ICS

65.150CCS

B

51DB33 DB33/T

2300—2020單胞藻規模化培養技術規范Technical

large-scale

cultivation

microalgae 浙江省市場監督管理局發

布DB33/T

2300—2020 本標準按照GB/T

1.1—2020《標準化工作導則

第1草。本標準由浙江省農業農村廳提出。本標準由浙江省水產標準化技術委員會歸口。本標準起草單位：浙江省海洋水產養殖研究所，浙江永興水產種業有限公司，寧波大學。本標準主要起草人：柯愛英、徐繼林、周朝生、肖國強、蔡景波、黃振華、曾國權、胡園、朱潔、吳越、王瑤華。DB33/T

2300—20201 范圍本標準規定了單胞藻規模化培養的培養條件和設施、培養方法、日常管理、收獲和保存等內容。本標準適用于水產苗種培育和養殖生產中的單胞藻培養。2規范性引用文件標準。GB

11607 漁業水質標準NY

5051 無公害食品

淡水養殖用水水質NY

5052 無公害食品海水養殖用水水質3術語與定義

下列術語和定義適用于本標準。指數生長期細胞迅速生長繁殖，藻細胞數量隨著培養時間的延長呈幾何級數遞增的時期。一級培養以0.3

L～

L廣口瓶或三角燒瓶作培養容器，嚴格消毒，用濾紙封口的培養方式。二級培養用容積為50

L～

L白塑料桶、尼龍袋、光生物反應器等作為培養容器，嚴格消毒，連續充氣的培養方式。3.4三級培養采用育苗場現有的水泥培養池、帆布池等作為培養容器，消毒，連續充氣的培養方式。4 培養條件和設施4.1 培養用水海水應符合GB

11607、NY

5052規定。淡水應符合GB

11607、NY

5051規定。4.2 設施設備DB33/T

2300—2020明亮，通風條件好，配備顯微鏡、生物培養箱、空調、冰箱等設備。配套供水、供氣、供電設施。4.3 培養容器一級培養的容器主要有

L～

L10

L～20

L玻璃廣口瓶、

L～100

L白色塑料桶、光生物反應器等；三級大面積培養主要采用水泥池、帆布池等。5 培養方法5.1 器具消毒5.1.1 高溫消毒法 培養用的玻璃器皿和金屬工具適用于煮沸消毒、烘箱干燥消毒、高壓滅菌等高溫消毒； 培養用的充氣管、散氣石適用于煮沸消毒。消毒的方法見附錄

A。5.1.2 化學藥品消毒法 酒精消毒適用于手、鑷子、瓶口的消毒。 玻璃缸、水泥池、管道等消毒。消毒方法見附錄

A。5.2 培養用水消毒5.2.1 加熱消毒法 一級培養用的水經砂濾、脫脂棉過濾，煮沸

5

分鐘～10

分鐘，冷卻后使用。 二級培養用水經砂濾、

目篩絹袋過濾煮沸

5

分鐘～

5.2.2 漂白粉或漂白片消毒容積

L～

L

塑料桶，加水后用漂白片消毒，有效氯濃度為

mg/L～

mg/L，中和去除余氯后使用。 水泥池加水后潑灑

目過濾過的漂白水，有效氯濃度為

mg/L～30

mg/L，中和去除余氯后使用。 光生物反應器直接注入有效氯濃度為

50

mg/L～

mg/L

漂白水消毒，中和去除余氯后使用。光生物反應器長期培養藻類后消毒采用鹽酸

1000

mg/L+250

mg/L

次氯酸鈉混合消毒液在緩沖罐里，用水泵循環到管道里，消毒混合液可以重復使用。5.3 接種5.3.1藻種質量藻種應無污染，無雜藻、藻細胞無附壁。5.3.2 接種濃度接種時間宜在早上6：00～10：00進行，藻種在指數生長后期，一級培養接種濃度為1：5～1：10；二級培養接種濃度1：10～1：50；三級培養根據天氣、生產需要來接種，接種濃度1：15～1：30。5.4 培養條件水產養殖常用微藻種類生態條件參數見附錄B。5.5培養液常用培養液配方見附錄C、附錄D。6 日常管理DB33/T

2300—20206.1 觀察與處理6.1.1 觀察有無附壁、沉淀、菌膜和敵害生物，如發現異常應立即舍棄，并及時重新接種培養。6.1.2 一級培養4

6

5

天～7

天用完。6.1.3 二級培養氣量微沸、封口，定期用漂白水培養場所進行消毒。6.1.4 三級培養控溫，用遮光簾或遮陽布等設施，調節光照，充氣微沸。6.2 記錄和補充培養液次接種、培養液添加進行記錄。7 收獲和保存7.1 收獲于指數生長期收獲。7.2 保存培養的單胞藻利用目尼龍篩網富集、暗沉淀、加

g/L～1.0

g/L明礬或氫氧化鈣收集藻類，冷藏或冷凍保存，以備隨時投喂使用。8 技術模式圖單胞藻規模化培養技術模式圖見附錄E。項目名稱煮沸烘箱干燥高壓滅菌高錳酸鉀漂白粉或漂白片鹽酸

120

121

20

10

mg/L

10

10

mg/L

12

120

121

20

10

mg/L

10

10

mg/L

12

10

mg/L

10

10

mg/L

12

10

mg/L

10

10

mg/L

12

10

mg/L

10

10

mg/L

12

DB33/T

2300—2020AA附 錄A（資料性）單胞藻培養常用消毒方法單胞藻培養常用消毒方法見表表A.1 單胞藻培養常用消毒方法PH適溫范圍（℃）7.010.0251510007.010.0282010006.5101050006.5101050007.010.0201510007.010.0201530007.010.0101030007.0151030007.010.0101030007.0351030007.0108030007.010.0301010007.010.0101010007.010.0301010006.0104510007.0103630005.0-7.5101000-10000DB33/T

2300—2020BB附錄B（資料性）水產養殖常用微藻種類生態條件參數水產養殖常用微藻種類生態條件參數見表B.1。表B.1表B.1

水產養殖常用微藻種類生態條件參數

mg

mg

mg100.0050.0020.0015.0010.003.00硫酸亞鐵或檸檬酸鐵2.502.505EDTA20.0010.0010.0010.00

B10.10.05

B20.00050.00051.00

90.0050.0020.0020.004.003.00硫酸亞鐵或檸檬酸鐵2.502.505EDTA20.0010.0010.0010.00

B10.10.001

B20.00050.0000081.0010.0010.0010.00

100.0020.0020.0020.004.003.00硫酸亞鐵或檸檬酸鐵2.502.501.00.250.25EDTA20.0010.0020.0020.00

B10.10.001

B20.00050.0000081.00

DB33/T

2300—2020CC附錄C（資料性）常用海洋微藻培養液配方常用海洋微藻培養液配方見表。表C.1表C.1

常用海洋微藻培養液配方mg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/L1%ml200103080251000.5+2DB33/T

2300—2020D附 錄 D（資料性）常用淡水藻類水生

4

號培養液配方常用淡水藻類水生4號培養液配方見表D.1。表表D.1

常用淡水藻類水生4號培養液配方將保種室中培養的藻種擴種到0.3

經過脫脂棉過濾煮沸，培養液水燒

20

毒或漂白消