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文檔簡介
ng)m——取樣量(g)nng)m——取樣量(g)n——稀釋倍數測定結果用平行測定的算樣中游離的萊克多巴胺,然后用固相萃取柱凈化,BSTFA(雙三試劑盒說明書操作。55試劑和溶液5.1除非另有說明,本法所用機。6.4微量加樣器及配套吸頭:20μL,50μL,100μ DB33B46DB33/T537—2005浙江省質量技術監督局發布...所需濃度。16.6甲苯。16.7其它儀器,同11所需濃度。16.6甲苯。16.7其它儀器,同11。16.8其子倍增器電壓:1506V。....質量掃描圍:30~550U二抗體(5.7)37℃孵育30分鐘后倒出孔中的液體,將微孔架個孔的平行重復,記錄標準和樣品的位置。加入50μL的標準品和 前言本標準由省農業廳提出并歸口。本標準主要起草人:吳平谷、應永飛、朱聰英、陸春波、林仙軍、勇、周文海、浦琴華。...程中,操作步驟可根據試劑盒使用說明書略作調整。7.2樣品處理.1。17.2程中,操作步驟可根據試劑盒使用說明書略作調整。7.2樣品處理.1。17.2試樣凈化同HPLC法11.2。17.3試樣衍生倒置在洗水紙上拍打(每輪拍打3次)以保證完全除去孔中的液體,。保護柱:C18柱,長20mm,徑3.9mm,粒徑5μm,或 動物組織中萊克多巴胺的測定檢測動物組織中萊克多巴胺的方法,規定GC-MS法為仲裁法。本標準適用于動物組織中萊克多巴胺的測定。法為0.005ng-0.05ng,高效液相色譜(HPLC)法為2.5ng-10ng,氣相色譜-質譜(GC-MS)法為2規性引用文件否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本標準。GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方法。3試樣制備肌肉、肝臟、腎臟等動物組織,去筋后切成小塊,制成肉糜后,于-18℃以下溫度冷凍保存。4原理與方法中的萊克多巴胺競爭性地與萊克多巴胺抗體相結合,與標準品或樣品相結合的萊克多巴胺抗體被洗滌去采用萊克多巴胺酶聯免疫試劑盒或類似產品,按試劑盒說明書操作。55試劑和溶液5.2PBS緩沖液:用水10倍稀釋廠商提供的濃縮PBS緩沖液。搖勻,調節pH值至9.5。...與標準或樣品中的萊克多巴胺競爭性地與萊克多巴胺抗體相結合,與l萊克多巴胺貯備液(10.16.1),置50mL與標準或樣品中的萊克多巴胺競爭性地與萊克多巴胺抗體相結合,與l萊克多巴胺貯備液(10.16.1),置50mL棕色容量瓶中682二級水的規定。10.2乙腈:色譜純。10.3甲醇。1010.122%乙酸溶液:5mL冰醋酸加水至250mL,混勻。 6儀器與設備7測定步驟根據所測定樣品及標準數,計算出所需微孔條數,將微孔條插入微孔架,標準和樣品做兩個孔的平行重復,記錄標準和樣品的位置。加入50μL的標準品和處理好的樣品到各自的微孔中,標準和樣品做兩個平行重復。復操作兩遍。最后用吸水紙吸干。操作兩遍。最后用吸水紙吸干。8結果計算以空白(濃度為0的標準溶液)吸光度值為100%計算,折算出各標準和樣品的相對吸光度值。計算出的標準相對吸光度值繪成為一個對應濃度(ng/L)的半對數坐標系統曲線圖,校正曲線在...鈉。10.8戊烷磺酸鈉:色譜級。10.9正己烷。10.10鈉。10.8戊烷磺酸鈉:色譜級。10.9正己烷。10.10氯)=80:20,使用前脫氣。流速:1.0mL/min。激發波為線性。相對應每一個樣品的濃度(ng/L)可以從校正曲線上讀與標準或樣品中的萊克多巴胺競爭性地與萊克多巴胺抗體相結合,與 9方法原理用乙腈提取試樣中的萊克多巴胺,經固相萃取柱凈化,濃縮后用2%乙酸溶液定容,用高效液相色譜-熒光檢測法分離測定。10試劑和溶液10.1除非另有說明,本法所用試劑均為分析純,水為去離子水,符合GB/T6682二級水的規定。):為250μg/mL,置-20℃冰箱中,可保存3個月。刻度,為萊克多巴胺工作液。萊克多巴胺工作溶液...蒸發剩余物加0.1mLBSTFA+1%TMCS(16.3),再加入工作洗液(蒸發剩余物加0.1mLBSTFA+1%TMCS(16.3),再加入工作洗液(5.2)250μL,重復操作兩遍。最后用吸水10.122%乙酸溶液:5mL冰醋酸加水至250mL,混勻。5微孔濾膜0.45μm。11.6渦旋混合器。1固相萃取柱的填 11.10離心管50mL,10mL。);高效液相色譜條件上機測定按外標法積分定量。試樣中萊克多巴胺的含量按下式計算:As×MAi——樣品峰面積;As——對照溶液峰面積;測定結果用平行測定的算術平均值表示,保留2位有效數字。...克多巴胺工作溶液分別準確吸取一定量的標準稀釋液(10.16.譜(GC-MS克多巴胺工作溶液分別準確吸取一定量的標準稀釋液(10.16.譜(GC-MS)法為定量方法,定量限HPLC法為5μg/kg10.122%乙酸溶液:5mL冰醋酸加水至250mL,混勻。-8min。加入50μL反應終止液到微孔中,混合后在450n 實驗室平行測定間的相對偏差不大于10%。實驗室間測定的相對偏差不大于15%。16儀器與試劑16.3BSTFA(雙三甲基硅基三氟乙酰胺)+1%TMCS(三甲基氯硅烷)。16.4萊克多巴胺標準貯備溶液(5mg/mL):準確稱取50mg萊克多巴胺于10mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,存放在冰箱中備用。16.5萊克多巴胺標準工作溶液:取萊克多巴胺標準貯備溶液,用甲醇稀釋至所需濃度。),...紙吸干。加入100μL底物液到微孔中,充分混合并在室溫孵育3第二抗體稀釋液2500紙吸干。加入100μL底物液到微孔中,充分混合并在室溫孵育3第二抗體稀釋液2500倍稀釋第二抗體。6儀器與設備6.1微孔液濃度(μg/mL);M——樣品重量(g);Vs——定容體積4乙酸乙酯。5.5碳酸鹽
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