校正因子（f）=(As/Cs)/(AR/CR)

含量（CX）=f?AX/(As/Cs)思考題：1、內(nèi)標法定量的原理、方法及特點。特點：(1)典型的質(zhì)量型檢測器;(2)對有機含碳化合物具有很高的靈敏度;其響應(yīng)與碳原子數(shù)成正比。（烴類和雜原子有機物不同）(3)無機氣體、水、四氯化碳等含氫少或不含氫的物質(zhì)靈敏度低或不響應(yīng)。(4)比熱導(dǎo)檢測器的靈敏度高出近3個數(shù)量級，檢測下限可達10-12g·mL-1。氫焰檢測器的結(jié)構(gòu)

(1)在發(fā)射極和收集極之間加有一定的直流電壓（50－350V）構(gòu)成一個外加電場。

(2)氫焰檢測器需要用到三種氣體：

N2：載氣攜帶試樣組分；

H2

：為燃氣；空氣：助燃氣。

使用時需要調(diào)整三者的比例關(guān)系，檢測器靈敏度達到最佳。氫焰檢測器的原理

(1)當含有機物CnHm的載氣由噴嘴噴出進入火焰時，在C層發(fā)生裂解反應(yīng)產(chǎn)生自由基：

CnHm──→·CH(2)產(chǎn)生的自由基在D層火焰中與外面擴散進來的激發(fā)態(tài)原子氧或分子氧發(fā)生如下反應(yīng)：

·CH+O──→CHO++e(3)生成的正離子CHO+與火焰中大量水分子碰撞而發(fā)生分子離子反應(yīng)：

CHO++H2O──→H3O++COA區(qū)：預(yù)熱區(qū)B層：點燃火焰C層：熱裂解區(qū)：溫度最高D層：反應(yīng)區(qū)(4)化學電離產(chǎn)生的正離子和電子在外加恒定直流電場的作用下分別向兩極定向運動而產(chǎn)生微電流（約10-6～10-14A）；(5)在一定范圍內(nèi)，微電流的大小與進入離子室的被測組分質(zhì)量成正比，所以氫焰檢測器是質(zhì)量型檢測器。(6)

組分在氫焰中的電離效率很低，大約五十萬分之一的碳原子被電離。(7)離子電流信號輸出到記錄儀，得到峰面積與組分質(zhì)量成正比的色譜流出曲線。A區(qū)：預(yù)熱區(qū)B層：點燃火焰C層：熱裂解區(qū)：溫度最高D層：反應(yīng)區(qū)影響氫焰檢測器靈敏度的因素

各種氣體流速和配比的選擇

N2流速的選