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丙泊酚對大鼠急性腦損傷S100β蛋白、腦組織總鈣、含水量及組織形態學的影響目的:觀察丙泊酚對大鼠急性腦損傷S100β蛋白含量、腦組織總鈣含量、腦含水量及組織形態學的變化,探討丙泊酚對大鼠急性腦損傷腦組織的影響。方法:健康雄性SD大鼠84只采用隨機數字表法分為六組,每組14只(n=14)。假手術組(S組)、腦損傷組(I組)、脂肪乳組(F組)、丙泊酚低劑量組(L組)、丙泊酚中劑量組(M組)和丙泊酚高劑量組(H組)。采用改良Feeney法自由落體腦損傷裝置,制備大鼠腦損傷模型:SD大鼠采用10%水合氯醛以350mg/kg腹腔內注射進行麻醉,待其翻正反射、睫毛反射消失提示麻醉成功。將大鼠仰臥位固定于手術臺上,氣管切開插管,接小動物呼吸機,潮氣量2~3ml/100g,通氣頻率50~60次/min,吸呼比1:2,分離左側股靜脈,并置管用于靜脈泵藥;分離右側頸總動脈并置管用于采集血樣。動、靜脈置管后,俯臥位固定大鼠,碘伏消毒皮膚,無菌操作,正中切開,剝離骨膜,暴露右頂骨,用牙科鉆在冠狀縫后1.5mm,中線旁2.5mm處鉆一直徑5mm骨窗,保持硬膜完整。墊片置于骨窗上,用20g砝碼于30cm高處沿著套管自由墜落,致右頂葉腦損傷,打擊力為600g·cm,打擊后用骨蠟封閉骨窗,縫合頭皮。S組僅顱骨開窗后用骨蠟封閉,不實施打擊,經左側股靜脈以3.49mlkg-1h-1的速度持續泵注等容量的0.9%生理鹽水60min;I組在腦損傷模型制備成功后,經左側股靜脈以3.49mlkg-1h-1的速度持續泵注等容量的0.9%生理鹽水60min;F組在腦損傷模型制備成功后,經左側股靜脈以3.49mlkg-1h-1的速度持續泵注等容量的20%脂肪乳60min;L組、M組和H組在腦損傷模型制備成功后,經左側股靜脈分別以17.46mgkg-1h-1、34.92mgkg-1h-1和69.84mgkg-1h-1的速度持續泵注丙泊酚60min。在腦損傷模型制備成功后,各藥物干預15min(T15)和60min(T60)時,每組隨機選取8只大鼠取動脈血各1.5ml,檢測血清S100β蛋白含量,各藥物干預60min時迅速斷頭取腦,檢測腦組織總鈣含量及腦組織含水量;其余6只大鼠光鏡下觀察右側大腦皮層組織形態及病理學變化,其中2只大鼠電鏡下觀察右側大腦皮層神經細胞超微結構變化。結果:1、一般情況:完成實驗的84只大鼠,各組大鼠的體重無統計學意義。2、血清S100β蛋白含量的比較:與S組比較,其余五組在T15和T60時血清S100β蛋白含量均明顯升高(P<0.05);與I組比較,在T15和T60時,L組、M組和H組血清S100β蛋白含量均顯著降低(P<0.05);與F組比較,在T15時和T60時L組、M組和H組血清S100β蛋白含量均顯著降低(P<0.05);與L組比較,在T15時H組血清S100β蛋白含量明顯升高(P<0.05),在T60時M組和H組血清S100β蛋白含量均顯著降低(P<0.05);與M組比較,在T15和T60時H組血清S100β蛋白含量均明顯升高(P<0.05);與T15時比較,L組、M組和H組在T60時血清S100β蛋白含量均顯著減少(P<0.05)。3、腦組織總鈣含量的比較:與S組比較,其余五組腦組織總鈣含量均明顯升高(P<0.05);與I組比較,L組、M組和H組腦組織總鈣含量均顯著降低(P<0.05);與F組比較,L組、M組和H組腦組織總鈣含量均顯著降低(P<0.05);與L組比較,M組和H組腦組織總鈣含量均顯著降低(P<0.05);與M組比較,H組腦組織總鈣含量明顯升高(P<0.05)。4、腦組織含水量的比較:與S組比較,I組、F組和H組腦組織含水量均增多(P<0.05);與I組比較,L組腦組織含水量減少(P<0.05);與F組比較,L組腦組織含水量減少(P<0.05);與L組比較,H組腦組織含水量增多(P<0.05);與M組比較,H組腦組織含水量增多(P<0.05)。5、大腦皮層組織光鏡結果比較:S組:細胞形態結構完整,細胞核無固縮,細胞無水腫;I組:細胞形態結構破壞,細胞核固縮,細胞嚴重水腫,神經細胞變性壞死多見;F組:細胞形態結構破壞,細胞核固縮,細胞嚴重水腫,神經細胞變性壞死多見,與I組無差別;L組:細胞形態結構不規整,細胞核固縮和神經細胞變性壞死較I組和F組減少,細胞水腫較I組和F組減輕;M組:細胞形態結構較規整,細胞核固縮明顯減輕,神經細胞變性壞死較I組和F組少見,細胞水腫較I組和F組明顯減輕,可見正常神經細胞;H組:細胞形態結構不規整,細胞核固縮較I組和F組少見,細胞水腫較I組和F組減輕。丙泊酚各劑量組細胞核固縮、神經細胞變性壞死以及細胞水腫程度M組最輕。6、大腦皮層神經細胞超微結構透射電鏡結果比較:S組:核膜規整,核仁均勻,染色質均勻,粗面內質網及線粒體無擴張,無腫脹,線粒體嵴可見,突觸前膜、突觸后膜及突觸間隙清晰可見。I組:核膜不規則,嚴重內陷,核固縮嚴重,染色質聚集或邊集,線粒體明顯腫脹,空泡樣變,線粒體嵴斷裂,粗面內質網明顯擴張或消失,數目減少,突觸前膜、突觸后膜不清晰,多數有融合,突觸間隙模糊不清。F組:核膜不規則,嚴重內陷,核固縮嚴重,染色質聚集或邊集,線粒體明顯腫脹,空泡樣變,線粒體嵴斷裂,粗面內質網明顯擴張或消失,數目減少,突觸前膜、突觸后膜不清晰,多數有融合,突觸間隙模糊不清,與I組無差別。L組:核膜欠規則,內陷不嚴重,核固縮,染色質聚集或邊集,線粒體腫脹,粗面內質網輕度擴張,個別正常,突觸前膜、突觸后膜尚清晰,突觸間隙大致正常,少數有融合,突觸小泡增多不明顯。M組:核膜較規則,無明顯內陷,偶見核固縮,染色質較均勻,線粒體輕度腫脹,線粒體嵴可見,粗面內質網輕度擴張,數目增多,大多正常,突觸前膜、突觸后膜清晰,突觸間隙大致正常,少數有融合,突觸小泡明顯增多。H組:核膜較完整,內陷不明顯,輕度核固縮,染色質輕度聚集或邊集,線粒體輕度腫脹,線粒體嵴可見,粗面內質網明顯擴張,數量增多,突觸前膜、突觸后膜尚清晰,突觸間隙大致正常,少數有融合,突觸小泡增多不明顯。結論:丙泊酚能夠減輕大

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