鈣對廢用性骨質疏松大鼠血清鈣、血鈣、鋅、銅、akp、肝mda的影響

隨著社會的發展和人民生活水平的提高，人口結構逐漸進入老齡化。老年人疾病，如骨質疏松癥和心腦血管病，迅速增加。這些疾病可能導致骨折和癱瘓，導致骨葬，降低老年人的生活質量。有研究表明,廢用性骨質疏松,使骨的結構損害,骨小梁變細、中斷,數量減少等,從而造成顯微骨折,又有研究證明了骨折患者血清中銅、鋅等微量元素均發生變化。骨質疏松的主要病理機理為骨再建負平衡和骨轉換加快,在這個過程中,血清各微量元素、礦物質含量、各種酶等也都要發生變化。本試驗以廢用性骨質疏松大鼠為模型來研究不同鈣對骨質疏松大鼠體內血鋅、血銅及血AKP(堿性磷酸酶),肝MDA(脂質過氧化物),以及對骨密度的影響,為預防廢用性骨質疏松提供依據。1材料和方法1.1測試對象選用健康SD大鼠50只,雌雄各半,體重200.8±6.3g,由本院實驗動物中心提供。1.2碳酸鈣基礎飼料:新鄉醫學院實驗動物中心提供,含鈣量7.200g/kg。碳酸鈣:上海四聯華工廠,分析純;生物鈣(骨鈣):牛骨+白醋—高溫高壓2小時—絞碎成黃豆粒大小—過膠體磨—過勻質機—漿體—干燥制成牛骨鈣粉劑。1.3推行廢用性皮質松茸模型將實驗動物隨機分為5組,每組10只,單籠喂養。1組為正常對照組,喂基礎飼料;2～5組為實驗組,均捆綁左下肢,制造廢用性骨質疏松模型,其中,2組:陽性對照組,喂基礎飼料。3、4、5組除了喂基礎飼料外,3組每公斤飼料補加碳酸鈣1.440g,4組每公斤飼料補加骨鈣1.440g,5組每公斤飼料補加骨鈣2.880g。1.4堿性磷酸酶活性測定實驗8w,動物眼內毗采血,原子吸收分光光度法測定血清鈣、鋅、銅;硫化巴比妥酸法測丙二醛(MDA,表示脂質過氧化物含量);用改良金氏法測定堿性磷酸酶(AKP)。BH-6012二維掃描單光子骨密度儀(北京核儀器廠)測動物左側后肢干骺處骨礦物含量(BMC,g·cm-1)和骨密度(BMD,g·cm-2),用骨模型校準儀器。以镅(241Am)作為放射源。1.5處理數據用SPSS統計學軟件包進行統計學處理(t檢驗)。2結果2.1測試動物的體重各組動物的身長、體重無顯著性差異(P>0.05)。見表1。2.2骨密度的測量與陰性對照組相比,陽性對照組骨密度、骨礦物質含量顯著降低(P<0.01),而各補鈣組下降不明顯(P>0.05)。見表2。2.3鈣、鋅、銅及鋅比對與陰性對照組比陽性對照組血清鈣、銅、鋅及銅/鋅明顯增高(P<0.05),而血清鋅明顯降低(P<0.05),而補鈣各組血清鈣、鋅、銅及銅/鋅改變不顯著,與陽性對照組比補鈣各組血清鋅明顯增高、銅/鋅比值明顯降低(P<0.05)。見表3。2.4肝mda與血液akp與陰性對照比陽性對照組的肝MDA及血AKP明顯升高;與陽性對照組比各補鈣組的肝MDA及血AKP明顯降低。見表4。3鋅與骨折的關系有報道降低老年人生活質量的重要因素之一是骨折。我國老年骨質疏松的發生率男性為60.72%,女性為90.48%。補鈣是增加骨密度、預防骨折的方便有效方法,但不同的鈣吸收率差別很大,尤其是對廢用性骨骼中鈣利用的研究,對預防廢用性骨骼骨密度降低有著重要的意義。本研究補鈣使各實驗組骨密度和骨礦物質含量顯著升高,各實驗組大鼠骨密度和骨礦物質含量基本達到正常對照組的水平,同時表明補碳酸鈣和生物鈣的作用一致,均可預防和延緩大鼠廢用性骨質疏松的發生。鋅在骨骼中的作用近幾年才被發現。骨是體內鋅存在的主要器官,在骨中鋅不僅存在于細胞內,也存在于膠原基質中,骨骼中鋅的含量較高,機體缺鋅可導致骨代謝異常。體內AKP、膠原酶和碳酸酐酶均參與骨的代謝,這3種酶都是含鋅酶,鋅是酶活性中心的重要組成成分。Relea,P等人發現骨質疏松病人中血鋅水平較低,尿鋅增加。資料表明鋅缺乏可使動物及人體生長發育遲緩,骨齡延遲,缺乏嚴重時尚可引起動物骨骼畸形。鋅缺乏也與婦女經絕期后骨質減少,骨質疏松密切相關。鋅可以促進動物骨發育以及骨鈣化,實驗動物骨折給予鋅治療能加速骨折愈合。并促進體外培養的MC3T3—E1成骨細胞蛋白質及DNA的合成。本實驗中發現廢用性骨質疏松模型中的血清鋅顯著下降,補鈣后使廢用性骨質疏松大鼠的血清鋅顯著升高,不同鈣組間無顯著性差異。銅也是構成許多金屬酶的主要成分,銅缺乏致骨代謝異常。缺銅主要影響成骨細胞的活性,而破骨細胞活性正常。銅也是單胺氧化酶系的重要成分,血清銅的增加,可使體內氧化基的形成增多,導致膜脂質過氧化速率增高,使MDA升高。MDA是反映體內各元素水平的指標。AKP是成骨細胞的標志酶,參與調節鈣化過程,它能分解磷酸鹽化合物,產生游離磷酸,磷酸與細胞間質中鈣結合形成磷酸鈣。AKP是反映成骨細胞在體外分化為成熟骨細胞及基質鈣化的一個重要指標。血清堿性磷酸酶又是一種鋅依賴酶,它可以反映體內鋅的營養狀況。血清堿性磷酸酶主要反映骨形成和骨轉換的指標,它與鈣的營養狀況密切相關。而骨質疏松即是一種顯微骨折,Cu、Zn等元素對其治療也有一定的作用,故在補鈣防治骨質疏