不同加工方法對金銀花品質的影響

金銀花是廢灌木科的一種花卉和植物。金銀花自古被譽為清熱解毒的良藥。它性甘寒氣芳香,甘寒清熱而不傷胃,芳香透達又可祛邪。金銀花既能宣散風熱,還善清解血毒,用于各種熱性病,如身熱、發疹、發斑、熱毒瘡癰、咽喉腫痛等證,均效果顯著。主產于山東,河南。主要成分為綠原酸,木樨草苷,揮發油等成分。傳統的產地加工方法有自然曬干、烘干、硫黃熏后干燥,微波干燥等。市售金銀花藥材因產地加工方法不同,其內在質量特別是木樨草苷的含量差別很大。木樨草苷的作用廣泛,有較強的殺菌消炎,解熱鎮痛的功效。按2010年版《中國藥典》規定,金銀花中的標志性成分是綠原酸和木樨草苷,而是否含有木樨草苷是區別正品金銀花和同科的山銀花主要化學指標,也是正品金銀花與山銀花等同科植物在療效上差異的主要原因。本文的主要內容就是以木樨草苷為指標,以HPLC法為手段,比較幾種金銀花加工方法對金銀花品質的影響。1實驗設備和材料1.1色譜免疫機構日本島津LC-20AT高效液相色譜系統,日本島津SPD-20A紫外檢測器;日本島津Lcsolution色譜工作站;寧波科勝儀器廠KS-250D超聲波清洗儀;瑞士MettlerAG285十萬分之一電子分析天平,瑞士MettlerAB204-S萬分之一電子分析天平。1.2藥品對照品金銀花藥材(藥材市場購買),1號樣品為自然曬干,2號樣品為烘干,3、4號樣品為硫黃熏后干燥,5、6號為微波干燥;木樨草苷對照品(111720-200603中國藥品生物制品檢定所);乙腈、甲醇為色譜純,美國天地試劑公司;其他試劑均為分析純。2試驗方法和結果2.1流動相及流動相的制備色譜柱為AgilentZORBAXEclipseXDB-Phenyl(4.6mm×250mm,5μm),流動相為以乙腈為流動相A,0.4%冰醋酸溶液為流動相B進行梯度洗脫(見表1),流速1.0mL·min-1,檢測波長350nm。2.2溶液的制備2.2.1對照溶液的制備取木樨草苷對照品適量,精密稱定,加70%乙醇制成每1mL含40μg的溶液,即得。2.2.2超聲處理法取本品細粉末(過四號篩)約2g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇50mL,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率35kHz)1h,放冷,再稱定重量,用70%乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過。精密量取續濾液10mL,回收溶劑至干,殘渣用70%乙醇溶解,轉移至5mL量瓶中,加70%乙醇至刻度,即得。2.3標準曲線及直線回歸分別量取濃度為0.0426mg·mL-1的木樨草苷對照品溶液2、3、5、8、10mL分別置10mL量瓶中,用70%乙醇稀釋至刻度,搖勻,得對照品溶液,分別精密量取10μL注入液相色譜儀,記錄色譜圖,以進樣量X為橫坐標,峰面積Y為縱坐標,繪制曲線,以最小二乘法進行直線回歸,得回歸方程:Y=2793.28052X-21.331,r=0.99999。進樣量在0.0852~0.4260μg范圍內與峰面積呈良好的線性關系。2.4木草苷對照品溶液精密量取0.0426mg·mL-1的木樨草苷對照品溶液10μL,注入液相色譜儀,連續進樣6次。實驗結果為:木樨草苷峰面積的RSD=0.19%(n=6)。2.5木草苷峰面積的測定取本品供試溶液分別在0、2、4、6、8、24h,精密量取10μL,進入液相色譜儀測定,實驗結果為:木樨草苷峰面積的RSD=0.26%(n=6)。2.6木草苷樹高值rsd取同一供試品精密稱取6份,按上述方法測定,6次平行試驗測得木樨草苷平均含量為0.3308mg·g-1,RSD=0.07%(n=6)。2.7%乙醇+80%乙醇法分別精密稱取木樨草苷對照品4.12mg、4.28mg、4.16mg、4.12mg、4.36mg、4.38mg于6個10mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,分別精密取上述對照品溶液1mL于6個具塞錐形瓶中,水浴蒸干溶劑,分別稱取6份供試品中粉各1g,精密稱定,分別置上述6個具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇50mL,密塞,稱定重量,超聲處理(功率500W,頻率40kHz)1h,放冷,再稱定重量,用70%乙醇補足減失的重量,精密量取續濾液10mL,回收溶劑至干,殘渣用70%乙醇溶解,轉移至5mL量瓶中,加70%乙醇至刻度,即得。分別吸取對照品溶液和供試品溶液10μL,注入高效液相色譜儀測定,結果見表2。2.8木草苷的測定將1~6號樣品照2.2.2項下的供試品制備方法制備供試品溶液,分別吸取對照品溶液和供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀測定,計算供試品中木樨草苷的百分含量,結果見圖1及表3。3微波干燥法加工木草苷《中國藥典》2010年版中金銀花項下規定的木樨草苷的含量應不少于0.050%,從表2可見,不同加工方法對金銀花中木樨草苷的含量影響較大。硫黃熏后干燥的樣品