臨床PCR實驗室的設計及質量管理體系的建立衛生部臨床檢驗中心李金明Tel前一頁\總數六十六頁\編于二十一點臨床標本的接收通常的工作流程：標本采集血清分離編號保存或檢測應在四個測定區域之外的地方或區域內接收接收的標本應收集在原始容器中在核酸提取時帶入至標本制備區目前二頁\總數六十六頁\編于二十一點理想的PCR實驗室設計A產物分析區空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊工作流向擴增區標本制備區試劑準備區目前三頁\總數六十六頁\編于二十一點產物分析區空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊工作流向擴增區標本制備區試劑準備區理想的PCR實驗室設計B目前四頁\總數六十六頁\編于二十一點PCR實驗室設計的一般原則各區獨立注意風向因地制宜方便工作“十六字口訣”目前五頁\總數六十六頁\編于二十一點門試劑準備區標本制備區擴增區產物分析區外走廊門門門門試劑準備區標本制備區擴增及產物分析區外走廊門門門門AB目前六頁\總數六十六頁\編于二十一點試劑準備區標本制備區擴增及產物分析區門門門門空氣流向空氣流向空氣流向目前七頁\總數六十六頁\編于二十一點走廊走廊試劑準備區標本制備區擴增和產物分析區空氣流向空氣流向空氣流向其他實驗室其他實驗室其他實驗室其他實驗室其他實驗室其他實驗室其他實驗室目前八頁\總數六十六頁\編于二十一點門試劑準備區標本制備區擴增及產物分析區門門門空氣流向空氣流向+空氣流向++走廊走廊試劑準備區標本制備區擴增和產物分析區空氣流向空氣流向+空氣流向++其他實驗室其他實驗室其他實驗室其他實驗室其他實驗室其他實驗室其他實驗室空氣流向目前九頁\總數六十六頁\編于二十一點產物分析區空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊工作流向擴增區標本制備區試劑準備區傳遞窗傳遞窗傳遞窗目前十頁\總數六十六頁\編于二十一點“無基因”或“無核酸”概念的重要性！！！目前十一頁\總數六十六頁\編于二十一點實驗室質量管理體系的建立質量手冊質量體系程序文件標準操作程序

(相關記錄表格)目前十二頁\總數六十六頁\編于二十一點質量管理的內涵寫你所做的做你所寫的記錄你已做的分析你已做的目前十三頁\總數六十六頁\編于二十一點看得見的看不見的目前十四頁\總數六十六頁\編于二十一點目前十五頁\總數六十六頁\編于二十一點目前十六頁\總數六十六頁\編于二十一點目前十七頁\總數六十六頁\編于二十一點目前十八頁\總數六十六頁\編于二十一點目前十九頁\總數六十六頁\編于二十一點目前二十頁\總數六十六頁\編于二十一點目前二十一頁\總數六十六頁\編于二十一點目前二十二頁\總數六十六頁\編于二十一點目前二十三頁\總數六十六頁\編于二十一點好習慣是生產力羅馬不是一天建成的(Romewasnotbuiltinaday)任何事情只要能夠堅持不斷去加強它，它終究會變成一種習慣。目前二十四頁\總數六十六頁\編于二十一點質量體系文件的三大特性法規性、唯一性和適用性。法規性:是指文件一旦制定完成并批準實施，就必須認真執行，按照相應的文件去完成日常檢驗工作，也就是前面所說的做你所寫的。并且文件的修改不能隨意，只能按規定的程序進行。唯一性:則是指（1）一個實驗室只能有一個質量體系文件系統；（2）一項檢驗活動只能有唯一的操作程序；（3）一項規定只能有唯一的理解，不產生歧義；（4）只能使用文件的有效版本，無效版本在實驗室的任何地方都不能使用。適用性:是指質量體系文件無統一格式；無標準文本；怎么做怎么寫，切合實際，具有可操作性，不拘一格。所有文件的規定均應保證在臨床實際檢測工作中能完全做到。當發現文件有不適合情況時，則應立即按規定程序對文件進行修改。目前二十五頁\總數六十六頁\編于二十一點怎樣編寫SOP？XXX單位XXX實驗室XXX標準操作程序編號：啟用日期：版本：第頁共頁一目的：適用范圍：職責或責任人：（方法原理）（檢測設備和試劑）（所需的環境條件）操作步驟：

1．

2．

3．

五、本操作程序變動程序：六、相關的文件七、相關的記錄表格和報告編寫人審核人批準人目前二十六頁\總數六十六頁\編于二十一點SOP（5W和1H）誰來做(Who)：

責任人做什么(What)：適用范圍何時（When）：適用范圍何地（Where）：適用范圍為什么做（Why）：目的如何做（How）：操作步驟目前二十七頁\總數六十六頁\編于二十一點SOP等于試劑盒說明書嗎？目前二十八頁\總數六十六頁\編于二十一點目前二十九頁\總數六十六頁\編于二十一點目前三十頁\總數六十六頁\編于二十一點目前三十一頁\總數六十六頁\編于二十一點目前三十二頁\總數六十六頁\編于二十一點目前三十三頁\總數六十六頁\編于二十一點目前三十四頁\總數六十六頁\編于二十一點目前三十五頁\總數六十六頁\編于二十一點目前三十六頁\總數六十六頁\編于二十一點目前三十七頁\總數六十六頁\編于二十一點目前三十八頁\總數六十六頁\編于二十一點目前三十九頁\總數六十六頁\編于二十一點目前四十頁\總數六十六頁\編于二十一點目前四十一頁\總數六十六頁\編于二十一點目前四十二頁\總數六十六頁\編于二十一點目前四十三頁\總數六十六頁\編于二十一點目前四十四頁\總數六十六頁\編于二十一點目前四十五頁\總數六十六頁\編于二十一點目前四十六頁\總數六十六頁\編于二十一點目前四十七頁\總數六十六頁\編于二十一點目前四十八頁\總數六十六頁\編于二十一點實驗室清潔SOP要點

目的:為了使實驗室臺面、地面和儀器設備在使用后，處于潔凈和無感染性狀態，以防止出現因儀器設備不潔影響檢測或儀器使用壽命；防止因實驗室臺面、地面和儀器設備的生物傳染危險性造成實驗室人員感染，以及防止實驗室交叉污染而出現假陽性結果等。適用范圍應包括實驗室地面、臺面和儀器設備等的清潔。按實驗室臺面、地面和儀器設備分開來寫各自的具體清潔方法，要具體而又有可操作性應規定工作人員在清潔時，必須按試劑準備區標本制備區擴增(及產物分析)區方向進行，不得逆行規定每一工作區域的清潔必須使用專用的清潔用具，不得混用規定有潛在生物傳染危險性材料濺出時的消毒清潔方法目前四十九頁\總數六十六頁\編于二十一點

實驗臺面的清潔目前五十頁\總數六十六頁\編于二十一點目前五十一頁\總數六十六頁\編于二十一點目前五十二頁\總數六十六頁\編于二十一點

實驗記錄表格的設計目前五十三頁\總數六十六頁\編于二十一點存在問題表格種類繁多重復記錄表格無實用性，用于檢查的痕跡很重目前五十四頁\總數六十六頁\編于二十一點目前五十五頁\總數六十六頁\編于二十一點目前五十六頁\總數六十六頁\編于二十一點目前五十七頁\總數六十六頁\編于二十一點記錄表格設計的基本原則信息充分簡單明了臨床標本的檢測信息能有機聯系起來融入LIS系統？目前五十八頁\總數六十六頁\編于二十一點

臨床PCR檢驗流程記錄表

檢驗日期

檢驗項目：

擴增儀中保存文件名：

使用說明：1．本記錄表須嚴格遵循試劑準備區標本制備區擴增區（產物分析區）單一流向移動，嚴禁逆向移動。2．各項工作執行后，在相應敘述前的“”內打“”。3．本記錄表最后與相應的標本接收記錄等歸檔保存于擴增區的專用文件柜內，以備查找。實驗前準備試劑在有效期內擴增儀、加樣器和溫度計在校準的有效期內生物安全柜的濾膜在使用有效期內消毒溶液在有效期內沖眼器內無菌生理鹽水在有效期內離心管、帶濾心吸頭已經過質檢合

操作者：

目前五十九頁\總數六十六頁\編于二十一點

試劑準備區（1區）實驗前：

打開通風設備實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭）冰箱溫度：冷藏室（2~8℃）

℃；冷凍室（18℃2℃）

℃實驗室溫度：

℃（允許范圍：10~30℃）；相對濕度：

（允許范圍：30%~70%）PCR試劑來源：（可直接列出有關廠家名稱）批號：

檢驗項目：

本次實驗用量：

人份，剩余量：

人份。其他有關試劑配制：按XXX（將有關SOP編號列出）SOP配制1%含氯消毒液

毫升；按XXX（將有關SOP編號列出）SOP配制4％NaOH溶液

毫升；按XXX（將有關SOP編號列出）SOP配制0.1%焦磷酸二乙酯

毫升；按XXX（將有關SOP編號列出）SOP配制

毫升；其他：儀器設備使用：離心機：正常不正常振蕩器：正常不正常實驗后：按XXX（將有關SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面、加樣器和離心機，并進行紫外照射30分鐘以上。按XXX（將有關SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。

操作者：

目前六十頁\總數六十六頁\編于二十一點

標本制備區（2區）實驗前：打開通風設備實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭）冰箱（柜）溫度：冷藏室（2~8℃）

℃；冷凍室（18℃2℃）

℃實驗室溫度：

℃（允許范圍：10~30℃）；相對濕度：

（允許范圍：30%~70%）陽性室內質控物來源：

濃度及批號：

擴增位置：

陰性室內質控物來源：

批號：

擴增位置：

所取理的標本（對應標本接收的唯一編號）及擬擴增位置：1

9

17

25

2

10

18

26

3

11

19

27

4

12

20

28

5

13

21

29

6

14

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30

7

15

23

31

8

16

24

32

核酸提取及加樣過程：按XXX（列出編號）SOP進行。儀器設備使用：生物安全柜：正常不正常恒溫儀溫度校準：

℃離心機：正常不正常振蕩器：正常不正常實驗后：按XXX（將有關SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面及儀器設備。按XXX（將有關SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。

操作者：

目前六十一頁\總數六十六頁\編于二十一點

擴增及產物分析區（3區）實驗前打開通風設備實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭）實驗室溫度：

℃（允許范圍：10~30℃）；相對濕度：

（允許范圍：30%~70%）擴增儀操作：開機自檢及運行正常按XXX（列出編號）SOP進行編程、參數設定標準曲線計算值：Slope值：（）Intercept值：（）r值：（）室內質控結果：結果：

□填寫室內質控記錄、描質控圖是否失控：□否□是實驗結果：見所附擴增儀打印結果實驗后：按XXX（將有關SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面及儀器設備。按XXX（將有關SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。