中華大蟾脲對三唑磷、多效唑的急性毒性試驗

三醇磷的絡合物為c12h16n3o3ps。建模名稱為o，o-二丁基-o-（1-硝基-1、2-4-三羧基）-3-硫代磷酸酯，具有光譜殺螨作用。多效唑(Paclovutrazol或Mulitple-effecttriazole)屬于含氮雜環化合物中的三唑類化合物。分子式為C15H20CIN3O,化學名稱(2RS,3RS)-1-(4-氯苯基)-4,4-二甲基-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-3-戊醇,它不僅具有高效的植物生長調節作用和廣譜性殺菌效應,而且能夠增加植物對溫度,水份和空氣污染等環境因子的抗逆能力,由于多效唑降解慢、易殘留,也可能與三唑磷形成復合損害。這些藥物可通過多種途徑污染水體,從而對水生生物產生危害。蛙類是害蟲的天敵,也是整個生物鏈的一個重要環節,其幼體蝌蚪生活在淺的水蛙、水稻田和水塘邊,這些生活場所大都靠近或者處于農藥施用范圍內,農藥在施用過程中會通過多種途徑進入這些水體,從而直接對蝌蚪產生毒性影響。本文采用中華蟾蜍蝌蚪為試驗對象,測試了不同濃度的三唑磷、多效唑及其混合液對其急性毒性作用,通過多效唑、三唑磷以及它們混合物的毒性比較試驗,找出它們對中華大蟾蜍蝌蚪的一個相對安全的濃度;從環境保護的角度出發,可以指導農田科學用藥。1材料和方法1.1保濕性助劑與整理劑三唑磷為浙江省仙居農藥廠生產的20%三唑磷乳油,生產批號為20030224201,試驗液的濃度按乳油中三唑磷的量計算;多效唑為山東省植物保護站服務部生產的15%可濕性粉劑,生產批號HNP37096-E0037。中華大蟾蜍蝌蚪,捕撈于南昌大學校園旁的淺水塘中,選用體長為(3.01±0.18)cm,體重為(0.228±0.029)g的蝌蚪。試驗時間在2004年3~5月;試驗用水采用南昌大學校園內的池塘水,用雙層紗布過濾,pH值為6.89~7.14,溶解氧5.45mg/L。蒸餾水配母液。室溫:預試驗時為10.5℃,正式試驗時為(19±0.5)℃。1.2新鮮試液的配制蝌蚪先室內放養3d,不投食。根據預試驗設置7個試驗組,濃度見表1和表2,再加一個空白對照組。每組用500mL的燒杯,盛液300mL,放蝌蚪10只。每24h配換新鮮試液。觀察記錄24、48、72和96h蝌蚪死亡數,及時清除死亡蝌蚪。1.3tivd因子公式三唑磷和多效唑的半致死量計算采用改良寇氏法。混合物短效應聯合毒性,采用Marking相加指數法——AI(AditiveIndex)采用以下公式求S(混合毒性生物活性):S=Am/Ai+Bm/Bi式中,Ai、Bi單一毒物LC50值;Am和Bm為混合毒物的LC50值;S為混合毒性生物活性。將公式轉換成相加指數:如果S≤1,那么AI=1/S;如果S≥1,那么AI=S(-1)+1。當AI=0時為相加作用;AI>0為協同作用;AI<0為拮抗作用。2試驗結果2.1蝌蚪感染的癥狀蝌蚪在剛接觸有毒溶液時表現得極其興奮,劇烈的游動,在染毒后一段時間處于高濃度溶液中的蝌蚪出現中毒癥狀,多數蝌蚪呆滯,臥于底部不動,用玻棒觸之,有的尾部劇烈顫抖,在原地游動,有的側游,還有極少個體尾部出現彎曲。處于低濃度組的蝌蚪出現中毒的癥狀較輕,時間也較晚,主要表現為呆滯。而對照組的蝌蚪活動自如。死亡蝌蚪特征:表現為頭部膨大,尾部縮小,彎曲,與身體成一角度。2.2多效唑毒性隨暴露時間的延長毒性三唑磷的LC50在24h為5.15mg/L,48、72、96h均為5.09mg/L,可見藥物對蝌蚪的毒性在24~48h內隨著暴露時間延長毒性加大,48h以后其毒性不隨暴露時間的延長毒性增大。多效唑的LC50在24、48、72h分別為60.12、38.46、34.32mg/L,其毒性隨著暴露時間的延長毒性增大。由表1、2、3、4數據可知,多效唑的毒性遠低于三唑磷。根據我國對農藥毒性的分級標準,多效唑對于中華大蟾蜍蝌蚪屬低毒農藥,三唑磷屬中毒農藥。2.3唑磷和多效唑混合作用在24h內的協同作用將蝌蚪對三唑磷、多效唑及它們混合物24hLC50數據代入公式可以求出S=0.757,AI=1.32,AI>0,所以三唑磷和多效唑的混合作用在24h表現為協同作用。將蝌蚪對三唑磷、多效唑及它們混合物48hLC50數據代入公式可以求出S=0.818,AI=1.22,AI>0,所以三唑磷和多效唑的混合作用在48h仍為協同作用。3唑磷對蝌蚪的協同作用三唑磷對中華大蟾蜍蝌蚪為中等毒性,但毒性不會因暴露時間的延長而毒性加大。如果在同一田間短期內多次反復使用,則可能導致田間濃度過高,而危害到蟾蜍蝌蚪的生命。多效唑對中華大蟾蜍蝌蚪為低毒,但其毒性會隨暴露時間的延長而毒性加大。考慮到多效唑易殘留,其半衰期有0.5~1年,所以在同一塊水田中再次使用多效唑時,毒性有可能累計增加,而給兩棲類蝌蚪生命帶來威脅。特別是如果在此期間同時施用三唑磷,則會造成對蝌蚪的混合毒性,因為三唑磷和多效唑的混合作用在24和48h時均為協同作用,所以在農業生產中要充分注意二者的正確施用。有資料顯示有機磷農藥三唑磷對鱸魚(Latealabroxjaponicus)、梭魚(Lizahaematocheila)、日本鰻鱺苗(Anguillajaponica)、大彈涂魚(Boleophthalmuspectinitostris)的24、48及96h的急性半致死濃度分別為0.089、0.013、0.5~0.7、0.034mg/L;0.082、0.004、0.090、0.009mg/L;0.031、0.0029