007年農業部農藥檢定所出版的《農藥登記殘留田間試驗標準操作規程》，為國內開展農藥殘留田間試驗的主要標準。到2014年，在農業部農藥檢定所的推動下，國內農藥殘留田間試驗的良好實驗室規范(GLP)才得以真正開展，這對于規范農藥登記殘留田間試驗起到了至關重要的作用。筆者通過近幾年農藥殘留田間試驗的實踐和觀察，對農藥殘留田間試驗提出一些個人看法，以期為國內農藥殘留田間試驗提供一些技術參考。01對試驗單位人員的要求

試驗單位所有人員應為簽訂勞動合同的長期工作人員，并應具備相應的技術能力。試驗單位所有人員不能同時在兩家及以上農藥登記試驗認定單位任職。各單位所承擔的試驗項目應與人員數量匹配，當出現人員較少或其他特殊情形時，人員可以兼職，一般只能兼職1項，但關鍵崗位不能相互兼職，QA不能參加自己負責審核的項目。農藥登記試驗認定單位關鍵崗位指機構負責人、質量保證部門負責人(含質量保證部門人員)、試驗項目負責人、檔案管理員、樣品管理員。02主計劃表

試驗主計劃表反映了試驗的進展情況、工作量以及時間安排等信息總匯，用于統籌安排下一步的試驗內容和計劃，需要記錄試驗當前進展、被試物、專題編號、樣品編號、委托方信息、試驗類型、施藥日期、采樣日期、試驗項目啟動和完成日期、試驗項目負責人、注意事項等，該表用于指導農藥殘留試驗的開展情況。03試驗點的選擇

試驗點的選擇對于試驗的合理性有著重要的作用;試驗點的選擇需要結合《農藥登記殘留試驗區域指南》、優先安排在作物主產區，綜合考慮作物的種植方式、品種、土壤類型、栽培方式、生態和氣候等條件的差異對農藥殘留的影響;對于多個省(區、市)種植的作物，應在不同生態類型的省(區、市)開展試驗;特色小宗作物只在1～2個省(區、市)局部種植的作物，可以在同一省(區、市)的不同區域開展試驗。另外，有一些作物的種植區域比較集中，如陜西蘋果、江西柑橘、四川洋蔥種植面積較大;農藥殘留試驗的登記單位也比較集中，3區、4區、5區農藥殘留登記的單位較多，而2區、7區、8區相對單位較少，如陜西、新疆、江西、四川、福建目前沒有農藥殘留登記單位。因此，選擇試驗點時要特別注意試驗點之間的距離，比如蘋果、春大豆、柑橘種植區域比較集中，要確保相同的耕作方式下試驗點距離應在200km以上，盡量做到分布均勻合理。對于栽培方式，需要設施栽培半數的作物包括韭菜、菠菜、普通白菜、芹菜、番茄、辣椒、茄子、黃瓜、西葫蘆;需要全部設施栽培的作物有草莓。04試驗時間的要求

了解當地作物的種植時間、栽培方式、生育期、防治對象的發生規律，并以此為依據，確定適宜的施藥日期和樣品采集日期。由于目前的農藥登記政策中并未強調農作物殘留試驗的完成時限，很多公司根據委托方要求在1年之內完成試驗，為趕進度而不按照農作物生長規律，脫離生產實際，盲目的進行農藥登記試驗，違背了農作物殘留試驗的基本原則，所獲得的實驗數據不應該被認可。05試驗作物的要求

5.1試驗作物的品種要求對于試驗作物，要求以主栽品種為主，并說明具體的作物類型，比如普通玉米、鮮食玉米、秈稻、粳稻、雜交稻等;筆者經常遇到除草劑的農藥登記，委托方未說明是普通玉米還是鮮食玉米，而很多除草劑在甜玉米、糯玉米上存在明顯的藥害，而且影響作物的生長，對于農藥殘留試驗的準確性是有影響的，這樣登記的農藥對農戶是不負責的。目前，缺少作物品種和殘留量關系的研究，比如普通玉米和鮮食玉米，秈稻、粳稻、雜交稻等殘留量的差異。5.2需要做反轉試驗的作物對于成熟期比較短，需要一次性收獲的作物，如玉米、小麥、水稻、油菜，后期施藥需要做反轉試驗。以玉米后期施藥的殺蟲劑為例，消解+終殘試驗一般需要設計11個小區，其中5個小區采集鮮食玉米和青秸稈，5個小區采集玉米籽粒和秸稈，1個小區作為對照;當采收間隔期相近時，適當可以減少小區數目。5.3需要做標記的作物如果研究農藥的消解動態規律，而且施藥時果實已經形成，需要對施藥的果實做標記，如黃瓜、葡萄、番茄、豇豆、蘑菇、草莓、獼猴桃等。5.4施藥時需要處理的作物對于西瓜，需要扒開葉片進行施藥。06施藥的注意事項

6.1小區的設置和規劃圖試驗小區的布置需要考慮風向、水流方向、施藥次數等，并按照用藥量由低到高的順序排列，避免施藥的漂移而造成小區之間交叉污染，小區不能隨機排列;同時，澆水時不能串灌。試驗必須設對照小區，并與處理區設置有效的隔離帶，避免漂移、揮發和淋溶污染。在畫小區規劃圖時，需要提供試驗地點的經緯度，附近的永久性標志物(建筑或道路)，風向、水流方向、方位，便于追蹤試驗點信息［1］。田間試驗標簽要防水、不褪色、醒目、牢固，并注明項目名稱、專題編號、小區編號、施藥日期等信息。對于水稻插秧前后施藥、水芹、茭白［2］、蓮藕、芡實(雞頭米)、茨菰(慈菇)、荸薺、莼菜、菱角等作物，需要小區之間做田埂，保證不同小區之間的有效隔離，避免處理和對照的相互污染。6.2噴霧器和步數的校準對于使用的噴霧器，首先要對噴霧器進行校準，保證小區內施藥霧滴的均勻性和噴霧器的壓力恒定，而且試驗小區只能噴藥1遍。在施藥時，我們經常會遇到以下問題:第一，小區藥液量不夠，導致無法完成小區面積的施藥;第二，噴霧器剩余一部分無效體積的藥液，無法完全施入小區;第三，噴霧器中的剩余藥液量變少，噴霧器壓力變小，有藥液滴出，導致小區局部濃度偏高而引起噴霧不均勻。對于這些問題，需要保證藥液量必須富余，一般而言，供試品和用水量同比增加1.1倍或1.2倍，保證藥液富余，以便于解決上述的施藥問題［3］。對于步數的校準，需要先把小區進行規劃，計算每小區的施藥時間、行走的次數、單程施藥的時間，盡量做到均勻施藥。6.3施藥方法包括噴霧法、瓶甩法、甩施法、藥土法、撒施法、溝施法、穴施法、灌根、種子處理和包衣等。6.4施藥次數土壤處理劑、種子處理劑(拌種劑)、除草劑或部分植物生長調節劑等，只施藥1次。6.5用水量(或用土量)根據作物大小、施藥方式等確定用水量(或用土量)，如果增加用水量，則用水量和用藥量需要同比增加，確保藥液濃度不變。一些公司沒有規定用水量，這樣是不規范的。6.6施藥時間和生產實際的關系施藥時間根據作物生長期、試驗需要來推算，施藥時間不強求與實際防治的施藥時期相一致。另外，對于需要用樣品采收時間反推施藥時間的試驗，需要了解作物的正常成熟時間，如黃淮海和東北的玉米，黃淮海夏玉米一般在每年的9月底至10月初收獲，而東北春玉米正常采收是10月上中旬，但有的農戶為了等市場價抬高，東北春玉米可以推遲到12月份采收，根據這個收獲時間反推的施藥日期，所測定的農藥殘留量肯定不是實際的情況。目前尚缺少作物播種時間和殘留量的關系研究，比如水稻分為單季稻和雙季稻，黑龍江、遼寧、吉林、江蘇為單季稻，而廣東、廣西為雙季稻，對于雙季稻種植區域，選擇哪一個季節的水稻農藥殘留量更高哪?這是我們需要研究的地方。6.7施藥的照片和要求施藥過程要及時拍照，記錄儀器校準過程、施藥過程、作物的整體和局部生長狀況。6.8施藥時作物的生長狀態和BBCH使用統一規范的施藥時作物生長狀態和BBCH，對于準確確定施藥時間顯著至關重要。目前有2001年UweMeier發布的第二版《Growthstagesofmono－anddicotyledonousplantsBBCHMonograph》，該標準包含了通用作物和其他大部分農作物。如果該標準沒有登記作物，可采用通用作物(如煙草)或類似作物。另外，煙草也可以參考2019年國際煙草科學研究合作中心(/)發布的《AScale

ForCodingGrowthStagesinTobaccoCrops》標準。6.9施藥的有效性施藥的有效性是評價施藥成功的關鍵，具體包括噴霧器是否異常、噴霧器流速和行走速度的校準、施藥時行走速度和施藥時間是否控制好、施藥時環境條件是否符合施藥要求(風速﹤3m/s、溫度﹤40℃)、剩余藥液量是否控制在誤差允許范圍(﹤10%)之內、藥液是否正常施于小區(藥液有無翻倒)、施藥后有無災害性天氣、施藥前后2h有無降雨、小區施藥前后有無灌溉、小區有無使用其他影響試驗的農藥等。07樣品的采收和制備

7.1采收間隔期的設置采收間隔期是與殘留量相關性最顯著的因素，是制定PHI的重要依據，需要根據農作物病、蟲、草害防治的實際情況以及農產品采收適期設置采收間隔期。對于特定生長期施用的農藥，如苗期除草劑、種子包衣劑等，施藥到收獲的間隔即采收間隔期。對于要求標注安全間隔期的農藥，一般設2個采收間隔期測定最終殘留量。當作物可食用部位形成后施用的農藥，應進行殘留消解試驗，以研究農藥在農作物的殘留量變化規律;不推薦安全間隔期的不需要進行消解試驗(種子處理劑、除草劑等作物生長前期使用)。除最終殘留試驗設置的采收間隔期外，消解試驗應在推薦的安全間隔期前后至少再設3個采樣時間點，對于消解較快的農藥，采收間隔期時間應以小時計;對于生長期較短、鮮嫩時采摘的作物，如葉菜類蔬菜、黃瓜、番茄、豇豆、草莓、茶葉等，可以設置0d(2h)、1d、3d、5d、7d、10d、14d;對于生長期較長的作物，如蘋果、柑橘、棉花、糧食作物，可以設置0d(2h)、7d、14d、21d、28d、30d、40d。7.2樣品的采收、制備、保存和運輸樣品的采收要有照片記錄作物的整體和局部生長狀況，并記錄相應的采樣生長狀態和BBCH。在所選的采樣點上有選擇地采樣，應避免采有病蟲害、過小或未成熟的樣品。采集果樹樣品時，需在植株各部位(上、下、內、外、向陽和背陰面)采樣［6］，果實密集的部位相對多采，果實稀少的部位少采樣。同時避免在地頭或邊沿采樣(留0.5m邊緣)，按規定采集所有可食用部分，注意盡可能符合農產品采收實際要求。樣品的采集和制備順序相同，按照對照小區、采收間隔期長的小區、采收間隔短的順序完成，避免造成樣品污染，并戴一次性手套，每采集一個處理的樣品后，應更換一次手套，防止樣品間污染。一旦在對照小區的作物中檢出目標化合物，則本試驗點的所有數據均不能使用。對于樣品的保存，原始記錄需要體現存放地點，冰箱或冷庫的編號與溫度記錄，便于追溯樣品保存情況。對于樣品的運輸，消解動態試驗的樣品要在4h內運到實驗室，超過4h樣品應放在有冰袋的保溫桶內運送。發貨時，盡量采取冷鏈運輸的方式(如沒有冷鏈運輸，盡量多放置冰塊)，并向委托方提供樣品清單、運輸日期、快遞單號以及樣品接收回執，樣品標簽最好是防水的，避免運輸過程中冰塊融化導致標簽模糊，同時樣品標簽要注明公司名稱、專題編號、供試品名稱、試驗地點、作物和相應的基質、樣品類型、室內編號、采收間隔期，室內編號盡量按照主包方公司的方案執行。7.3基質的注意事項需要測定鮮樣和干樣的作物［7］:黃花菜、茶、啤酒花、菊花、玫瑰花、葉類調味料(芫荽、薄荷、羅勒、紫蘇)、根莖類藥用作物(人參、三七、天麻、甘草、半夏、白術、麥冬)、花及果實類藥用作物(金銀花)、煙草。需要測定多種基質的作物［8］:玉米(鮮食玉米、青秸稈、玉米籽粒、秸稈)、大蒜(蒜苗、蒜薹、蒜頭)、大豆(青秸稈、青豆帶莢、秸稈、大豆籽粒)、蓮藕(蓮葉、蓮子、蓮藕)、香蕉(全果和果肉)、柑橘(全果和果肉)。需要測定含水量的作物:玉米秸稈、小麥秸稈、水稻秸稈、櫻桃果肉、大豆秸稈、花生秸稈。需要測定比重的作物:稻類(稻谷中糙米和稻殼)、水果類(測定果肉和籽粒，果肉和果核，如仁果類的山楂，核果類的桃、棗、油桃、杏、枇杷、李子、櫻桃，楊梅，小型果的荔枝、龍眼、黃皮、紅毛丹，中型果的芒果、鱷梨、石榴、番荔枝、西榴蓮、山竹，大型果椰子，帶刺果的菠蘿蜜、榴蓮)。08特殊事故和偏離現象

田間試驗過程中，如遇到天氣和人為的影響，如暴雨、倒伏、試驗材料被偷等特殊事故，要及時記錄，并和委托方溝通，討論是否重新開展試驗。如遇到同一個小區第2次施藥降雨，藥液翻倒等導致田間試驗的偏離現象，要及時記錄偏離的原因、結果、補救措施等，并由懸浮種衣劑評估上述偏離現象對試驗項目的影響和補救措施，保證試驗的完整性和準確性。09前景展望

隨著轉基因玉米和大豆的科研投入，其農藥殘留試驗需要提前布局，這就需要我們考慮是否有開展轉基因試驗的單位資質、農業部門的報備審批、試驗地塊的選