藥典動態(tài)對藥品制劑研發(fā)影響和原始記錄常見問題探討詳解演示文稿當(dāng)前1頁，總共89頁。（優(yōu)選）藥典動態(tài)對藥品制劑研發(fā)影響和原始記錄常見問題探討當(dāng)前2頁，總共89頁。建立標(biāo)準(zhǔn)時要考慮的問題Growth200820072006200520042003200220012000常見研究誤區(qū)以及供參考的經(jīng)驗和體會

新版藥典動態(tài)對藥品制劑質(zhì)量研究的影響

研發(fā)原始記錄中常見問題及改進(jìn)建議

主要討論內(nèi)容當(dāng)前3頁，總共89頁。藥用輔料的增修訂情況及要求1、新增附錄－附錄Ⅱ藥用輔料

對藥用輔料進(jìn)行定義、分類，對其生產(chǎn)、貯存、應(yīng)用等提出原則性要求

2、正文收載的藥用輔料

共收載132個品種（新增62個、修訂52個）

05版收載的三氯甲烷為二類毒性有機溶劑，刪除3、注射用輔料質(zhì)量、未收載的藥用輔料附加標(biāo)準(zhǔn)

當(dāng)前4頁，總共89頁。輔料對測定的干擾1、避免使用

2、排除輔料干擾方法要明確3、不排除可以默認(rèn)為雜質(zhì)

當(dāng)前5頁，總共89頁。輔料影響的排除無影響有影響，可定位有影響，難定位

當(dāng)前6頁，總共89頁。制劑通則變化幾個重點提示修訂的12種制劑通則（共20種）注射劑片劑眼用制劑酊劑膠囊劑丸劑顆粒劑糖漿劑氣霧劑粉霧劑噴霧劑凝膠劑鼻用制劑搽劑涂劑涂抹劑當(dāng)前7頁，總共89頁。片劑制劑通則變化幾個重點提示1）含片定義：系指含于口腔中緩慢溶化（解）產(chǎn)生（持久）局部或全身作用的片劑含片的溶化性照崩解時限檢查法（附錄ⅩA）檢查，除另有規(guī)定外，10分鐘內(nèi)不應(yīng)全部崩解或溶化。

2005年版：含片照崩解時限檢查法（附錄ⅩA）檢查，除另有規(guī)定外，30分鐘內(nèi)應(yīng)全部崩解。

但標(biāo)準(zhǔn)正文中仍然是：

其他應(yīng)符合片劑項下有關(guān)的各項規(guī)定（附錄ⅠA）。當(dāng)前8頁，總共89頁。片劑制劑通則變化幾個重點提示2）分散片的【分散均勻性】：檢查法：取供試品6片，置250ml燒杯中，加15～25℃的水100ml，振搖3分鐘，應(yīng)全部崩解并通過二號篩。2005年版：取供試品2片，置20℃±1℃的100ml水中，振搖3分鐘，應(yīng)全部崩解并通過二號篩。當(dāng)前9頁，總共89頁。眼用制劑通則變化重點提示1）定義：系指直接用于眼部發(fā)揮治療作用的無菌制劑。2）基本分類等文字修改3）【滲透壓摩爾濃度】【無菌】均為必檢項目

刪去了【微生物限度】檢查產(chǎn)品的工藝處方設(shè)計、生產(chǎn)環(huán)境的升級、供檢樣品的數(shù)量都要隨之改變當(dāng)前10頁，總共89頁。注射劑品種收載及增修訂品種數(shù)量

二部收載品種刪除上版品種新增品種修訂品種變動幅度注射液粉針269個126個15個59個264個82%共計395個未修訂品種2005年版收載346個（248注射液＋98粉針）

當(dāng)前11頁，總共89頁。注射劑品種增修訂項目增訂HPLC鑒別：64個品種增訂TLC鑒別：11個品種增訂IR鑒別：6+1個品種(+1原有)增訂細(xì)菌內(nèi)毒素檢查：86個品種熱原改細(xì)內(nèi)：27個品種增加降壓物質(zhì)的品種：3個增加過敏反應(yīng)的品種：4個增加異常毒性的品種：9個增訂滲透壓：25個品種增加顏色或溶液的顏色的品種：9個增加澄清度或溶液的澄清度的品種：7個頭孢類增訂高分子聚合物的品種：6個（老品種）增訂5-羥甲基糠醛的品種：7個

當(dāng)前12頁，總共89頁。注射劑制劑通則變化重點提示

1）除另有規(guī)定外，靜脈輸液應(yīng)盡可能與血液等滲。

★之前為靜脈輸液的一般要求，新版要求此項為靜脈輸液品種必設(shè)必檢項目，包括氯化鈉注射液

（例外：葡萄糖注射液不檢）【滲透壓摩爾濃度】除另有規(guī)定外，靜脈輸液及椎管注射用注射液按各品種項下規(guī)定，照滲透壓摩爾濃度測定法（附錄ⅨG）檢查，應(yīng)符合規(guī)定。

當(dāng)前13頁，總共89頁。【滲透壓摩爾濃度】的表述形式

例1：己酮可可堿葡萄糖注射液（等滲）

滲透壓摩爾濃度

取本品，依法測定（附錄ⅨG）毫滲透壓摩爾濃度應(yīng)為260～320mOsmol/kg。

例2：甘油果糖氯化鈉注射液（高滲）

滲透壓摩爾濃度

取本品，依法檢查（附錄ⅨG），本品的滲透壓摩爾濃度比應(yīng)為6.5～7.5。

當(dāng)前14頁，總共89頁。滲透壓摩爾濃度檢查項的研究與標(biāo)準(zhǔn)制訂

注意儀器的線性范圍濃溶液可以適當(dāng)稀釋但結(jié)果不能簡單乘以稀釋倍數(shù)

出具報告要注明稀釋情況！小容量注射液增訂滲透壓的目的？膠體滲透壓滴眼液的滲透壓

當(dāng)前15頁，總共89頁。注射劑制劑通則變化重點提示2）注射劑所用的原輔料應(yīng)從來源及工藝等生產(chǎn)環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格控制并應(yīng)符合注射用的質(zhì)量要求（熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素、無菌等應(yīng)符合要求）。

純度要高、雜質(zhì)要少、生物負(fù)荷要低＊從源頭控制雜質(zhì)的數(shù)和量、染菌的數(shù)和量、熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素當(dāng)前16頁，總共89頁。Clicktoedittitlestyle雜質(zhì)控制微粒控制安全性控制注射劑所用的原輔料應(yīng)從來源及工藝等生產(chǎn)環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格控制并應(yīng)符合注射用的質(zhì)量要求。標(biāo)準(zhǔn)增項雜質(zhì)譜的比較供注射用原料質(zhì)控重點應(yīng)在制劑申報資料中體現(xiàn)！當(dāng)前17頁，總共89頁。供注射用原料可見異物檢查頭孢他啶：取本品5份，每份3.0g，加1%碳酸鈉溶液（經(jīng)0.45μm濾膜濾過）溶解，依法檢查（附錄ⅨH），應(yīng)符合規(guī)定。頭孢地嗪鈉：取本品5份，每份2.0g，分別加微粒檢查用水溶解，依法檢查（附錄ⅨH），應(yīng)符合規(guī)定。當(dāng)前18頁，總共89頁。有些品種如堿性藥物與玻璃容器久置起反應(yīng)，產(chǎn)生白點、白塊和玻璃屑有些品種如甲硝唑等與重金屬發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生不溶物有些品種如喹諾酮類藥物對金屬設(shè)備產(chǎn)生腐蝕，易有金屬屑有些品種如胰島素等提取的生化大分子易產(chǎn)生蛋白沉淀有些品種如頭孢噻肟鈉等成鹽不完全，溶解度太低，產(chǎn)生白點、白塊引發(fā)不合格的部分原因當(dāng)前19頁，總共89頁。控制生產(chǎn)環(huán)境和過程中的污染-外源異物考察藥物與容器的兼容性-內(nèi)源異物考察活性成分的穩(wěn)定性以及與溶劑/添加物的穩(wěn)定性-內(nèi)源異物深刻理解“藥品的質(zhì)量源于設(shè)計”認(rèn)真做好處方研究/工藝驗證和穩(wěn)定性考察！可見異物檢查的目的當(dāng)前20頁，總共89頁。供注射用原料不溶性微粒檢查頭孢他啶：取本品3份，加1%碳酸鈉溶液（經(jīng)0.45μm濾膜濾過）溶解制成每1ml中含30mg的溶液，依法檢查（附錄ⅨC），每1g樣品中含10μm以上的微粒不得過6000個，含25μm以上的微粒不得過600個。頭孢曲松鈉：取本品3份，加微粒檢查用水溶解并制成每1ml中含50mg的溶液，依法檢查（附錄ⅨC），每1g樣品中含10μm以上的微粒不得過6000個，含25μm以上的微粒不得過600個。當(dāng)前21頁，總共89頁。供注射用的原料藥增加不溶性微粒檢查以保證制劑能符合注射劑的要求由于光阻法測定結(jié)果僅與一定濃度范圍內(nèi)樣品溶液成正比，故標(biāo)準(zhǔn)給出了不溶性微粒檢查供試品溶液濃度制劑最多有11個規(guī)格，均按每1g樣品中含10μm以上的微粒不得過6000粒，含25μm以上微粒不得過600粒；

強化不溶性微粒等項目控制強化不溶性微粒等項目控制供注射用原料不溶性微粒檢查當(dāng)前22頁，總共89頁。可見異物/不溶性微粒檢查原始記錄問題不詳細(xì)無趨勢缺方法摸索及分析原始記錄建議當(dāng)前23頁，總共89頁。注射劑制劑通則變化重點提示3）供注射用的非水性溶劑，應(yīng)嚴(yán)格限制其用量，并應(yīng)在品種項下進(jìn)行相應(yīng)的檢查。除植物油外，其他還有乙醇、丙二醇和聚乙二醇等2010年版藥典中收載了幾十個非水性溶劑注射劑，僅有幾個在標(biāo)準(zhǔn)中增訂了非水性溶劑的含量測定當(dāng)前24頁，總共89頁。注射劑制劑通則變化重點提示比如：依托咪酯注射液為依托咪酯加1，2-丙二醇制成的滅菌水溶液。標(biāo)準(zhǔn)中增訂“1，2-丙二醇”檢查項，采用GC法測定含量，規(guī)定“每1ml中含1，2-丙二醇應(yīng)為315mg～385mg”。硝酸甘油注射液為硝酸甘油的滅菌無水乙醇溶液。標(biāo)準(zhǔn)中增訂：“乙醇量”檢查項。按一部附錄ⅨM方法測定，規(guī)定“應(yīng)為90.0%～110.0%（ml/ml）”當(dāng)前25頁，總共89頁。增設(shè)有效項目指標(biāo)-甲氧基苯胺值

含不飽和脂肪酸的品種增加甲氧基苯胺值檢查多烯酸乙酯（P272）含有不飽和脂肪酸的藥物在生產(chǎn)和貯藏過程中易被氧化，初級氧化產(chǎn)物一般不穩(wěn)定，又可進(jìn)一步生成醛類等化合物，而甲氧基苯胺值（也稱p-茴香胺值）就是ISO推薦的一種對此類降解產(chǎn)物進(jìn)行評價的手段，歐洲藥典附錄收載了此測定方法。藥物的甲氧基苯胺值越高，說明其劣變程度越嚴(yán)重。測定原理：甲氧基苯胺與醛反應(yīng)生成醇胺，醇胺脫水生成的醛亞胺可采用紫外-可見分光光度法在350nm波長處測定。當(dāng)前26頁，總共89頁。增設(shè)有效項目指標(biāo)-甲氧基苯胺值

注意：甲氧基苯胺試劑為無色結(jié)晶，具有一定毒性，使用時應(yīng)避免接觸皮膚，一旦失誤，需用水沖洗15分鐘以上。甲氧基苯胺的冰醋酸溶液不穩(wěn)定，需當(dāng)天配制使用。以異辛烷作空白做基線校正時，如果測得的甲氧基苯胺冰醋酸溶液的吸光度超過了0.2，則需重新配制試劑。供試品溶液中加入0.25％的4-甲氧基苯胺冰醋酸溶液后應(yīng)注意避光，在350nm波長處的吸光度隨時間的延長緩慢增加，需準(zhǔn)確放置10分鐘后測定，盡量減小誤差。本試驗受水分影響較大，樣品及試劑中水分的存在會導(dǎo)致反應(yīng)不完全，測定值偏低，當(dāng)樣品中水分含量超過0.1%時，可按10g樣品加1～2g無水硫酸鈉的比例脫除水分后測定。另外，應(yīng)取用新開啟包裝的供試品。當(dāng)前27頁，總共89頁。注射劑制劑通則變化重點提示4）配制注射劑時…所用附加劑…使用濃度不得引起毒性或明顯（過度）的刺激。注射劑所用輔料，在標(biāo)簽或說明書中應(yīng)標(biāo)明其名稱，抑菌劑還應(yīng)標(biāo)明濃度；注射用無菌粉末，應(yīng)標(biāo)明注射用溶劑（加有抑菌劑的注射劑，在標(biāo)簽中應(yīng)標(biāo)明所加抑菌劑的名稱與濃度；注射用無菌粉末，應(yīng)標(biāo)明所用溶劑）當(dāng)前28頁，總共89頁。例如：鹽酸林可霉素注射液中添加苯甲醇人類紅血球懸浮液接觸到濃度低于80mM（約為8.6512mg/ml）的苯甲醇時，在37℃，60分鐘內(nèi)極少或不會發(fā)生溶血。當(dāng)苯甲醇濃度高于80mM時，溶血作用則會增加。對于體內(nèi)醇類脫氫酶水平低下者、因基因多態(tài)性而顯性表達(dá)醇類脫氫酶2（ADH2）為3個等位異構(gòu)體——ADH2＊1;ADH2＊2;ADH2＊3者均很容易因血漿中苯甲醇的濃度蓄積增高并使其毒性隨之增加。注射劑中添加物（如防腐劑）的控制當(dāng)前29頁，總共89頁。人類紅血球懸浮液接觸到濃度低于80mM（約為8.6512mg/ml）的苯甲醇時，在37℃，60分鐘內(nèi)極少或不會發(fā)生溶血。當(dāng)苯甲醇濃度高于80mM時，溶血作用則會增加。對于體內(nèi)醇類脫氫酶水平低下等個體很容易因血漿中苯甲醇的濃度蓄積增高并使其毒性隨之增加。注射劑中添加物（如防腐劑）的控制當(dāng)前30頁，總共89頁。體外試驗顯示：凡是含有超過9.45mg/ml苯甲醇的鹽酸林可霉素注射液在加入到2%普通級家兔血紅細(xì)胞混懸液中后，在2.5小時～3小時內(nèi)，至少會引起血紅細(xì)胞變性。4小時后則會出現(xiàn)溶血，尤以含有20mg/ml苯甲醇的鹽酸林可霉素注射液為甚，凡是未加苯甲醇者則均不會出現(xiàn)紅細(xì)胞變性和溶血現(xiàn)象。注射劑中添加物（如防腐劑）的控制當(dāng)前31頁，總共89頁。所有抑菌劑都具有一定的毒性，制劑中抑菌劑的量應(yīng)為最低的有效劑量，且最終包裝容器中的抑菌劑有效濃度應(yīng)低于對人體的有害濃度。中國藥典2010版首次在附錄中收載了“抑菌劑效力檢查法指導(dǎo)原則”，用于測定滅菌、非滅菌制劑中抑菌劑的活性，以評價最終產(chǎn)品的抑菌效力，同時也用于指導(dǎo)生產(chǎn)企業(yè)在制劑研發(fā)階段進(jìn)行抑菌劑的篩選。為保證添加到制劑中的抑菌劑的量在規(guī)定范圍，2010年版藥典一些品種參照USP等國外藥典一般將其含量控制為其處方量的80%～120％。注射劑中添加物（如防腐劑）的控制當(dāng)前32頁，總共89頁。

美國FDA繼1982年發(fā)布了禁止給新生兒使用苯甲醇或應(yīng)調(diào)整配方的警示之后，又于2008年12月在其工業(yè)指南中要求生產(chǎn)廠商必須依照規(guī)定，將苯甲醇等非活性成分按其在處方中作用的顯著性的順序列出并明確標(biāo)示于藥品標(biāo)簽上。2010年版藥典中鹽酸林可霉素注射液（二部P729）增訂苯甲醇檢查項，規(guī)定“每1ml中含苯甲醇不得過9.45mg”。注射劑中添加物（如防腐劑）的控制當(dāng)前33頁，總共89頁。注射劑制劑通則變化重點提示5）容器用膠塞…要有足夠的彈性和穩(wěn)定性，…倒置試驗結(jié)果顯示：多個頭孢類抗生素粉針品種可與丁基膠塞中成分相互作用形成不溶性物質(zhì)比如：注射用頭孢唑啉鈉、注射用頭孢曲松鈉、注射用頭孢拉定溫度越高，溶液渾濁越快，溶液的澄清度超過Ⅱ號就易引起過敏反應(yīng)當(dāng)前34頁，總共89頁。包材釋放物（BHT對頭孢曲松鈉澄清度的影響）

當(dāng)前35頁，總共89頁。包材釋放物－頭孢曲松鈉溶液的澄清度－過敏溶液澄清度不合格樣品中皮膚被動過敏試驗的陽性率(31.6%)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出合格樣品的過敏試驗陽性率(0%)。過敏反應(yīng)主要集中在濁度濃于2號標(biāo)準(zhǔn)比濁液的樣品中，澄清度介于1號和2號標(biāo)準(zhǔn)比濁液之間的樣品均未引起過敏反應(yīng)。因此，溶液的澄清度檢查規(guī)定“不得比1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液更濃”是必要的、合理的、有科學(xué)依據(jù)的。2009年湖北所評價性抽驗結(jié)果當(dāng)前36頁，總共89頁。注射劑制劑通則變化重點提示6）除另有規(guī)定外，容器應(yīng)足夠透明，以便內(nèi)容物的檢視。因為注射劑出廠檢驗可見異物會有漏檢，或某些品種在出廠后還會產(chǎn)生內(nèi)源性可見異物，需要臨用前在自然光下進(jìn)行目視檢查（避免陽光直射），如有異物，不得使用。當(dāng)前37頁，總共89頁。注射劑制劑通則變化重點提示7）必要時應(yīng)增設(shè)相應(yīng)的安全性檢查，如異常毒性、過敏反應(yīng)、溶血與凝聚、降壓物質(zhì)、熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素等因為有些藥物成分復(fù)雜、組分結(jié)構(gòu)不清晰（如多組分抗生素動物來源提取的生化藥等）、采用化學(xué)手段難于監(jiān)控雜質(zhì)異常毒性：有可能污染生物毒性物質(zhì)的品種（發(fā)酵）過敏反應(yīng)：有可能污染異源蛋白或未知過敏反應(yīng)物質(zhì)的品種降壓物質(zhì)：有可能污染組胺、類組胺樣物質(zhì)的品種（腐敗）注射劑安全性檢查當(dāng)前38頁，總共89頁。增設(shè)安全性監(jiān)控項目用化學(xué)手段不能控制組成、雜質(zhì)無法控制的生物來源品種均增加了異常毒性、過敏反應(yīng)等動物試驗：如硫酸魚精蛋白等當(dāng)前39頁，總共89頁。硫酸魚精蛋白

魚精蛋白主要存在于魚類的成熟精巢組織中，與DNA緊密結(jié)合在一起，以核精蛋白的形式存在。它是一種小而簡單的球形堿性蛋白質(zhì)，分子量在1萬以下，由30個左右的氨基酸組成，其中2/3以上是精氨酸，幾乎不含芳香族氨基酸。吸光度參照BP2008/EP6.0增訂。根據(jù)本品組成，如果純化步驟將核酸和雜蛋白均去除的話，在260280nm的波長范圍內(nèi)吸光度應(yīng)很小，但考察結(jié)果遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過BP2008/EP6.0所規(guī)定的0.1。

當(dāng)前40頁，總共89頁。增設(shè)有效項目指標(biāo)加強安全性監(jiān)控

結(jié)合藥品的制法和工藝特點，以及雜質(zhì)的特殊性設(shè)立特色有針對性檢測項目。

人尿制品增加乙肝表面抗原檢查：如尿激酶、尿促性素、絨促性素、烏司他丁等重組品種增加菌體蛋白殘留量、外源性DNA殘留量、生物活性檢測，如重組人生長激素、重組人胰島素等。對含有皂甙的植物提取注射劑等增加溶血與凝聚檢查：如去乙酰毛花苷注射液等。當(dāng)前41頁，總共89頁。按照凡例要求，在標(biāo)準(zhǔn)中增訂【制法要求】來源于人尿或動物組織，采用提取工藝制備的供注射用的原料藥或直接與傷口接觸的制劑應(yīng)在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中增加【制法要求】，重申其生產(chǎn)過程的安全性要求。供其他劑型用原料（如口服制劑）暫未在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中制訂【制法要求】，而由凡例作統(tǒng)一規(guī)范。當(dāng)前42頁，總共89頁。【制法要求】的表述形式

例1：肝素鈉（動物組織提取）本品應(yīng)從檢疫合格的豬或牛腸粘膜中提取，生產(chǎn)過程均應(yīng)符合現(xiàn)行版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求。生產(chǎn)工藝要經(jīng)病毒滅活驗證，并能去除有害的污染物，生產(chǎn)過程中應(yīng)確保不被外來物質(zhì)污染。

例2：尿促性素（人尿提取）本品應(yīng)從健康人群的尿中提取，生產(chǎn)過程應(yīng)符合現(xiàn)行版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求。本品在生產(chǎn)過程中需經(jīng)適宜的工藝方法處理，以使任何病毒如肝炎病毒和人免疫缺陷病毒等滅活。

例3：凝血酶凍干粉（直接與傷口接觸的制劑）本品應(yīng)從檢疫合格的牛或豬血中提取，生產(chǎn)過程應(yīng)符合現(xiàn)行版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求。

當(dāng)前43頁，總共89頁。2-乙基己酸β-內(nèi)酰胺類抗生素對生產(chǎn)工藝過程中使用2-乙基己酸的原料，增加此項檢查，采用氣相色譜法測定；方法增訂為附錄－2010年版藥典二部（附錄ⅦL）；如:頭孢地嗪鈉、頭孢呋辛鈉、頭孢孟多酯鈉、氨芐西林鈉等。當(dāng)前44頁，總共89頁。2-乙基己酸勘誤：β-內(nèi)酰胺類抗生素對生產(chǎn)工藝過程中使用2-乙基己酸的原料，增加此項檢查，采用氣相色譜法測定；方法增訂為附錄－2010年版藥典二部（附錄ⅦL）；如:頭孢地嗪鈉、頭孢呋辛鈉、頭孢孟多酯鈉、氨芐西林鈉等。勘誤：當(dāng)前45頁，總共89頁。高聚物凝膠色譜法（2010年版新增的19個標(biāo)準(zhǔn)）原料制劑頭孢唑肟鈉注射用頭孢唑肟鈉頭孢替唑鈉注射用頭孢替唑鈉頭孢尼西鈉注射用頭孢尼西鈉頭孢噻吩鈉注射用頭孢噻吩鈉磺芐西林鈉注射用磺芐西林鈉阿洛西林鈉注射用阿洛西林鈉美洛西林鈉注射用美洛西林鈉氯唑西林鈉注射用氯唑西林鈉苯唑西林鈉注射用苯唑西林鈉普魯卡因青霉素當(dāng)前46頁，總共89頁。高聚物2010版：品種增加,方法多元化

1、自填柱和商品玻璃柱：填料常用葡聚糖凝膠G-10（SephadexG10）；短柱子的使用，減少分離時間

2、商品凝膠柱TSK-GELG2000SWXL：頭孢地嗪（北京所）

3、ODS柱，聚合物-氨芐西林鈉舒巴坦鈉（浙江所)

4、柱切換（中檢所），實現(xiàn)凝膠色譜與反相色譜的統(tǒng)一當(dāng)前47頁，總共89頁。高聚物

鹽酸頭孢替安聚合物分析方法的比較SephadexG-10系統(tǒng)TSK-GelG2000swxl系統(tǒng)

0.8ml/min當(dāng)前48頁，總共89頁。頭孢羥氨芐高分子雜質(zhì)分析圖譜SephadexG-10系統(tǒng)TSK-GelG2000swxl系統(tǒng)

0.8ml/min1-頭孢羥氨芐；2-高分子雜質(zhì)當(dāng)前49頁，總共89頁。

標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一、規(guī)范、明確、嚴(yán)謹(jǐn)

典型項目-無菌檢查方法無菌檢查是藥物安全性風(fēng)險控制的重要項目之一，但具體檢查方法以前標(biāo)準(zhǔn)中均不給出，由檢驗者自己摸索。抗生素陽性菌選用不注意抗菌譜，存在試驗的有效性、一次成功率等問題對每個品種均要求經(jīng)過驗證，確定樣品使用的最適宜方法（直接接種法？薄膜過濾法），最佳溶解方式、最佳沖洗液、沖洗方式、敏感的陽性對照菌等操作關(guān)鍵因素，并將上述內(nèi)容按統(tǒng)一規(guī)范格式在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中單獨立項表述詳細(xì)。供注射用原料無菌檢查當(dāng)前50頁，總共89頁。供注射用原料無菌檢查頭孢呋辛鈉：取本品3份，加1%碳酸鈉溶液（經(jīng)0.45μm濾膜濾過）溶解制成每1ml中含30mg的溶液，依法檢查（附錄ⅨC），每1g樣品中含10μm以上的微粒不得過6000個，含25μm以上的微粒不得過600個。頭孢曲松鈉：取本品3份，加微粒檢查用水溶解并制成每1ml中含50mg的溶液，依法檢查（附錄ⅨC），每1g樣品中含10μm以上的微粒不得過6000個，含25μm以上的微粒不得過600個。當(dāng)前51頁，總共89頁。無菌檢查方法規(guī)范表述方式舉例氧氟沙星氯化鈉注射液：

無菌取本品，經(jīng)薄膜過濾法處理，用0.1%無菌蛋白胨水溶液分次沖洗（每膜不少于500ml），每管培養(yǎng)基中加入0.1mol/L硫酸錳溶液1ml，以大腸埃希菌為陽性對照菌，依法檢查（附錄ⅪH），應(yīng)符合規(guī)定。乙酰谷酰胺注射液：

無菌取本品，經(jīng)薄膜過濾法處理，用0.1%無菌蛋白胨水溶液分次沖洗（每膜不少于100ml），以金黃色葡萄球菌為陽性對照菌，依法檢查（附錄ⅪH），應(yīng)符合規(guī)定。當(dāng)前52頁，總共89頁。注射劑制劑通則變化重點提示純度要高、雜質(zhì)要少、生物負(fù)荷要低＊從源頭控制雜質(zhì)的數(shù)和量、染菌的數(shù)和量、熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素重點品種為營養(yǎng)性、無抑菌性、制劑有注射劑型注射劑用原料注重數(shù)量口服原料也要限定菌屬種類（沙門氏菌）原料藥微生物限度檢查當(dāng)前53頁，總共89頁。注射劑制劑通則變化重點提示胰島素（制劑為注射劑）取本品0.2g,依法檢查（附錄ⅪJ），每1g中含細(xì)菌數(shù)不得過300個。胰酶（制劑為口服制劑，來源于動物提取）取本品,依法檢查（附錄ⅪJ），每1g供試品中細(xì)菌數(shù)不得過10000個，霉菌和酵母菌總數(shù)不得過100個。并不得檢出大腸埃希菌；每10g供試品中不得檢出沙門菌。原料藥微生物限度檢查當(dāng)前54頁，總共89頁。增設(shè)有效項目指標(biāo)加強安全性監(jiān)控成分復(fù)雜、雜質(zhì)無法控制但質(zhì)量與顏色相關(guān)度高的品種增加溶液的顏色，如糜蛋白酶等。當(dāng)前55頁，總共89頁。溶液顏色檢查的目的

溶液顏色

自身性質(zhì)

純度

雜質(zhì)含量-簡易、直觀、快速、綜合的對有色雜質(zhì)進(jìn)行檢查當(dāng)前56頁，總共89頁。穩(wěn)定性差質(zhì)量與顏色聯(lián)系緊密的安全性要求高用儀器定量測雜質(zhì)困難注射劑用原料僅在紫外區(qū)查雜質(zhì)成分復(fù)雜變質(zhì)就變色檢查顏色的品種適宜進(jìn)行溶液的顏色檢查的原料當(dāng)前57頁，總共89頁。建立方法時要考慮的問題溶劑濃度穩(wěn)定性臨床安全性需要工藝生產(chǎn)能力同類產(chǎn)品水平溶液的顏色當(dāng)前58頁，總共89頁。制訂限度時要考慮的問題主成分純度雜質(zhì)的含量穩(wěn)定性數(shù)據(jù)臨床安全性需要工藝生產(chǎn)能力同類產(chǎn)品水平顏色的限度當(dāng)前59頁，總共89頁。應(yīng)用色差計轉(zhuǎn)換進(jìn)口藥注冊標(biāo)準(zhǔn)

-舉例溶液的顏色取本品0.5g，加水10ml溶解后，溶液應(yīng)無色；如顯色，與同體積的比色液（取棕紅色貯備液1.8ml加8.2ml水，混勻）比較（中國藥典2010年版二部附錄ⅨA第一法），不得更深。當(dāng)前60頁，總共89頁。色差計法應(yīng)用舉例說明：企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)按EP檢查，規(guī)定“與B5號標(biāo)準(zhǔn)比色液（EP第5版溶液的顏色）比較不得更深”。因EP標(biāo)準(zhǔn)比色液從三原色開始就與中國藥典不同，如按此檢查會有困難，故采用色差計進(jìn)行了對比測定，結(jié)果EP的B5號標(biāo)準(zhǔn)比色液的色差值（△E*=3.58）與中國藥典BR3號（△E*=3.19）和BR4號（△E*=4.46）的中值（3.82）較為接近，約相當(dāng)于BR3.5號。因BR3號是取棕紅色貯備液1.5ml加8.5ml水，BR4號是取棕紅色貯備液2.0ml加8.0ml水配制而成，所以本次復(fù)核將棕紅色貯備液1.8ml加8.2ml水配制了專用比色液，該比色液的△E*為3.64，與EP

B5號標(biāo)準(zhǔn)比色液的色差值幾乎一致，按此轉(zhuǎn)換限度既不改變質(zhì)控原有水平，又方便在國內(nèi)檢驗。應(yīng)用色差計轉(zhuǎn)換進(jìn)口藥注冊標(biāo)準(zhǔn)

-舉例當(dāng)前61頁，總共89頁。藥典采用現(xiàn)代分析技術(shù)舉例

由于某些藥物組成的復(fù)雜性，特別是一些生物大分子藥物，使用傳統(tǒng)的分析方法已經(jīng)不能滿足當(dāng)前的質(zhì)控需要，2010年版藥典逐漸改用現(xiàn)代分析技術(shù)。

首次運用毛細(xì)管電泳法注射用抑肽酶：檢查兩個特定雜質(zhì)

注射用鹽酸頭孢吡肟：方法1-毛細(xì)管電泳法

N-甲基吡咯烷方法2-HPLC法（羧基柱，電導(dǎo)檢測）當(dāng)前62頁，總共89頁。毛細(xì)管電泳法檢查特定雜質(zhì)抑肽酶由上海藥檢所起草，參考USP增訂去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶和去丙氨酸抑肽酶檢查項色譜條件：石英毛細(xì)管分離柱，毛細(xì)管溫度：30℃，電極液：磷酸二氫鉀溶液；分離壓：12KV；波長：214nm結(jié)果：去丙氨酸抑肽酶RT為0.99，去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶RT為0.98，兩相關(guān)物間分離度1.40，去丙氨酸-抑肽酶與抑肽酶間分離度1.24、抑肽酶拖尾因子1.8當(dāng)前63頁，總共89頁。抑肽酶SDS凝膠電泳圖

本品系自牛胰或肺中提取、純化制得的肽酶抑制劑。采用SDS凝膠電泳的方法抑肽酶的有關(guān)物質(zhì)，結(jié)果如圖所示，都只有一個條帶。可能是抑肽酶和有關(guān)物質(zhì)的分子量相差不大，使用凝膠電泳不能將其分離當(dāng)前64頁，總共89頁。藥典采用現(xiàn)代分析技術(shù)舉例首次運用柱串聯(lián)技術(shù)-抑肽酶

參照USP32用三根TSK柱串聯(lián)檢查高分子蛋白質(zhì)。采用分子排阻色譜法，用三根色譜柱串聯(lián)（TSK-G4000SWXL柱）柱溫35℃，流速1.0ml/min,二聚體RT0.9，與主峰分離度1.4，主峰拖尾因子0.91。當(dāng)前65頁，總共89頁。藥典采用現(xiàn)代分析技術(shù)舉例柱串聯(lián)技術(shù)適用于溶解度無明顯差異但電荷上有明顯差異的難分離物質(zhì)，通過將一根SCX（陽離子交換）短柱與一根MGⅡC18長柱串聯(lián)就可以簡單達(dá)到將其分離的目的。原理：有電荷差異的被分離物質(zhì)進(jìn)入色譜柱串聯(lián)系統(tǒng)后，帶正電荷的物質(zhì)（通常是堿性物質(zhì)）會由于SCX短柱的離子交換作用而被保留在短柱中，而帶負(fù)電荷的物質(zhì)（通常為酸性物質(zhì)）與中性物質(zhì)則會毫無阻礙的通過短柱進(jìn)入C18長柱中，從而成功分離；然后由于MGⅡC18長柱中疏水性基團(tuán)間的相互作用而對中性物質(zhì)有強保留作用，但對帶負(fù)電荷物質(zhì)無強保留作用，這樣帶負(fù)電荷物質(zhì)與中性物質(zhì)也簡單被分開了如果為了讓峰形更好，各峰間分離更開，還可在陽離子交換短柱與C18長柱前接一根NH2短柱（它可與陰離子發(fā)生交換作用），進(jìn)行三根串聯(lián)，也可以使帶負(fù)電荷的酸性物質(zhì)與中性物質(zhì)達(dá)到更好的分離效果。

當(dāng)前66頁，總共89頁。藥典采用現(xiàn)代分析技術(shù)舉例首次運用肽圖分析技術(shù)：根據(jù)蛋白質(zhì)、多肽的分子量大小以及氨基酸組成特點，使用專一性較強的蛋白水解酶，一般為肽鏈內(nèi)切酶，作用于特殊的肽鏈位點將多肽裂解成小片斷，再通過一定的分離檢測手段形成特征性指紋圖譜，用此法進(jìn)行鑒別，專屬性強，可鑒別僅相差一個氨基酸殘基的不同種屬來源的樣品。如胰島素-采用V8酶解+HPLC法；

重組人生長激素-采用胰蛋白酶酶解+HPLC法獲得肽圖進(jìn)行鑒別等。當(dāng)前67頁，總共89頁。胰島素肽圖人胰島素酶解-HPLC肽圖豬胰島素酶解-HPLC肽圖當(dāng)前68頁，總共89頁。電泳法-等電聚焦水平板電泳法瓊脂糖凝膠電泳法醋酸纖維素薄膜電泳法紙電泳法等點聚焦水平板電泳法聚丙烯酰胺凝膠電泳法SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法當(dāng)前69頁，總共89頁。典型的等電聚焦圖譜重組人生長激素（二部第566頁）用此法做鑒別

當(dāng)前70頁，總共89頁。附錄通用檢測方法中的變化提示澄清度檢查法：增加“幾乎澄清”的定義：0.5號～1號溶液顏色檢查法

恢復(fù)“無色或幾乎無色”的定義

性狀顏色描述與顏色檢查項匹配：原有些液體制劑品種顏色檢查項規(guī)定“與黃色2號標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，不得更深”，但性狀描述為“無色或幾乎無色的澄明液體”，與附錄定義不匹配，現(xiàn)修訂為“無色至微黃色的澄明液體”。本版藥典中極個別品種仍然存在此問題！尼莫地平注射液

當(dāng)前71頁，總共89頁。藥典附錄變化提示

－鈉鹽的鑒別反應(yīng)重金屬檢查法：pH測定法：不溶性微粒檢查法：可見異物檢查法：滲透壓摩爾濃度：

2010年版2005年版鈉鹽（1）取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色。（2）取供試品約100mg，置10ml試管中，加水2ml溶解，加15%碳酸鉀溶液2ml，加熱至沸，應(yīng)不得有沉淀生成；加焦銻酸鉀試液4ml，加熱至沸；置冰水中冷卻，必要時，用玻棒摩擦試管內(nèi)壁，應(yīng)有致密的沉淀生成。（替換使用醋酸氧鈾鋅試液的方法）（1）取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色。（2）取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色沉淀。當(dāng)前72頁，總共89頁。藥典附錄變化提示

－鋅鹽的鑒別反應(yīng)重金屬檢查法：pH測定法：不溶性微粒檢查法：可見異物檢查法：滲透壓摩爾濃度：

2010年版2005年版鋅鹽（1）取供試品溶液，加亞鐵氰化鉀試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在稀鹽酸中不溶解。（2）取供試品溶液，制成中性或堿性溶液，加硫化鈉試液，即產(chǎn)生白色沉淀。（替換使用硫氰酸汞銨試液的檢查方法）（1）取供試品溶液，加亞鐵氰化鉀試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在稀鹽酸中不溶解。（2）取供試品溶液，以稀硫酸酸化，加0.1％硫酸銅溶液1滴及硫氰酸汞銨試液數(shù)滴，即生成紫色沉淀。重新做考察:取樣量,輔料干擾,延伸-環(huán)境友好當(dāng)前73頁，總共89頁。吸收系數(shù)

物理意義為當(dāng)溶液濃度為1%（g/ml）,液層厚度為1cm時的吸光度數(shù)值。研究意義及應(yīng)用趨勢的改變原始記錄問題當(dāng)前74頁，總共89頁。仿制藥品研究的原則主基調(diào)比較研究研發(fā)目標(biāo)≥被仿制藥參考文獻(xiàn)被仿藥的標(biāo)準(zhǔn)《中國藥典》局頒標(biāo)準(zhǔn)（成冊標(biāo)準(zhǔn)、散頁標(biāo)準(zhǔn)）包括進(jìn)口藥注冊標(biāo)準(zhǔn)企業(yè)注冊標(biāo)準(zhǔn)四國藥典當(dāng)前75頁，總共89頁。《已有國家標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品研究技術(shù)指導(dǎo)原則》在選擇參比對照時一般遵循以下原則：如原發(fā)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品已在我國上市，一般首選原發(fā)廠產(chǎn)品作為參比對照；如不能獲得原發(fā)廠產(chǎn)品，可以考慮選用研究基礎(chǔ)較好、臨床應(yīng)用較為廣泛的非原發(fā)廠產(chǎn)品作為參比對照；也可以對不同廠家生產(chǎn)的同品種進(jìn)行質(zhì)量對比，優(yōu)選質(zhì)量較好的產(chǎn)品作為參比對照。

比較研究的標(biāo)尺問題

-被仿制藥品的選擇原則當(dāng)前76頁，總共89頁。原研品認(rèn)可度高首仿品被仿品注意：可比性

-

貯存時間大致相同！包裝條件相同！真實性–

提供發(fā)票、標(biāo)簽、批號或照片

比較研究的標(biāo)尺問題

-被仿制藥品的選擇原則當(dāng)前77頁，總共89頁。

比較研究的標(biāo)尺問題

-購買的對照品/標(biāo)準(zhǔn)品對照品/標(biāo)準(zhǔn)品

權(quán)威性

真實性

準(zhǔn)確性-發(fā)票、標(biāo)簽、批號、分析報告單、鹽基/堿基、水分當(dāng)前78頁，總共89頁。詳細(xì)精制方法、質(zhì)量檢驗報告標(biāo)定方法與結(jié)果

詳細(xì)提取精制方法、質(zhì)量檢驗報告、標(biāo)定方法與結(jié)果詳細(xì)合成精制方法、質(zhì)量檢驗報告、標(biāo)定方法與結(jié)果

純化精制提取精制

合成精制

比較研究的標(biāo)尺問題

-非購買的對照品/標(biāo)準(zhǔn)品當(dāng)前79頁，總共89頁。標(biāo)定者測定結(jié)果（%）n均值（%）RSD（%）

1.98.82%，99.12%，99.18%，99.25%，99.17%599.11%

0.17%2.98.96%，99.04%，99.24%，9