第九章生物堿類藥物分析第1頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月掌握**：生物堿類典型藥物的結(jié)構(gòu)特征與性質(zhì)；特征鑒別試驗。了解：其他鑒別反應(yīng)；其他雜質(zhì)檢查方法；學(xué)習(xí)目標(biāo)第2頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)典型藥物的基本結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)和分類（一）苯烴胺類本類藥物的結(jié)構(gòu)特征為N在側(cè)鏈上，為脂肪胺。代表藥物：鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿。第3頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸麻黃堿鹽酸偽麻黃堿性質(zhì)：1.堿性較強，與酸易成鹽；**2.手性特征；*3.氨基醇結(jié)構(gòu)；**4.紫外吸收；*第4頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）、托烷類莨菪醇和莨菪酸縮合而成的脂類化合物代表藥物：硫酸阿托品、氫溴酸東莨菪堿第5頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿性質(zhì)：1.堿性較強，與酸易成鹽；**2.手性特征，阿托品為外消旋體**第6頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）、喹啉類苯并吡啶的衍生物（N在α位）代表藥物如硫酸奎寧、硫酸奎尼丁第7頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸奎寧硫酸奎尼丁性質(zhì)：1.兩份子藥物與一份子二元酸成鹽**2.手性特征；*第8頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（四）、異喹啉類苯并吡啶的衍生物（N在β位）代表性藥物如鹽酸嗎啡、磷酸可待因第9頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸嗎啡磷酸可待因性質(zhì)：1.鹽酸嗎啡具有兩性，堿性較強**第10頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（五）、吲哚類本類藥物的結(jié)構(gòu)特征為苯并吡咯代表藥物如硝酸士的寧、利血平等第11頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月硝酸士的寧利血平性質(zhì)：1.N1堿性較強；2.利血平以游離狀態(tài)存在；1122第12頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（六）、黃嘌呤類咪唑和嘧啶并合的雙雜環(huán)化合物。代表藥物如咖啡因、茶堿第13頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月咖啡因茶堿性質(zhì)：1.以游離堿存在；第14頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月1.堿性**季銨堿＞脂肪胺、脂環(huán)胺＞芳胺、N—芳雜環(huán)＞酰胺麻黃堿、阿托品＞罌粟堿＞咖啡因嗎啡具酸堿兩性二、生物堿的通性：第15頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月2.旋光性

一般多為左旋體有效。3.溶解性游離生物堿不溶或難溶于水，能溶或易溶于有機溶劑，在稀酸中成鹽而溶解生物堿鹽類易溶于水，不溶于有機溶劑。第16頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月典型藥物N原子狀態(tài)堿性苯胺類鹽酸麻黃堿鹽酸偽麻黃堿脂肪仲胺N較強（秋水仙堿除外）托烷類硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿脂環(huán)叔胺N較強喹啉類硫酸奎寧硫酸奎尼丁喹啉N喹核脂環(huán)N弱較強異喹啉類鹽酸嗎啡磷酸可待因脂環(huán)叔胺N較強，酸堿兩性（磷酸可待因沒有）吲哚類硝酸士的寧利血平吲哚N脂環(huán)叔胺N弱較強黃嘌呤類咖啡因茶堿嘌呤N（鄰位有羰基）極弱生物堿堿性比較**第17頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)鑒別試驗一、性狀檢查（一）外觀：形態(tài)、色澤、臭味（二）溶解度第18頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）物理常數(shù)1.熔點例：磷酸可待因（05版藥典）加入20％NaOH溶液至白色沉淀出現(xiàn)，用玻璃棒摩擦器壁使沉淀完全，濾過；沉淀用水洗凈，在105℃干燥1小時，依法測定，熔點為154℃-158℃。2.比旋度例：硫酸奎寧，硫酸奎尼丁3.吸收系數(shù)第19頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）顯色反應(yīng)（二）沉淀反應(yīng)常用的生物堿沉淀試劑為：1.重金屬鹽類，如K2HgI4、KBiI4、I2—KI、二氯化汞等；2.大分子酸類，如磷鉬酸、硅鎢酸等。

第20頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）.雙縮脲反應(yīng)芳環(huán)側(cè)鏈氨基醇結(jié)構(gòu)的特征反應(yīng)鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿藍(lán)紫色第21頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）Vitali反應(yīng)莨菪酸結(jié)構(gòu)的托烷類生物堿的特征反應(yīng)硫酸阿托品，氫溴酸東莨菪堿硫酸阿托品加發(fā)煙硝酸5滴水浴蒸干放冷加乙醇2－3滴潤濕加固體KOH一粒顯深紫色第22頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）綠奎寧反應(yīng)C6位含氧喹啉類生物堿在此生物堿的微酸水溶液中，加微過量溴水或者氯水，再加氨溶液，應(yīng)呈翠綠色。硫酸奎寧溴水或者氯水氨試液翠綠色第23頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（4）紫脲酸銨反應(yīng)黃嘌呤類生物堿第24頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（5）Marquis反應(yīng)含酚羥基的異喹啉生物堿的特征反應(yīng)：鹽酸嗎啡第25頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月三、儀器分析鑒別法（一）UV（二）IR（三）色譜第26頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月第九章生物堿類藥物的分析第一節(jié)典型藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)一、苯烴胺類：1.堿性**2.手性*3.氨基醇結(jié)構(gòu)**4.UV*二、托烷類：1.堿性**2.阿托品為消旋體**三、喹啉類：1.堿性**四、異喹啉類：1.鹽酸嗎啡酸堿兩性**五、吲哚類：1.堿性**六、黃嘌呤類：1.游離**第二節(jié)鑒別試驗一、性狀檢查：外觀、溶解度、物理常數(shù)二、化學(xué)鑒別法1.顯色反應(yīng)；2.沉淀反應(yīng)3.特征鑒別反應(yīng)**（1）雙縮脲反應(yīng)；（2）vitaili反應(yīng)（3）綠奎寧反應(yīng)（4）紫脲酸銨反應(yīng)；（5）Marquis反應(yīng)三、儀器分析法：UV，IR，色譜第27頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月掌握**：非水滴定法的原理、應(yīng)用實例；提取酸堿滴定法的步驟以及常用試劑；了解：其他實驗條件的選擇。學(xué)習(xí)目標(biāo)第28頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查

一、利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異硫酸奎寧中“氯仿-乙醇中不溶物”的檢查硫酸阿托品中“莨菪堿”的檢查*利血平中“氧化產(chǎn)物”的檢查利用旋光度的差異利用溶解行為的差異利用對光選擇性吸收的差異第29頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月二、利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異

1、鹽酸嗎啡中阿撲嗎啡的檢查本品2、鹽酸嗎啡中罌粟酸的檢查罌粟酸遇三氯化鐵顯紅色。要求本品加入試劑，不得顯紅色。加水溶解加NaHCO3+碘試液加乙醚振搖乙醚層不得顯紅色水層不得顯綠色第30頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月三、色譜法硫酸奎寧中其它金雞納堿的檢查

檢查方法：供試品溶液自身稀釋對照法有關(guān)物質(zhì)的檢查方法：HPLC第31頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月旋光法*硫酸阿托品（05版藥典）【檢查】莨菪堿取本品，按干燥品計算，加水制成每1ml中含50mg的溶液，依法測定（附錄ⅥE），旋光度不得過－0.40°。（已知莨菪堿的比旋度為-32.5°）求雜質(zhì)限量是多少？-0.4°-32.5°=0.0123g/ml=12.3mg/ml12.350=24.6%×100%第32頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)含量測定一、非水滴定法（非水堿量法）(一)原理和方法游離生物堿：生成生物堿的高氯酸鹽生物堿鹽：置換滴定，即強酸滴定液置換出與游離堿結(jié)合的較弱的酸。

BH+·A-+HClO4BH+·ClO4-+HA第33頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）測定條件的選擇適用范圍及溶劑的選擇Kb＞10-10時，宜選冰醋酸作為溶劑；Kb為10-10-10-12時，宜選冰醋酸與醋酐的混合液作為溶劑；Kb＜10

-12時，選用醋酐作為溶劑。第34頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月2.酸根的影響酸根在冰醋酸中的酸性：高氯酸＞氫溴酸＞鹽酸＞硫酸＞硝酸＞其它弱酸（磷酸、有機酸）若滴定過程中置換出的HA酸性較強，反應(yīng)將不能進(jìn)行到底，需進(jìn)行一定處理，以排除HA的干擾。第35頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月3.指示終點的方法電位法：玻璃—甘汞電極系統(tǒng)指示劑法：結(jié)晶紫第36頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）、測定實例**1、游離弱堿性生物堿藥物的含量測定（咖啡因）咖啡因的堿性很弱（pKb為14.1），所以選用酸酐－冰醋酸作為溶劑，可使突躍顯著增大。4個N，但只有一個N堿性稍強，故滴定時，1mol的高氯酸相當(dāng)于1mol的咖啡因。第37頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）一般均預(yù)先在溶液中加入Hg(Ac)2的冰醋酸溶液，以消除氫鹵酸對滴定的干擾。※理論量1～3倍2.氫鹵酸鹽的測定汞污染第38頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）篩選溶劑，達(dá)到終點易觀察的目的，同時采用電位法指示終點。（3）部分采用HPLC進(jìn)行含量測定第39頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月取本品約0.15g，精密稱定，加冰醋酸10ml，加熱溶解后，加醋酸汞試液4ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mo1/L）滴定至溶液顯翠綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于20.17mg的C10H15NO·HCl。鹽酸麻黃堿

ChP(2005)第40頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月生物堿的硫酸鹽，在冰醋酸介質(zhì)中只能被滴定至生物堿的硫酸氫鹽。3.硫酸鹽的測定第41頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）硫酸阿托品

HClO4直接滴定時，反應(yīng)摩爾比為1∶1第42頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）硫酸奎寧

HClO4直接滴定時，反應(yīng)摩爾比為1∶3（C20H24N2O2·H+）2·SO42-+3HCLO4→（C20H24N2O2·2H+）·2CLO4-+（C20H24N2O2·2H+）·HSO4-·CLO4-第43頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月

因HNO3具有氧化性，可使指示劑變色，一般電位法指示終點。如硝酸毛果蕓香堿。4.硝酸鹽的測定第44頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月無影響，直接測定。如磷酸可待因。5.磷酸鹽及其有機酸鹽的測定第45頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）原理與方法

二、提取酸堿滴定法適用于堿性比較強的的藥物分析。(Pkb=6-9)第46頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月堿化、分離提取**第47頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月2.滴定**

（1）直接滴定法用于堿性較強的生物堿第48頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）剩余滴定法用于堿性較弱的生物堿第49頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）提取剩余滴定法用于對熱不穩(wěn)定的生物堿第50頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月堿化試劑最常用氨水**優(yōu)點：使大部分生物堿游離，不會和生物堿發(fā)生反應(yīng)，不易乳化，易揮發(fā)，易除去，無干擾。（二）測定條件的選擇第51頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月2.提取溶劑

（1）提取溶劑選擇的原則對生物堿溶解度大，而對其他共存物溶解度盡可能小；與生物堿及堿化試劑不起任何反應(yīng)。（2）常用的提取溶劑最常用氯仿**第52頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月3.選擇合適的指示劑要求：變色范圍在酸性區(qū)域的指示劑；被滴定生物堿的化學(xué)計量點，應(yīng)在選用的指示劑變色范圍內(nèi)。藥品化學(xué)計量點的PH值（PT值）滴定突越的PH值指示劑阿托品5.43.8-7.2甲基紅罌粟堿3.603.8-4.6溴酚藍(lán)注：甲基紅：4.2-6.3，溴酚藍(lán)：3.0-4.6第53頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月4.避免乳化措施：采用堿性弱的堿化試劑；選用不易產(chǎn)生乳化的其他有機溶劑；避免猛烈振搖。如果乳化已經(jīng)出現(xiàn)，則采用以下方法：改變兩相體積比；加入少量乙醇；加入無機鹽；離心；熱敷；加少量酸。第54頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月磷酸可待因糖漿的含量測定用內(nèi)容量移液管，精密量取本品10ml，以水洗出移液管內(nèi)的附著液，置分液漏斗中，加氨試液使成堿性，用氯仿振搖提取至少4次，第一次25ml，以后每次各15ml，至可待因提盡為止，每次得到的氯仿液均用同一份水10ml洗滌，洗液用氯仿5ml振搖提取，合并氯仿液，置水浴上蒸干，精密加硫酸滴定液(0.01mol/L)25ml，加熱溶解，放冷，加甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液(0.02mol/L)滴定。每1ml的硫酸滴定液(0.01mol/L)相當(dāng)于84.88mg的C18H21NO3·H3PO4·3/2H2O。第55頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查一、利用物理性質(zhì)上的差異：旋光性*二、利用化學(xué)性質(zhì)上的差異三、色譜法第四節(jié)含量測定一、非水溶液滴定法（一）原理和方法**：游離堿，生物堿鹽（二）測定條件的選擇1.適用范圍及溶劑的選擇2.酸根的影響3.指示劑方法的選擇（三）測定實例**1.游離堿的測定；2.氫鹵酸鹽的測定；3.硫酸鹽的測定；4.硝酸鹽的測定；5.磷酸及有機酸鹽的測定。二、提取酸堿滴定法1.原理和方法：步驟**2.測定條件的選擇：堿化試劑**、提取溶劑**、指示劑第56頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月三、酸性染料比色法生物堿與某些酸性染料，在一定PH條件下可定量結(jié)合顯色，然后用比色法測定含量。特點：靈敏度高、方便，并且具有一定專屬性和準(zhǔn)確性。適用于含量較低的樣品測定。*第57頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）基本原理在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)中，BH+.In-（水相）B+H+BH+HInH++In-BH+.In-（有機相）+第58頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）測定條件的選擇※關(guān)鍵：酸性染料與有機堿能否定量的形成離子對，并完全被有機溶劑提取。**1.水相最佳PH值的選擇：使生物堿均形成陽離子，且酸性染料電離足夠陰離子。第59頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月2.酸性染料種類的要求：與生物堿定量結(jié)合；生成的離子對在有機相中溶解度較大，而染料自身在有機相中不溶或很少溶解；生成的離子對有較高吸光度。常用：溴麝香草酚藍(lán)、甲基橙、溴甲酚綠等第60頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月3.有機溶劑的選擇要求：對離子對的提取率高；不能或極少與水互溶。常用三氯甲烷、二氯甲烷等。4.水分的存在完全無水第61頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月5.有色雜質(zhì)的存在為了防止有色雜質(zhì)的干擾。可對酸性染料進(jìn)行處理：用有機溶劑提取，除去有色雜質(zhì)。第62頁，課件共66頁，創(chuàng)作于2023年2月供試品溶液的制備：取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（