土傳病害生防菌哈茨木霉菌劑生產工藝的研究當前第1頁\共有20頁\編于星期六\23點報告內容一、國內外研究現狀與趨勢二、研究意義三、研究目標與內容四、研究方法與技術路線五、研究進度安排六、研究基礎七、已具備的研究條件當前第2頁\共有20頁\編于星期六\23點一、國內外研究現狀與趨勢作物枯萎病是由尖孢鐮刀菌引起的一類土傳性真菌病害。病原菌從根部侵入植物，引起維管束病變，引起萎蔫死亡。目前，枯萎病的防治主要是化學藥劑防治法，抗病育種法以及輪作法?；瘜W藥劑對環境的危害嚴重，抗病品種培育費時費力，輪作又限制，生物防治就成為最受青睞的辦法。當前第3頁\共有20頁\編于星期六\23點生防微生物主要有木霉菌、叢枝菌根真菌、非致病性尖孢鐮刀菌。其中，木霉菌對多種植物病害具有很好的生防作用，被認為具有重要生防價值。木霉菌已廣泛用于各種作物枯萎病的防治中，如Thangavelu,2003;楊春林,2008;LingN,2009。國內外已有商品化木霉制劑，較多為液體發酵液及其孢子菌劑。采用固體發酵方式的較少。一、國內外研究現狀與趨勢當前第4頁\共有20頁\編于星期六\23點本實驗室已篩選出一株哈茨木霉菌FJAT-9040，研究表明，其對多種作物枯萎病有良好的防治作用。二、研究意義為了該菌更好的產業化生產，利用微生物發酵床養豬產生的副產物—墊料作為主要原料進行固體發酵，形成哈茨木霉菌肥菌劑。一方面實現了資源的再利用，另一方面哈茨木霉菌肥菌劑在應用中可起到增強植物抗性及防病效果。當前第5頁\共有20頁\編于星期六\23點（一）研究目標三、研究目標與內容1、探究不同營養物質、培養條件對生防菌哈茨木霉產孢的影響。2、摸索生防菌哈茨木霉固體發酵的方式，為其擴大生產提供可靠依據。3、摸索生防菌哈茨木霉固體發酵過程中營養成分的變化，為其發酵過程中補料提供技術參數。4、探究生防菌哈茨木霉菌劑生產工藝流程，為生防菌哈茨木霉菌劑工業化和商品化奠定基礎。當前第6頁\共有20頁\編于星期六\23點三、研究目標與內容（二）研究內容1、哈茨木霉固體發酵條件的研究2、哈茨木霉固體發酵方式的研究3、哈茨木霉固體發酵過程中營養成分的檢測4、哈茨木霉固體發酵產物的保存期及菌體穩定性檢測5、哈茨木霉菌劑的田間應用當前第7頁\共有20頁\編于星期六\23點四、研究方法與技術路線（一）研究方法——生防菌哈茨木霉固體發酵條件的研究培養基配方的篩選墊料麩皮比例麥粒含量碳源及其濃度氮源及其濃度響應面法篩選最佳配方培養條件的篩選含水量接種量培養溫度培養時間響應面法篩選最佳培養條件當前第8頁\共有20頁\編于星期六\23點四、研究方法與技術路線（一）研究方法——生防菌哈茨木霉固體發酵方式的研究非滅菌條件下對菌株生長的影響滅菌條件下對菌株生長的影響固體發酵方式不同滅菌溫度不同滅菌時間當前第9頁\共有20頁\編于星期六\23點四、研究方法與技術路線（一）研究方法——生防菌哈茨木霉固體發酵方式的研究淺盤培養法蘑菇菌棒培養法固體發酵方式當前第10頁\共有20頁\編于星期六\23點四、研究方法與技術路線（一）研究方法——生防菌哈茨木霉固體發酵過程中營養成分的檢測近紅外光分析儀碳源的變化氮源的變化水分的變化營養成分的檢測當前第11頁\共有20頁\編于星期六\23點不同濕度不同溫度不同時間保存期及穩定性檢測四、研究方法與技術路線（一）研究方法——哈茨木霉固體發酵產物保存期及菌體穩定性檢測孢子萌發情況當前第12頁\共有20頁\編于星期六\23點四、研究方法與技術路線（一）研究方法——生防菌哈茨木霉FJAT-9040菌劑

的田間應用菌劑的田間應用種子出苗植株生長情況枯萎病防效茄科：番茄、茄子瓜類：黃瓜、甜瓜番茄、茄子番茄、茄子當前第13頁\共有20頁\編于星期六\23點四、研究方法與技術路線（二）技術路線生防菌哈茨木霉FJAT-9040菌劑生產工藝的研究發酵條件的研究發酵方式的研究營養成分的檢測產物的保存期和穩定性的檢測菌劑的田間應用當前第14頁\共有20頁\編于星期六\23點五、研究進度安排2012年10-2013.32013年4-52013年6-72013年8-102013年11-2014.2菌株FJAT-9040固體發酵條件的研究固體發酵方式的研究固體發酵過程營養成分的檢測固體發酵產物保存期及穩定性的檢測菌劑的應用當前第15頁\共有20頁\編于星期六\23點六、研究基礎張衡宇等對該菌株的研究主要包括生物學、液體發酵條件、對不同枯萎病病原菌的抑制作用。肖榮鳳等對該菌株的GFP標記進行了研究，獲得了1株熒光性狀穩定的菌株FJAT-9295；同時對該菌株土壤定殖示蹤進行了研究，研究表明菌株在育苗土中定殖最好，泥土中定殖最差；種植茄子的定殖效果比未種植的好。（一）實驗室研究基礎當前第16頁\共有20頁\編于星期六\23點六、研究基礎通過單因素方法篩選出了墊料與麩皮的最佳產孢比例墊料：麩皮＝9：1，產孢量為4.6×107個/ml。培養基配方的篩選——墊料與麩皮的比例（二）本實驗研究基礎當前第17頁\共有20頁\編于星期六\23點六、研究基礎通過單因素方法篩選出了外加麥粒的含量，40%（體積比）產孢量為2.3×108個/ml。培養基配方的篩選——麥粒含量的篩選當前第18頁\共有20頁\編于星期六\23點六、研究基礎通過單因素方法篩選出了外加碳源為蔗糖，添加量為0.1g/50ml。培養基配方的篩選—碳源及其濃度的篩選當前第19頁\共有20頁\編于星期六\23點七、已具備的研究條件

該菌株的生物學特性、液體發酵條件、對不同枯萎病病原菌的