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文檔簡介
煎煮法提取赤芍中芍藥苷的研究【摘要】目的研究常規煎煮法提取赤芍中芍藥苷的方法。方法采用正交實驗設計,考察乙醇濃度、提取時間、提取次數、提取溫度對煎煮法提取芍藥苷的影響并進行優化。結果最佳煎煮法提取赤芍中芍藥苷的工藝是80℃下40%乙醇提取3次,2h/次,芍藥苷提取率為mg/g。結論煎煮仍是常用的中藥提取方法,該研究為赤芍煎煮法提取提供參考的優化方法和工藝條件。
【關鍵詞】煎煮法;赤芍;芍藥苷;正交實驗
赤芍RadixPaeoniaeRubra為毛茛科植物芍藥Paeonialactiflorapau或川赤芍的干燥根,在神農本草經和歷代醫籍文獻中均有記載,其功效為清熱涼血、祛瘀止痛。赤芍有免疫調節作用,常用于腫瘤和血瘀癥的治療,尤以肝病常見。國內外研究表明,其主要有效部位為赤芍總苷[1,2],赤芍總苷中的主要成分為芍藥苷,芍藥苷具有擴張血管、鎮痛鎮靜、抗炎抗潰瘍、解熱解痙、利尿、抗應激性潰瘍病、擴張冠脈血管、對抗急性心肌缺血以及抑制血小板凝聚等多方面作用,而且毒性小,臨床已用于治療冠心病。
赤芍提取方法很多,包括超聲波提取、水煎煮、微波提取等,使用的提取溶劑包括水、乙醇、甲醇等,然而常規的煎煮法仍然是目前藥典和工業實際最常用的提取方法。本文采用L16(45)正交設計實驗,綜合考慮水和乙醇作為溶劑,以乙醇濃度(當濃度為0時即為水煎煮)、提取時間、提取次數和提取溫度等工藝條件為考察因素,以芍藥苷含量為考察指標,確定煎煮法提取赤芍中芍藥苷的最佳工藝。
1儀器與試藥
日本島津液相:LC-10ATvp,SPD-M10Avp二級管陣列檢測器(DAD),SIL-10AD自動進樣器,CLASS-VP色譜處理系統。電子天平,恒溫水浴鍋。赤芍(凈制中藥飲片,杭州中藥飲片廠);芍藥苷對照品(購于中國藥品生物制品檢定所);甲醇(色譜純);乙醇(分析純);桶裝純凈水經Milipore過濾后使用。
2方法與結果
高效液相色譜分析
色譜條件色譜柱:AgilentC18柱(150mm×mm,5μm);流動相:甲醇-%醋酸(30∶70);流速:ml/min;檢測波長:230nm;進樣量:20μl。保留時間約在min。柱溫:30℃。
對照品溶液的配制精密稱取芍藥苷標準樣品mg,置50ml量瓶中,加30%的甲醇定容至刻度,搖勻,即得對照品溶液(mg/ml)。
標準曲線的繪制分別精密稱取芍藥苷標準品g,用30%甲醇定容至50ml(mg/ml),取該溶液依次進樣,,,,,,μl,以色譜峰峰面積積分值對進樣量回歸,回歸方程為Y=-6+349,r=94,線性范圍是~μg。
芍藥苷的提取按正交設計實施實驗,每次稱取赤芍飲片10g,溶劑用量固定為10倍,提取完畢后,用10ml的移液管量取提取液ml,稀釋至ml,然后從稀釋后的提取液中移取1ml于離心管中,12000r/min的條件下離心10min,取樣進行高效液相分析芍藥苷濃度,并計算芍藥苷得率。其中芍藥苷得率為單位質量赤芍藥材提取出來的芍藥苷質量,單位為mg/g。
最佳工藝條件的研究采用L16(45)正交試驗設計表,對乙醇濃度、提取時間、提取次數、提取溫度4個因素進行考察,并進行方差分析。結果見表1~2。
由表1~2可得各因素對芍藥苷提取率的影響大小次序為CBAD,最佳工藝條件為A2B4C3D4,即以40%乙醇為提取溶劑,100℃提取3次,2h/次。由于80℃和100℃下的提取率非常相近,故從能源節約的角度出發,選擇提取溫度80℃。提取次數增加1次,不僅增加10倍溶劑倍量,并且40%乙醇回收過程也較為耗能,提取次數為3次和4次差別在10%以內。綜合考慮,在實際生產中,為了節約能耗和成本,最佳工藝方案為以40%乙醇為提取溶劑,80℃提取3次,2h/次。
按上述最佳工藝條件對芍藥苷的提取工藝進行驗證,結果芍藥苷提取率為mg/g。表1正交實驗表2方差分析
3結論
通過正交實驗分析可知,影響因素順序為提取次數提取時間乙醇濃度提取溫度。綜合考慮節能和提取成本,最佳煎煮法提取赤芍中芍藥苷的工藝為以40%乙醇為提取溶劑,80℃提取3次,2h/次。
【參考文獻】
許惠玉.赤芍總甙對荷瘤鼠細胞因子及誘導細胞凋亡影響因素的實驗研究[D].黑龍江醫藥大學碩士學位論文,2005:22.
劉超,王靜,楊軍.赤芍總甙活血化瘀作用的研究[J].中藥材,2000,23(9):557.
陳赟,瞿海斌.超聲強化水提赤芍中芍藥苷的工藝研究[J].中國藥學雜志,2005,22(7):607.
蔣宇利.正交試驗優選赤芍水煎煮工藝[J].現代中藥研究與,2003,17(5):48
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