六堡茶的化學成分及生物活性研究進展

馬婉君，馬士成，劉春梅，龍志榮，唐保軍，林智，呂海鵬六堡茶的化學成分及生物活性研究進展馬婉君1,2，馬士成3,4，劉春梅4，龍志榮3，唐保軍4，林智1*，呂海鵬1*1.中國農業科學院茶葉研究所，農業部茶樹生物學與資源利用重點實驗室，浙江杭州310008；2.中國農業科學院研究生院，北京100081；3.梧州市茶產業發展服務中心，廣西梧州543000；4.廣西梧州六堡茶股份有限公司，廣西梧州543000六堡茶是我國廣西壯族自治區的一類特色黑茶產品，產銷歷史悠久，具有獨特的風味品質特征和保健功效，近年來引起了人們的廣泛關注。主要綜述了近20年以來六堡茶的化學成分及其生物活性等方面的研究進展，并初步探討分析了六堡茶未來可能的主要研究方向等。六堡茶；化學成分；生物活性；研究進展六堡茶屬于黑茶類，源自于廣西壯族自治區梧州市蒼梧縣六堡鎮，是選用蒼梧縣群體種、廣西大中葉種及其分離、選育的品種、品系茶樹[(L.)O.Kuntze]的鮮葉為原料，經殺青、初揉、堆悶、復揉、干燥工藝制成毛茶，再經過篩選、拼配、汽蒸（或不汽蒸）、渥堆、汽蒸、壓制成型（或不壓制成型）、陳化、成品包裝等工藝加工制成的具有獨特品質特征的黑茶產品[1]，是我國傳統歷史名茶之一，生產和飲用歷史悠久。六堡茶有數百年對外銷售的歷史，主要通過水運出口馬來西亞、新加坡、日本等地。經過近10年來的快速發展，六堡茶產業規模不斷壯大。據報道，2018年梧州市六堡茶產量1.52萬t，產業直接產值達19億元，綜合產值55億元[2]；六堡茶區域公用品牌價值達20.17億元，居中國茶葉區域公用品牌價值第29位[3]。六堡茶一般通過傳統工藝初制加工為毛茶后再經過精制陳化形成六堡茶成品茶。六堡茶成品茶的品質特征主要包括：干茶色澤黑褐光潤，湯色紅濃似琥珀，滋味醇和甘爽，香氣陳醇具有檳榔香[4-5]（圖1）。特定的茶樹品種、加工工藝和微生物菌群等共同奠定了六堡茶重要的化學物質基礎，賦予六堡茶獨特的風味品質和保健功效。本文重點綜述了近20年以來六堡茶的化學成分及生物活性等方面的研究進展，旨在為今后六堡茶的品質化學研究等提供參考。圖1六堡茶成品茶圖示1六堡茶的化學成分研究進展1.1六堡茶的揮發性成分后發酵過程中因微生物的參與，黑茶香氣成分的種類與化學組成等與綠茶和紅茶有很大的差異[6]。六堡茶的香氣品質特征除“醇陳”之外，還有一些產品具有松煙和檳榔氣味[7]，其中“松煙香”是采用傳統松柴明火干燥的六堡茶所含有的特殊香氣，而“檳榔香”被認為是六堡茶香氣品質優異的香氣特征。目前，在六堡茶的香氣成分研究方面已經有較多的研究報道[8-20]，例如科研工作者采用HS-SPME/GC-MS和SDE/GC-MS等分析技術手段，從六堡茶中鑒定出了大量的揮發性成分，其中主要有醇類、醛類、酯類、甲氧基苯類化合物等；研究表明六堡茶中含量豐富的香氣成分有芳樟醇、-雪松醇、-萜品醇、-紫羅蘭酮、1,2,3-三甲氧基苯、1,2,3-三甲氧基-5-甲基苯、4-乙基-1,2-二甲氧基苯、己醛、苯甲醛、苯乙醛、(,)-2,4-庚二烯醛、二氫獼猴桃內酯、水楊酸甲酯以及檸檬烯等（表1）。黃林杰等[8]、劉澤森等[9]分別研究了六堡茶中檳榔香的特征物質成分，認為檳榔香物質的來源主要有醇類、碳氫類、雜氧化合物等成分；此外，吳平等[10]對檳榔香六堡茶及檳榔中的香氣進行感官嗅覺辨析，認為六堡茶的檳榔香只是類似于檳榔干燥成熟種子或其切片的香氣和滋味，并非檳榔香氣的復制或再現，與檳榔中香氣的化學成分也無必然聯系。一些六堡茶產品中還具有特殊的“菌花香”，這主要來源于六堡茶陳化過程中金黃色孢子群落的微生物在生長茂盛時所散發的特殊“菌香”[11]。不同的香氣萃取富集方式對六堡茶香氣成分的分析結果有重要影響。例如，采用同時蒸餾萃取（SDE），張寧[16]、穆兵等[17]與Lv等[18]都檢測到了棕櫚酸，該成分是一種具有泥土香味的有機酸[19]，在黑茶后發酵過程中含量會逐步增加，也是普洱茶、茯磚茶中含量較高的揮發性物質[20]；而在采用頂空固相微萃取（HS-SPME）方式富集香氣成分時該成分卻鮮有報道。此外，不同檢測方法鑒定出的六堡茶中主要香氣成分也存在較大差異，如采用全二維氣相色譜飛行時間質譜（GC×GC-TOFMS）技術能檢測到六堡茶中更多的香氣化合物種類和數量[17,21-22]。眾所周知，一般是那些具有高香氣強度值、高香氣活度值的香氣化合物（稱為關鍵香氣化合物）才對呈香起到重要作用。在六堡茶的揮發性成分中，并非所有揮發性物質都對六堡茶的“陳香”“檳榔香”“藥香”或“菌花香”等香氣品質具有貢獻作用。然而，目前的科學研究還尚未揭示決定六堡茶“陳香”等香氣品質的關鍵香氣化合物，這在很大程度上阻礙了人們對六堡茶香氣品質的深入認知。因此，在后續六堡茶香氣成分的研究方面，有必要采用多種分析方法，如氣相色譜在線嗅聞法（Gaschromatography-olfactometry，GC-O）、香氣活度值法（Odoractivityvalue，OAV）、香氣化合物重組與消減實驗（Aromarecombination，omissiontest）等[23-25]來揭示六堡茶中的關鍵呈香成分，這將有助于豐富六堡茶風味品質化學基礎知識。1.2六堡茶的非揮發性成分目前，關于六堡茶的非揮發性成分的研究報道主要集中在多酚類成分及其氧化產物、呈色和呈味成分等方面，此外還涉及茶多糖、礦質元素以及他汀類等其他成分。1.2.1多酚類成分及其氧化產物類兒茶素類物質是茶葉中重要的非揮發性成分[26]。目前關于六堡茶中兒茶素單體成分及其含量的研究結果匯總如表2所示[16,18,27]，總體上以EGCG、EGC、ECG和GC等為主。此外，兒茶素的氧化產物，如茶黃素（TF）、茶紅素（TR）、茶褐素（TB）等，是黑茶中的重要品質化學成分[28]。茶褐素是從各種多酚類物質中衍生出來的水溶性高分子酚類化合物，是普洱茶中含量最高的水溶性色素[29]，在六堡茶中的含量約為10%[30]。研究表明，六堡茶茶褐素組分富含羧基、甲基、羥基、氨基，總體呈弱酸性，其酸性貢獻主要來源于酚羥基，在茶褐素中占比約75.6%，與普洱茶茶褐素中酚羥基占比88%相比略有差異；此外，六堡茶茶褐素中蛋白質含量為15.45%，茶多糖含量為25.16%，占比較高，是六堡茶中重要的生物活性成分之一[31]。表1近年來六堡茶香氣研究報道結果概況表2六堡茶中主要兒茶素單體成分及其含量水平注：ND表示未檢出Note:NDindicatesnotdetected近年來，科研工作者采用先進的分析檢測技術對六堡茶中的多酚類成分進行了深入研究，已經取得了一些重要的研究進展。例如，劉仲華[32]采用UPLC-Q/TOF-MS分析檢測技術，從六堡茶中鑒定出了54種非揮發性成分；林小珊等[33]采用HPLC-Q/Exactive分析檢測技術，從六堡茶中鑒定出了26種以多酚類物質為主的化學成分。將上述研究報道中分析鑒定出的這些化學成分進行比較（表3），可以發現被共同檢測到的化學成分有20種，主要包括兒茶素及其氧化產物類、沒食子酸與奎尼酸類衍生物、槲皮素、楊梅素、山柰酚的糖苷類化合物等，而有6種化學物質（Protocatechuicacid、ProcyanidindimerB3、Esculetin、4-vinylphenol、Benzoicacid、6-gingerol）是首次在六堡茶中被檢出的。此外，在六堡茶中還鑒定出了1種新的多酚類物質[34]，命名為Teasperol(1)，推測其為EGCG在微生物代謝下生成的次級代謝產物。在酚酸類成分研究方面，陳磊等[35]采用HPLC分析技術，發現蒼梧六堡茶中的酚酸含量比云南普洱茶高，且蒼梧竹簍裝六堡茶有兩個明顯而獨特的峰值，說明竹簍裝六堡茶中這兩種特征性酚酸含量比其他茶類要高。近年來六堡茶中新發現的非揮發性物質成分匯總如圖2所示。1.2.2呈色和呈味成分茶葉的色澤由脂溶性色素和水溶性色素共同構成。在六堡茶呈色成分研究方面，宋魯彬等[36]采用高效薄層色譜分析了不同類型黑茶產品中的脂溶性色素，發現不同樣品間脂溶性色素含量差異很大，其中六堡茶脂溶性色素總含量最高，約為茯磚茶的2倍，且六堡茶中脫鎂葉綠素b的含量也最高（占15.11%）。此外，在六堡茶水溶性色素中，一般認為茶黃素（TF）、茶紅素（TR）、茶褐素（TB）是茶湯色澤的主體物質（表4）。目前，茶葉色澤的評價仍以感官審評為主，但近年來越來越多的研究開始借助計算機視覺[37-38]、色差計[39-40]等儀器來輔助量化色澤分析，這些研究將為后續六堡茶的色澤表征分析提供更加客觀的評價參考。茶葉中的呈味物質大致可以分為由多酚類、黃酮類為主體的澀味，由咖啡堿、花青素、兒茶素為主體的苦味，由游離氨基酸及部分絡合物為主體的鮮爽味等[41]。六堡茶中主要水溶性成分及其含量的研究結果匯總如表4所示，推測這些成分對六堡茶的滋味會產生重要影響。此外，王曉[42]通過GC-MS結合NMR在六堡茶提取物中分離鑒定出了棕櫚酸、-菠甾醇、沒食子酸、沒食子酸甲酯等有機酸及甾醇類成分，部分成分可能對六堡茶滋味品質也有一定的貢獻作用。近年來，人們主要采用代謝組學分析技術[43-44]及近紅外分析技術[45]等對茶葉中主要滋味成分進行分析鑒定，通過Dot值（濃度與閾值的比值）分析茶湯中主要浸出物質對滋味的貢獻度[46]。然而，目前這些新的分析技術在六堡茶滋味品質分析中的應用鮮見報道。表3六堡茶中鑒定出的非揮發性化學物質續表3圖2六堡茶中新發現的非揮發性物質成分1.2.3其他非揮發性成分在黑茶中發現的他汀類化合物主要有洛伐他汀（Lovastatin）和辛伐他汀（Simvastatin）兩種[47]，而六堡茶中的他汀類物質據報道主要是辛伐他汀，含量約為41.63?mg·kg-1[48]。辛伐他汀是一種降膽固醇劑，具有抗炎和抗過敏作用[49]，且在調節一些藥物導致的血脂代謝異常方面有顯著作用[50]。茶多糖是一類結構復雜的糖蛋白復合物。六堡茶多糖主要由中性糖（50.71%）、醛酸（21.97%）、蛋白質（11.84%）、多酚（8.46%）等成分組成，能夠調節高脂血癥大鼠的血脂水平[51]。茶多糖在其他黑茶中還具有調節代謝綜合征[52]、調節腸道微生物[53]等作用。咖啡堿能夠抑制食欲、減少脂肪累積。據報道，咖啡堿在六堡茶成品茶中的含量水平一般為28.30~29.30?mg·kg-1[27]，這可能是六堡茶具有輔助降血脂的活性因子來源[54]。礦質元素與人體健康關系密切[55]。張雪紅等[56]研究發現六堡茶中的Ca、Mg、Fe、Mn、Zn、Cu的含量分別為0.330、0.387、0.527、0.975、0.035、0.033?mg·g-1；此外，對六堡茶樣品進行輻照和充氧處理，在60Co-γ射線輻照劑量為8?kGy，充氧量為40%條件下，有利于六堡茶中礦質元素維持在較高含量水平[57]。茶葉中含有豐富的維生素C、維生素B1、維生素B2等成分[58-59]，然而，目前鮮有關于六堡茶中的維生素類物質的報道。1.3不同加工方式對六堡茶化學成分的影響加工方式的不同會導致成品六堡茶化學成分含量的差異，進而影響到感官品質。例如，不同的發酵方式[60]、干燥方式[14]和陳化時間[15]等都會對六堡茶的化學成分含量和感官品質產生重要影響（表5）。在發酵方式上，采用雙蒸雙壓處理的六堡茶中水浸出物、茶多酚等成分的含量與冷水發酵處理有較大差異，說明其化學物質轉化程度不同于冷水發酵處理；張芬等[61]和劉小玲等[62]研究了六堡茶渥堆發酵前后的化學成分及感官品質變化情況，發現六堡茶經過渥堆后，揮發性成分中醛類、烯類相對含量減少，而酯類、雜氧化合物相對含量增加；此外，非揮發性成分中茶紅素減少，茶褐素大量增加，總酚、總黃酮含量降低，可溶性糖含量上升；這些成分的改變可能是六堡茶產品香氣陳醇、湯色紅濃的主要原因。在干燥方式上，傳統的松柴明火干燥相比于熱風干燥，游離氨基酸、咖啡堿、茶褐素的含量相對較高，產品湯色明亮且帶有檳榔香[14]。在陳化時間方面，六堡茶隨著陳化時間的延長，水浸出物、茶多酚、游離氨基酸、茶紅素的含量一般呈下降趨勢，而咖啡堿和茶褐素的含量呈上升趨勢；此外，香氣成分中-法尼烯、水楊酸甲酯和乙酸苯甲酯含量上升，而-萜品醇、1,2,3-三甲氧基苯和茴香腦等含量下降；表現在感官品質上，湯色由黃紅變為深紅，香氣由純正變為陳香濃郁，滋味由濃厚變為陳醇，葉底由黃褐變為黑褐[63-65]。目前，傅里葉變換紅外光譜[66]、電子鼻[67]等分析技術已經初步應用于六堡茶陳化年份的判別分析等研究方面。1.4六堡茶品質成分形成及相關微生物后發酵過程中，微生物分泌胞外酶等，以茶葉為底物，通過代謝途徑改變茶葉生化成分，形成黑茶特有品質。微生物對黑茶風味品質成分和生物活性成分的形成具有極其重要的作用。對六堡茶渥堆前后的多酚氧化酶（PPO）進行提取分析，發現渥堆前毛茶PPO分子量在59?kDa左右，而渥堆結束后分別檢測到了59?kDa和70?kDa的條帶[68]，表明六堡茶渥堆過程中，在微生物作用下產生了新的PPO及其同工酶；此外，六堡茶渥堆過程中微生物種群數量發生了明顯變化[69]，渥堆中期細菌、酵母和霉菌的數量達到最高，分別為4.2×108、2.2×108cfu·g-1和1.5×107cfu·g-1，之后隨著渥堆的結束微生物數量也隨之下降，數量約為105cfu·g-1。有研究對渥堆過程中的優勢酵母菌進行分離，得到1株對六堡茶成分轉化及風味形成起重要作用的優勢酵母菌，經鑒定為[70]。對半成品六堡茶進行人工接菌發酵試驗，研究表明采用青霉＋冠突曲霉＋黑曲霉＋毛霉＋酵母的優勢菌組合能夠縮短發酵時間，且能提高品質成分及感官審評得分[71]。表4六堡茶中主要水溶性成分含量表5不同加工方式對六堡茶化學成分及感官品質的影響六堡茶中真菌、細菌在屬水平上的分布組成研究結果匯總如圖3所示。LBF1—LBF4為4個六堡茶樣品中的真菌分布[72]，曲霉屬（）和散囊菌屬（）在真菌中占絕對優勢；LBB1—LBB2是2個六堡茶樣品中的細菌分布[73]，刺糖多孢菌屬（）在細菌中占據絕對優勢。此外，采用Miseq測序分析在4個六堡茶樣品中檢測到其他黑茶中未檢出的真菌群落分別為、和[74]。黑茶中的“金花菌”最早在安化茯磚黑茶中被分離鑒定出，由于冠突散囊菌大量繁殖后其閉囊殼呈金黃色，因此也被稱作“金花菌”[75]。六堡茶中也存在產生“金花”的微生物，能夠分泌淀粉酶和氧化酶，對六堡茶的香氣、滋味等物質轉化起到一定作用[76]。毛彥等[77]、陳然等[78]和歐惠算等[79]分別對六堡茶中的金花菌進行了分離鑒定，所報道的研究方法與結果匯總如表6所示。目前不同研究從六堡茶中鑒定出的“金花菌”并不一致，這可能是由于試驗茶樣品來自不同茶廠且加工時渥堆時間、溫度以及鑒定方法等不同，導致成品六堡茶中的“金花菌”菌種不同。總體上，目前關于六堡茶中微生物的研究大多仍處于微生物種類、數量鑒定階段，對于微生物次級代謝產物以及微生物與茶葉品質之間相互作用的影響尚待進一步研究。2六堡茶的生物活性研究進展近年來，六堡茶的生物活性引起了人們的關注。目前，六堡茶生物活性的相關研究主要集中在抗氧化、調節糖脂代謝、保護肝臟等方面。2.1抗氧化活性在抗氧化活性研究方面，Wu等[80]比較了綠茶、紅茶、六堡生茶和熟茶的抗氧化活性，發現經體外模擬胃腸消化后，紅茶和六堡熟茶總酚含量有所增加，對ABTS自由基的清除能力增強，且六堡熟茶的清除能力顯著增強，表現出更強的抗氧化能力；Lv等[18]分別采用DPPH、ABTS和FRAP法分析了普洱茶、茯磚茶和六堡茶3種黑茶的化學抗氧化活性，發現不同種類黑茶具有不同的抗氧化活性，但在FRAP鐵離子還原試驗中，六堡茶的抗氧化活性最強；在細胞水平上采用HepG2細胞進行細胞抗氧化試驗研究發現，六堡茶的抗氧化活性較強。圖3六堡茶中真菌、細菌屬水平上的分布組成表6六堡茶中金花菌的分離鑒定研究報道六堡茶發揮抗氧化活性的功能成分主要是多酚類成分（黃酮類成分）等。例如，宋家樂等[81]通過小鼠試驗，發現六堡茶總黃酮提取物能顯著提高小鼠血清和臟器組織內源抗氧化系統的酶活性，提高血清的總抗氧化能力（T-AOC）；此外，Qian等[82]通過HCl/乙醇誘導的小鼠胃損傷試驗來測定六堡茶生茶中多酚類的抗氧化活性，發現六堡茶生茶中的多酚類提取物能夠通過調節體內炎癥相關的細胞因子，減輕胃損傷，調節機體平衡，在體內發揮良好的抗氧化作用。2.2調節糖脂代謝活性在六堡茶調節糖代謝方面，滕翠琴等[83]通過六堡茶水提物對胰島素抵抗3T3-L1細胞模型干預24?h后，發現六堡茶能夠促進模型細胞的葡萄糖分解代謝，減少細胞內游離脂肪酸的含量，對于緩解胰島素抵抗有顯著作用；此外。龔受基[84]發現六堡茶水提物可以促進胰島素抵抗狀態HepG2細胞的葡萄糖攝取，減少糖尿病大鼠糖耐量，降低空腹血糖和胰島素水平；進一步研究發現六堡茶中改善胰島素抵抗的化學成分可能與茶褐素的增加有關。在六堡茶降脂研究方面，黃麗等[85]采用六堡茶提取物干預治療高脂模型小鼠，發現六堡茶提取物降血脂功能與陽性對照組血脂康的效果相當；六堡茶可通過調節腸道菌群來間接影響糖脂代謝，趙園園等[86]研究發現六堡茶提取物能夠促進高脂小鼠腸道菌群中厭氧菌的生長，并抑制需氧菌的繁殖，調節高脂飲食引起的小鼠腸道菌群紊亂；此外，葉穎等[87]研究發現六堡茶可以通過調節腸道菌群來顯著增加高脂大鼠腸道丙酸和丁酸含量，具有良好的修復腸道作用。普洱茶中的茶褐素作為關鍵活性成分可以通過影響腸道與肝臟之間相互作用機制，調節腸道菌群結構，促進膽汁酸合成來改善高脂血癥，發揮降脂減肥作用[88]。而六堡茶中也富含茶褐素成分，因此有理由推斷該成分在六堡茶降脂活性中也可能發揮了重要作用。2.3保護肝臟活性在保護肝臟研究方面，吳文亮等[89]建立高脂血癥小鼠模型，發現陳年六堡茶水提物能夠有效控制小鼠體重、肝重、肝系數的增加，降低肝功能相關指標酶活性，顯著改善肝臟中脂肪堆積；劉家奇等[90]通過檢測經普洱茶及六堡茶干預治療后的非酒精性脂肪肝大鼠體內胰島素樣生長因子IGF-I基因的表達，發現該基因表達量有明顯升高，能夠緩解肝臟受損程度，且六堡茶干預組作用效果更好。六堡茶總黃酮成分和茶多糖在保護肝臟方面可能發揮了重要作用。錢波等[91]通過CCl4誘導的化學性肝損傷小鼠模型來觀察六堡茶總黃酮對肝臟的保護作用，發現六堡茶總黃酮可能主要通過增強小鼠肝臟中內源抗氧化系統的酶活力和調控相關離子通道ATP酶的活性來緩解氧化應激性肝損傷；此外，Mao等[51]發現六堡茶多糖能夠干預高脂模型小鼠肝臟中膽固醇過載的現象，并且減少膽汁酸的吸收，從而起到調脂護肝作用。2.4其他生物活性除了上述報道的生物活性外，六堡茶在促消化、增強免疫功能、抗凝血、保護人臍靜脈血管內皮細胞等方面的作用也有相關的文獻報道。例如，吳香蘭[92]建立腸道紊亂小鼠模型后，分別用六堡茶、青磚茶、千兩茶和茯磚茶進行灌胃治療，發現4種黑茶均能通過促進胃排空、小腸蠕動及抑制有害細菌來促進小鼠消化；劉冠萍等[93]和鄧聿胤等[94]研究發現高劑量（15?g·kg-1）六堡茶能顯著提高小鼠非特異性免疫功能的相關指標，具有增強免疫的潛在作用；黃麗等[85]研究了六堡茶對小鼠血液流變學的作用發現，六堡茶提取物對小鼠體內各項抗凝血指標均有延長作用，且各項作用均達到顯著水平（<0.05），說明六堡茶具有抗凝血、預防血栓的作用；此外，應樂等[95]建立人臍靜脈血管內皮細胞損傷模型（HUVEC），通過30%、50%、70%系列濃度乙醇提取的六堡茶多糖LTPS-30、LTPS-50、LTPS-70組分對HUVEC均有保護作用，其中LTPS-70的保護作用最顯著，但相關作用機理仍待進一步研究。3討論目前，與普洱茶和茯磚茶等其他主要黑茶產品相比，六堡茶在品質化學成分和生物活性成分等方面的研究進展總體上嚴重滯后，亟待加強。針對六堡茶品質化學成分和生物活性研究，未來的主要研究方向至少應該包括以下幾個方面。3.1六堡茶后發酵過程中關鍵品質化學成分的形成變化規律研究采用宏基因組學、代謝組學、蛋白組學等方法，系統分析六堡茶后發酵過程中的優勢菌種微生物及后發酵過程中微生物分泌的重要胞外酶；研究六堡茶后發酵過程中茶多酚、兒茶素、茶色素、黃酮類、氨基酸、可溶性糖等重要化學成分的變化規律，重點分析微生物次生代謝產物、多酚類成分的分子修飾產物及特異多酚類成分的形成演變，分析六堡茶后發酵過程中新生成的一些重要品質化學成分和功能成分等。3.2六堡茶的品質化學成分研究采用UPLC-Q-TOF-MS、GC×GC-TOF-MS等先進分析技術，結合感官組學方法，揭示那些決定六堡茶色、香、味品質的關鍵化學成分，確定六堡茶化學特征指標，建立風味品質成分的化學指紋圖譜；查明這些重要品質化學成分在后發酵過程中的變化規律，以及它們在不同品種、不同等級和不同貯存年份產品中的含量水平差異等，建立化學指標的質量標準等。3.3六堡茶的生物活性和保健功效研究采用現代植物化學研究分析方法，系統分離鑒定六堡茶的關鍵生物活性成分，研究不同陳化時間或存貯年份六堡茶的體外抗氧化活性差異及細胞內生物活性差異；開展六堡茶中營養健康功能因子的高通量篩選、分離鑒定和生物活性評價研究等。[1]全國茶葉標準化技術委員會.黑茶第4部分:六堡茶:GB/T32719.4—2016[S].北京:中國標準出版社,2016.NationalTechnicalCommittee339onTeaofStandardizationAdministrationofChina.DarkteaPart4:LiuPaoTea:GB/T32719.4—2016[S].Beijing:ChinaStandardPress,2016.[2]武衛國,楊鼎俊,龍志榮,等.“一帶一路”倡議下六堡茶產業發展現狀與對策[J].中國茶葉,2019,41(5):59-61.WuWG,YangDJ,LongZR,etal.ThepresentsituationandcountermeasuresofthedevelopmentofLiupaoteaindustryunder"theBeltandRoad"initiative[J].ChinaTea,2019,41(5):59-61.[3]胡曉云,魏春麗,袁馨遙.2018中國茶葉區域公用品牌價值評估研究報告[J].中國茶葉,2018,40(5):31-50.HuXY,WeiCL,YuanXY.ThevalueassessmentstudyonregionalpublicbrandsofChineseteain2018[J].ChinaTea,2018,40(5):31-50.[4]馬士成,楊麥.廣西地理標志產品-六堡茶[M].北京:中國工商出版社,2019:17-19.MaSC,YangM.TheproductofGuangxigeographicalindication:Liupaotea[M].Beijing:ChinaIndustrialandCommercialPress,2019:17-19.[5]焦楊,王登良.六堡茶加工工藝及發展狀況[J].廣東茶業,2010(3):12-15.JiaoY,WangDL.ProcessingtechnologyanddevelopmentofLiupaotea[J].GuangdongTeaIndustry,2010(3):12-15.[6]FengZH,LiYF,LiM,etal.Teaaromaformationfromsixmodelmanufacturingprocesses[J].FoodChemistry,2019,285,347-354.[7]何華鋒,朱宏凱,董春旺,等.黑茶香氣化學研究進展[J].茶葉科學,2015,35(2):121-129.HeHF,ZhuHK,DongCW,etal.ResearchprogressinflavorchemistryofChinesedarktea[J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