第十一章動物營養學研究方法目前一頁\總數八十五頁\編于十點目前二頁\總數八十五頁\編于十點第一節化學分析法目前三頁\總數八十五頁\編于十點一、營養物質的分析1、概略養分分析

(1)水分(2)粗蛋白（CP）(3)粗脂肪（EE）(4)粗纖維（CF）(5)粗灰分（CA）(6)無氮浸出物（NFE）目前四頁\總數八十五頁\編于十點2、純養分分析（1）維生素（2）礦物質（3）氨基酸（4）脂肪酸（5）純蛋白質（6）纖維素、半纖維素、木質素（7）淀粉、葡萄糖等目前五頁\總數八十五頁\編于十點3、分析對象

(1)飼料(2)排泄物（糞、尿等）(3)動物組織(4)血液(5)整體動物目前六頁\總數八十五頁\編于十點二、抗營養因子分析1、概念抗營養因子是指飼料中本身含有或從外界進入，影響飼料營養價值和動物生長的物質。目前七頁\總數八十五頁\編于十點2、種類

（1）影響蛋白質消化：蛋白酶抑制劑、凝集素、皂苷、多酚化合物等（2）影響礦物元素利用:植酸、草酸（3）影響維生素利用:雙香豆素、硫胺素酶等（4）影響碳水化合物利用：非淀粉多糖（NSP）等（5）刺激免疫系統的抗營養因子:如抗原蛋白（6）綜合性抗營養因子:如NSP、棉酚、硫葡萄糖甙。目前八頁\總數八十五頁\編于十點3、意義

分析飼料中抗營養因子的種類和含量，可指導飼料的合理加工、利用、貯存，如通過加熱可提高豆類籽實的營養價值。目前九頁\總數八十五頁\編于十點三、毒害物質分析重金屬元素：鉛、汞、砷等。霉菌毒素：如黃曲霉毒素有害微生物：大腸桿菌、沙門氏菌等目前十頁\總數八十五頁\編于十點四、動物組織血液理化成分分析分析內容

1.概略養分或純養分；2.營養物質的代謝產物（如尿素、尿酸等）；3.相關標識功能酶：如硒—血漿谷胱甘肽過氧化物酶、鋅—血清堿性磷酸酶、銅—血漿銅藍蛋白氧化酶和血漿尿素氮等。目前十一頁\總數八十五頁\編于十點第二節消化試驗一、消化試驗概念與目的

四、尼龍袋法三、體外消化試驗二、

體內消化試驗目前十二頁\總數八十五頁\編于十點一、消化試驗概念與目的1.概念：以測定動物對飼料養分的消化能力或飼料養分的可消化性為目的的試驗。2.目的：準確地量化飼料中各種養分被動物消化利用的程度，也是評定飼料營養價值的重要方法。3.種類(見圖)目前十三頁\總數八十五頁\編于十點消化試驗目前十四頁\總數八十五頁\編于十點目前十五頁\總數八十五頁\編于十點二、體內（invivo）消化試驗目前十六頁\總數八十五頁\編于十點（一）全收糞法1.原理全收糞法是指在整個試驗期間精確測定動物的采食量和排糞量以及其中營養物質的含量。可消化養分=食入養分-糞便養分營養物質消化率=可消化養分/食入養分食入養分=采食量×飼料養分含量糞便養分=排糞量×糞便養分含量目前十七頁\總數八十五頁\編于十點2.方法步驟（1）試驗動物的選擇：具有代表性：生長發育良好，營養狀況和消化機能等正常。不同組別動物的一致性：品種、類型、性別、年齡、體重、血緣關系等。對性別無特別要求時，最好選雄性動物：便于糞尿分離。數量：每組3-6頭。目前十八頁\總數八十五頁\編于十點（2）飼料（日糧）的準備：應一次性準備好，按照每天的采食量，分袋、編號儲存。（3）試驗場地及裝置的準備：消化籠（柜）目前十九頁\總數八十五頁\編于十點豬用消化籠目前二十頁\總數八十五頁\編于十點牛用集糞袋目前二十一頁\總數八十五頁\編于十點（4）預試期：適應環境,摸清采食量、排糞規律。（5）正試期：記錄采食量、收集排糞預試期、正試期時間：非反芻動物：5-10天；反芻動物：7-14天目前二十二頁\總數八十五頁\編于十點動物種類預試期（d）正試期（d）牛、綿羊、水牛10~1410~14育成牛（6~12月齡）66馬7~108~10豬（成年）7~106~10育成豬（4~8月齡）65家兔7~107~10家禽（通常不做）4~64~5不同種類動物消化試驗期的規定

目前二十三頁\總數八十五頁\編于十點采食量計算：飼喂量-剩料量糞便收集：每天定時收糞、稱重。混勻后，取樣保存，加入10%鹽酸，以防NH3-N逸失。目前二十四頁\總數八十五頁\編于十點（二）回腸末端內容物法通過外科手術，在回腸末端安裝一瘺管或施以回-直腸吻合術，在肛門收集回腸食糜。主要用于豬飼料氨基酸消化率的測定。目前二十五頁\總數八十五頁\編于十點1）T型瘺管優點：安瘺管后對荷術動物生理影響小；

缺點：必須用指示劑，因不可能收集全部糞尿，由此取樣缺乏代表性，而且較麻煩。目前二十六頁\總數八十五頁\編于十點CannulatedAnimals目前二十七頁\總數八十五頁\編于十點CannulatedAnimals目前二十八頁\總數八十五頁\編于十點CannulatedAnimals目前二十九頁\總數八十五頁\編于十點2）橋式瘺管目前三十頁\總數八十五頁\編于十點優點：收糞簡便，而且可收集全部糞樣缺點：手術復雜、成功率低和護理相對麻煩。3）回-直腸吻合術回—直腸吻合術

目前三十一頁\總數八十五頁\編于十點（三）指示劑法1.對指示劑的要求:不被消化吸收，不影響養分的正常消化，無毒無害，分布均勻，易測定。2.種類（1）外源指示劑：Cr2O3

（2）內源指示劑（酸不溶灰分法）：2NHCl、4NHCl不溶灰分目前三十二頁\總數八十五頁\編于十點3.優點：省時省力，尤其是在收集全部糞便困難時。

4.缺點：指示劑回收率對消化率影響較大，并且很難找到回收率很理想的指示物質。5.方法步驟：從預試期開始，飼料中添加Cr2O3（0.5%），并混合均勻。每日收集部分糞樣保存。其它同全收糞法。目前三十三頁\總數八十五頁\編于十點5.計算公式：飼料養分消化率（%）=100-100×（A1·F2/A2·F1）式中：A1飼料中三氧化二鉻的含量（%）A2糞中三氧化二鉻的含量（%）F1飼料中營養物質的含量（%）F2糞中營養物質的含量（%）目前三十四頁\總數八十五頁\編于十點三、尼龍袋法

（nylonbagstechnique)原理：將待測飼料裝入一特制尼龍袋內，經瘤胃瘺管放入瘤胃中，一定時間后取出，沖洗干凈，烘干稱重，與放入前的飼料蛋白質含量的差值即為飼料瘤胃降解蛋白質量（RDP）。計算公式：降解率(%)=(袋中初始N-孵化后N)×100/袋中初始N目前三十五頁\總數八十五頁\編于十點用途：測定飼料蛋白質瘤胃降解率，用于反芻動物蛋白質營養價值的評定。測定時間點：粗飼料為6、12、24、36、48、72h；精飼料為2、6、12、24、48h。注意：尼龍袋的通透性要好，網眼大小適宜，通常采用孔徑為50μm的尼龍布。樣品有一定細度，便于瘤胃微生物的發酵。目前三十六頁\總數八十五頁\編于十點牛的瘤胃瘺管目前三十七頁\總數八十五頁\編于十點CannulatedAnimals目前三十八頁\總數八十五頁\編于十點羊的瘤胃瘺管目前三十九頁\總數八十五頁\編于十點1.概念：是指摸擬消化道，在體外進行飼料的消化。2.優點：操作方便，環境條件、處理方法和時間易控制，更容易標準化。3.缺點：與動物的生理生化過程有一定的差異。四、離體(invitro)消化試驗目前四十頁\總數八十五頁\編于十點4.種類：（1）消化道消化液法：兩步法反芻動物：瘤胃液、胃蛋白酶+HCl豬：胃蛋白酶+HCl、小腸液（2）人工消化液法（酶解法）：纖維素酶＋HCl、胃蛋白酶＋HCl主要用于反芻動物目前四十一頁\總數八十五頁\編于十點第三節代謝試驗

代謝試驗是測定飼料代謝能及研究營養物質代謝規律的試驗。代謝試驗與消化試驗相比，在收集裝置上更復雜一些，需增加集尿裝置，反芻動物還要有收集甲烷的裝置。目前四十二頁\總數八十五頁\編于十點目前四十三頁\總數八十五頁\編于十點目前四十四頁\總數八十五頁\編于十點目前四十五頁\總數八十五頁\編于十點目前四十六頁\總數八十五頁\編于十點目前四十七頁\總數八十五頁\編于十點強飼試驗實景：見課本P.169目前四十八頁\總數八十五頁\編于十點目前四十九頁\總數八十五頁\編于十點盲腸切除法（家禽）目前五十頁\總數八十五頁\編于十點第四節平衡試驗一、概念與目的四、能量平衡三、碳平衡二、氮平衡目前五十一頁\總數八十五頁\編于十點一、概念與目的1、概念：研究營養物質食入與排泄、沉積或產品間的數量平衡關系的試驗稱平衡試驗。2、目的：估計動物營養需要參數和飼料營養物質的利用率。3.原理：食入養分=各途徑排泄養分之和目前五十二頁\總數八十五頁\編于十點4.種類（1）物質平衡試驗N平衡試驗C平衡試驗（2）能量平衡試驗目前五十三頁\總數八十五頁\編于十點主要用于研究動物蛋白質的需要、飼料蛋白質的利用率以及飼料或飼糧蛋白質質量的比較。通過食入氮、糞氮和尿氮的測定，就可計算出體內沉積氮。二、氮平衡試驗目前五十四頁\總數八十五頁\編于十點計算公式為：氮的消化率=（食入氮-糞氮）÷食入氮沉積氮=食入氮-（糞氮+尿氮）氮的總利用率=沉積氮÷食入氮氮的生物學價值（BV）=沉積氮÷吸收氮目前五十五頁\總數八十五頁\編于十點三、碳平衡試驗沉積C=攝入C-（糞C+尿C+呼吸氣體CO2+腸道氣體CH4+離體產品C）沉積C包括：合成蛋白質+合成脂肪（體內沉積的碳水化合物量少，忽略不計）結合N平衡試驗，可推算出體內脂肪沉積量。目前五十六頁\總數八十五頁\編于十點四、能量平衡試驗1.目的：能量平衡試驗用于研究機體能量代謝過程中的數量關系，從而確定動物對能量的需要和飼料或飼糧的能量利用率。2.原理：食入能＝排泄物（糞+尿+脫落皮屑+毛）含能+沉積能（生長肥育）+產品（蛋、奶、毛）含能+維持生命活動的機體產熱目前五十七頁\總數八十五頁\編于十點3.方法：直接測熱法間接測熱法（呼吸測熱法）碳、氮平衡法目前五十八頁\總數八十五頁\編于十點第五節飼養試驗（生長試驗）一、概念：飼養試驗，是通過飼予動物已知營養物質含量的飼料或飼糧，對其增重、產蛋、產奶、耗料、每千克增重耗料、組織及血液生化指標等進行測定（有時也包括觀察缺乏癥出現的程度），確定動物對營養物質的需要量、比較飼料或飼糧的優劣、飼養管理方式的優劣以及不同動物生產性能的差異等。目前五十九頁\總數八十五頁\編于十點二、試驗設計根據試驗目的和條件，遵循統計學原理和方法進行試驗設計。飼養試驗應嚴格遵循“隨機化”和“唯一差異”原則。飼養試驗常采用的設計方法有以下幾種。目前六十頁\總數八十五頁\編于十點（一）對照試驗只考慮單一因素對動物生產的影響，設對照組和試驗組。所有試驗動物按照隨機化原則進入兩個組。目前六十一頁\總數八十五頁\編于十點飼料原料對照組試驗組玉米62.0561.52豆粕22.7023.00棉籽粕5.005.00石粉7.659.10磷酸氫鈣1.86-骨粉0.58酶他富50000.06賴氨酸0.040.04蛋氨酸0.110.11礦物質預混料0.100.10食鹽0.370.37復合維生素0.020.02膽堿0.100.10合計100100植酸酶效果研究：表：基礎日糧成分目前六十二頁\總數八十五頁\編于十點目前六十三頁\總數八十五頁\編于十點目前六十四頁\總數八十五頁\編于十點（二）配對試驗為了使對照組和處理組的試驗動物盡量一致，選擇各方面條件相同動物，雙雙配對。將每對動物隨機分到處理組和對照組，更確切地講是互為對照。配對試驗與對照試驗的適用范圍并無多大差異，主要視試驗動物的情況而定。目前六十五頁\總數八十五頁\編于十點配對試驗設計示例試驗目的：比較芽孢桿菌微生態制劑和金霉素對35日齡斷奶仔豬的促生長效果豬場條件：現有同日齡斷奶仔豬2窩（A、B），每窩有仔豬8-10頭12345678910A9.759.639.168.958.458.217.697.547.016.93B8.858.318.157.677.126.956.576.43目前六十六頁\總數八十五頁\編于十點抗生素組芽孢桿菌組豬編號體重豬編號體重A19.75A29.63A48.95A39.16A58.45A68.21A87.54A77.69B18.85B28.31B47.67B38.15B57.12B66.95B86.43B76.57平均體重8.09平均體重8.08SEM1.09SEM1.03目前六十七頁\總數八十五頁\編于十點（三）單向分類試驗設計0.480.610.740.87平均日采食量（g）賴氨酸進食量（mg/d）平均產蛋率（%）平均蛋重（g）平均日產蛋量（g）飼料報酬（g/g）平均日氮存留量（mg）全期平均增重（g）目前六十八頁\總數八十五頁\編于十點（四）隨機化完全區組設計

采用隨機化完全區組設計研究豬場環境條件對豬賴氨酸需要量的影響(以日增重作為反應指標)豬場賴氨酸水平平均數多重比較0.6%0.7%0.8%AG11G12G13BG21G22G23CG31G32G33平均數多重比較目前六十九頁\總數八十五頁\編于十點表：Se和Cu對大鼠體重影響

(g)

Se0.0210.3010.6051.102Mean±SDCu0.54211±9.5216±8.5220±9.5222±9.1217±9.4B6.05229±9.4235±9.1236±9.8235±8.5235±11.5AMean±SD220±13.1A225±13A228±12.0A228±10A

（五）復因子試驗的設計目前七十頁\總數八十五頁\編于十點（六）拉丁方設計

02%4%6%1期12342期23413期34124期4123

選取4只健康、裝有瘤胃瘺管和十二指腸瘺管的成年羯羊，采用4×4拉丁方試驗設計的方法，研究在玉米秸稈為主的粗料日糧中添加不同水平的脂肪酸鈣皂（0%，2%，4%和6%）對綿羊消化性能影響。脂肪酸鈣皂目前七十一頁\總數八十五頁\編于十點三、飼養試驗的原則1.重復性：重復的目的是為了降低試驗誤差和增強代表性。一般要求，大家畜每組不少于4頭，豬不少于6頭，家禽宜在30只以上。2.隨機性：試驗動物的隨機分配原則。目前七十二頁\總數八十五頁\編于十點3.試驗條件的一致性（唯一差異原則）：除試驗因子不同外，其他試驗條件都應完全相同，如試驗動物的品種、年齡、性別、體重、雜交代數、胎次、采食量、環境的溫度、濕度、飼養管理方式、飼喂時間、飼養人員等。目前七十三頁\總數八十五頁\編于十點四、試驗步驟：1.試驗準備：擬定試驗工作計劃，備足試驗材料及記錄表格。2.試驗動物選擇：一致性、健康3.預試期：10~14d目前七十四頁\總數八十五頁\編于十點4.正試期：一般4個周以上。（1）測定指標：稱重（或產奶量、產蛋量等）：空腹重。飼料消耗：“清箱底法”，1周統計1次。血液指標：（2）計算指標：料重比（料奶比、料蛋