第九章甾體激類藥的析1. 基本構分類一、構點天然人合成的甾激，均有戊烷多菲母。結構點A環且C4/5與C3酮為αβ-為Δ4-3-3C103多數C10；C11，可能有酮基或基；C17，可能有羥、酮基、酮、α-醇、基乙等人合甾激有在C6或C9上引鹵，C16有C1/2雙；基是α（些是β型表。二類腎性素、雌。1.腎素天腎簡視物，如、。C21-羥基所的（為、、、等）注長作時有了其性作鹽如P（3、JP（13）及USP（23）收載的氫化可的松磷酸鈉、氫化可的松琥珀酸鈉等。有1個CA有Δ4-3-；C17有α-為αC1013甲基C1有Δ1，α、α，α羥基，6、12、16、16β甲基等。（二）雄性激素及蛋白同化激素有。有9個C有8個C原（C0A有Δ4-3-酮C17，個β-，有α。素也稱黃體酮或孕酮，典型藥物為黃體酮。中國藥典（1995版）收載有：黃體酮、醋酸甲羥孕酮、己酸羥孕酮、醋酸甲地孕酮原料及制劑；醋酸氯地孕酮原料等。有1個CA有Δ-3；C17有孕有Δ6，β-、6α-甲基、6β-氯。（四）雌激素炔。有8個C；AC3有；C10，；17有β-。典5，在A有Δ4-3酮于體和一；的在C17上有β-、-乙炔基或甲酮基；有的在C10上無角甲基與激素相同。第二節鑒別驗薄方。應應基與O表作。應C17-基有（可做薄層的顯色劑；2.酮基C3-20-能與4二硝基苯肼異煙肼硫酸苯肼等羰基試劑反應呈色。3甲酮基以及活潑亞甲基。4.有機氟經氧瓶燃燒后生成無機氟化物，在與茜素藍及硝酸亞鈰呈色；5.酚羥基能與重氮磺酸反應生成紅色偶氮染料。二、沉淀反應1.與斐林試劑.銀

C17--。C17--淀.銀。.酸銀有。點測。.成.成.成.解應。法C=C-C=O和C=C-C=C共軛系統，可用規波長和吸度比值法別。六、紅外分光度法典956原中33種。法。：備供，溶。出將展品的值相同。部分甾體類藥物的薄層色譜條件歸納見表示例八、高效液相色譜法保留時間一致鑒別。第三節特殊雜質檢查多由結構改造來，可能帶來原料、中間體、異構體、降解產物以及試劑溶劑等，是一重要項目。此外，有些甾體藥物還規定其他檢查項目。一、游離磷酸示例中國藥典95版收載地塞米松磷酸鈉的檢查，方法為：稱取供試品20m置25ml水1l溶解酸液[精密稱經15℃燥2h酸鉀0.5置1000ml量瓶中（310）1l與溶，稀釋10倍]4l，另一25l量水1l加液2l與1-基-2酚-4-磺溶（取水硫鈉5硫氫鈉943G與1-氨基酚-4-磺酸0.7，充分混合，臨用時取此混合物1.5g加水10ml使溶解，必要時過濾1m，加水在0℃放置30~50mi在m品。鉬在m。酮例：醇10μl（于7g）酮100μl（相當于79m），置100ml量瓶中精密加0.1（ml/ml正丙內質液20l水釋刻，約g置l入液l，于0溫0過%（g），并不得出現甲醇峰。本品在生產工藝中使用大量甲醇和丙酮，因此要檢查。甲醇的檢測限為3.1n。三、雌酮炔雌酮中雌酮檢查方法如下：取本品5mg溶于0.5ml乙醇，加間二硝基苯0.05，再加新配制的稀氫氧化鉀-乙醇液0.5ml，在暗處放置1h后，再加乙醇10ml時，溶液呈現的顏色不得比下面的對照液更深。對照液：不加本品同樣方法制成。原理Zimmermann應的具亞的，的氧化鉀乙醇溶液中，與間二硝基苯反應呈紅~藍色。雌酮是17-酮甾類，因此根據該生色物用的硝褐于判定。四硒五他體甾素由母構的體備具的藥用相同甾關的查非成為激純查重目。TLC和HC為用6中中34中；10中用HC法。1.薄層色譜法95版藥典色譜條件如下：1.薄層板：大多采用硅膠G板，少數采用硅膠G254或硅膠HF4。.仿。.烷-醚-甲醇-；還氯烷-醇仿-甲醇二烷-醋酯-水苯丙等溶。4.顯色：性氮藍液硫酸（2：8或11或3720%硫酸10磷鉬乙醇液。5.檢測法：用堿性四氮唑藍試液作顯色劑時，以展開劑展開后，晾干，在10℃干燥10min，放，以性氮藍液立檢；硫酸乙酸-在0或100℃加熱5min，放冷置紫外光燈365nm）下檢視；用20硫酸顯色時，用展開劑展開后，晾干，噴以20硫酸顯色，在105℃加熱10min后檢視；用10磷鉬酸-以%酸-醇在0℃加熱10~15min在日光下檢視激酸去氧皮質酮地塞米松磷酸鈉倍他米松磷酸鈉等采用硅膠GF254，（2m）。求。例法色：.。.醇-。.（2m，2m，2m，2m，2m。.供試液和對照液的制備：將供試品用甲醇溶解配制成高（1、低（2）二種濃度的溶液。5.判定法：溶液1）顯示的雜質峰數不得超過1個或3個或4個各雜質大（2的12或34或雜積不（2）主的3/4（黃。即雜要。示：第節含量定容分氣色，本比Kbr度。法類兩23-三苯基氯化四氮（235-triphenyltetrazoliumchloid，縮寫為TTC），還原物為溶于的紅色苯甲，λmax在400m，也紅氮（redeaone，縮寫為RT）。藍四氮唑bluetetrazolin，縮寫為T即3，’二甲氧苯基-雙4，’（3，5-二苯基）氯化四氮{3，3-dian-isole-bis[4，4’（3，dhnl）ttzimhre}，其還原物藍雙，λmax在525m左右。TTC和T的結構式如下：（二）反應原理皮質激素C17-為（formaan）。可能路線為α醇酮基，失去2個電子氧化為20酮基-1醛基，在堿催化下，分子內部重排；有部分形成20-羥基-1醛，C20-1鍵斷裂形甾基酸衍物和甲醛以前為主四氮鹽得到2個電子，開形成簪顯。（三）定方法USP（23）采用藍四氮；中藥典（1995版）和P（3）。：.品20m，置100ml量瓶中，加無水乙醇振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得。2.供試品溶液的制備：精密稱取本品4（約相當于醋酸潑尼松龍20m），置燒杯中，加無水乙醇約30ml，置水浴上加熱，充分攪拌，使醋酸潑尼松龍溶解，入l取3量。.各l，醇l液l甲液l在5置n，在m的。論本度影。.C11-酮基反速快于C11-C21-羥基酯化后較母體羥基的應速慢酯化的團為甲基酸磷酯琥珀酯反應更慢。2.溶劑水分影%下不響超過時呈速減慢無溶。3.皮（2h），。.于氧此P氮。.或0下顯，得線較的（3在0應h，數在25℃應44n。法理甾素C3-酮基及某些其他位置基。。法醋：.品2g置1l量加密量取5l，釋至5l，。.龍2g）置約l，入l取3量。.各l分置塞容中置浴中蒸去醇，渣中氯仿10ml，搖溶加0%異甲醇異肼0.g，加酸0.l，使成50l，）1l，搖置55℃暗溫45min，取出放冷至室溫，用氯仿稀釋至25ml，搖勻，照分光光度法，在415nm的波長處分別測定吸收度，計算，即得。（三）討論1.溶劑選擇：無水乙醇和甲醇好，其他受溶解度影響不能采用甲醇穩定性較好，呈色強度較高。2.酸的種類和濃度以及異煙肼的濃度：酸與異煙肼試劑的摩爾比為2：1時可獲得最大吸收度。3.反。4.反應的專屬性：Δ4-3酮的體素室到1h即可量與性煙肼反他時放或后可應全因在條下法對Δ4-3-酮甾具一的屬。三、R反應比色法指雌激素與硫乙醇共熱呈色，用水或稀硫酸稀釋后重新加熱發生顏色改變，并在515nm附近有最大吸收。反應分兩步：與硫乙醇共熱產生黃色，在465nm處有最大吸收；加水或稀硫酸稀釋重新加熱顯桃紅色，在515nm處有最大吸收。由C3到C17（1硫（3紅（4。鐵（ronpheolreagnt）文獻上鐵-柯（ro-oerreagnt。優消。：.品g置l乙并稀釋至刻度搖勻精密量取2ml用無水乙醇稀釋至50ml，搖勻，即得1μ/ml）。2.品0或0水l使仿l搖20min，鈉g濾液l精每l含10μg的溶液，即得。3.測定法：精密量取對照品溶液及供試品溶液各1ml，分別置試管中，在冰浴中冷卻，各精密滴加硫乙醇（4：1）4ml，搖勻顯色后，在530nm的波長處分別測定吸收度，計算，即得。四、紫外分光光度法許多甾體激素分子中存在Δ4-3酮（C=C-C=O和苯（C=C-C=C共扼系統，在附近有最大吸收，可用于含量測定。95版中國藥典中25中甾體激素原料及片劑用該法測定含量占本類藥物分析的28，僅次于HC。需。：品20松g置l醇l約h水液 l一00l在的波長處測定吸收度按醋可松吸收數（E11c）為390計算，即得。五、高效液相色譜法中典9有3用HC該的%。烷醇-水腈-水乙丙醇、甲醇-四氫呋-水、甲醇乙腈水等的混合液。為了提高分離效率、獲得滿意的峰形，有時在流動相中加入的值，紫外直接檢測。醋酸潑尼松龍的測