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酶類藥物的

鹽析純化主講：萊蕪職業技術學院孫靜（副教授）瑞陽制藥有限公司田真（高級工）在蛋白質水溶液中加入中性鹽，隨著鹽濃度增大而使蛋白質沉淀析出的現象。鹽

析2）中性鹽離子破壞蛋白質表面水膜1）中性鹽離子中和蛋白質表面電荷鹽

析常用中性鹽(NH4)2SO4,Na2SO4，MgSO4，NaH2PO4，NaCl，Na3PO4,K3PO4。①溶解度大：溶解度隨溫度變化小，低溫下仍具有較大的溶解度，②分離效果好。硫酸銨分段鹽析效果也比其他鹽好，一步可除去75%的雜蛋白③不易引起蛋白質變性：0-4°C④價格便宜。(NH4)2SO4：鹽

析蛋白質的濃度2.5%-3.0%的蛋白質濃度溫度溫度提高利于蛋白質沉淀室溫（10~25℃）少數不穩定、易失活的物質：低溫（0-4℃）pH溶液PH值調到目的蛋白的等電點處鹽濃度硫酸銨飽和度不同，析出的成分不同

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0204影響鹽析因素制藥企業鹽析精益求精匠心制藥操作：C級潔凈區的粗純間設備：鹽析罐對破壁提取崗位生產的稀酶液（即上清液）進行鹽析操作，以達到沉淀目標蛋白的目的鹽析崗位精益求精匠心制藥鹽析操作鹽析清場一次鹽析二次鹽析更衣生產前檢查清場準備工作鹽析操作硫酸銨分級鹽析一次鹽析：硫酸銨濃度為55%（飽和度）二次鹽析硫酸銨的濃度為90％（飽和度）。鹽析操作①更衣②檢查地面有無上批次遺留物②檢查桌面有無上批次遺留物③檢查崗位清場合格證④檢查設備狀態標志⑤檢查地漏⑥檢查溫濕度是否符合要求⑦鹽析崗位操作及清潔SOP：齊全⑧鹽析罐操作及清潔SOP：齊全生產前準備（更衣

檢查）一次鹽析操作鹽析操作二次鹽析操作鹽析操作清

場孫老師（出鏡）：感謝田老師的操作及講解。固體投鹽法先將鹽粒研細，在不斷攪拌下分批緩慢加入到溶液中，避免局部過濃造成共沉淀和某些蛋白質變性。A鹽析后的蛋白質最好盡快進行脫鹽處理，以免變性，采用超濾和離子層析處理B操作注意事項實事求是，不提前，不滯后生產記錄21用量及鹽處理固體硫酸銨加入法（量大時）加入飽和硫酸銨溶液法（量小時）硫酸銨用化學法將重金屬除去（如通入H2S后過濾），再將硫酸銨重結晶備用。操作注意事項3.嚴格按操作規程操作操作注意事項總

結●生產前檢查●一次鹽析●二次鹽析●清洗鹽析原理及影響因素鹽析崗位鹽析操作注意事項鹽析操作●固體投鹽法，先將鹽粒研細，在不斷攪拌下分批緩慢加入到溶液中●鹽析后的蛋白質采用超濾和離子層析處理●指在蛋白質水溶液中加入中性鹽，隨著鹽濃度增大而使蛋白質沉淀析出的現象。●鹽濃度、蛋白質

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