微生物檢驗細菌耐藥性監測

細菌感染性疾病一直嚴重威脅著人類的生存。

19世紀末，Ehrlich試圖尋找一種“神奇的子彈”，可以殺死侵入人體內的病原菌而不傷害人體組織。1928年，Fleming很偶然地發現了青霉素。霉菌抑菌圈金黃色葡萄球菌青霉素

1941年，青霉素正式用于臨床，細菌感染性疾病的治療從此進入抗生素時代。它使人類的平均壽命延長了15年以上

但是，隨著青霉素的廣泛應用，發現了耐藥菌的產生。1941年用2萬單位青霉素能夠控制的感染逐步上升到用20萬、100萬甚至更高（2000萬）的單位才能控制，人們第一次把細菌耐藥性的問題提到重要的日程。

進入20世紀80年代，越來越多的細菌產生耐藥性，甚至多重耐藥性，變得愈加難以對付。

細菌耐藥性是21世紀全球關注的熱點，它對人類生命健康所構成的威脅絕不亞于艾滋病、癌癥和心血管疾病。細菌抗藥性的產生：根據對病原菌的作用靶位,將抗生素的作用機制分為四類。1.抑制細菌細胞壁合成（破壁亡身）2.影響胞漿膜通透性(多粘菌素)（透膜致漏）3.抑制蛋白質合成（蛋盡糧絕）4.抑制核酸代謝：葉酸代謝;核酸合成(絕子絕孫)抗菌藥物的作用機制

細菌的耐藥機制一、細菌耐藥性的概念細菌耐藥性（drugresistance）亦稱抗藥性，是指細菌對某種抗菌藥物（抗生素或消毒劑）的相對抵抗性。耐藥性的程度用某藥物對細菌的最小抑菌濃度（MIC）表示。

遺傳學上把細菌耐藥性分為固有耐藥性和獲得耐藥性。(一)固有耐藥性（intrinsicresistance）

固有耐藥性指細菌對某些抗菌藥物的天然不敏感。其耐藥基因來自親代，由細菌染色體基因決定而代代相傳的耐藥性，存在于其染色體上,具有種屬特異性。二、細菌耐藥性的遺傳機制

獲得耐藥性指細菌DNA的改變導致其獲得耐藥性表型。耐藥性細菌的耐藥基因來源于基因突變或獲得新基因,作用方式為接合、轉導或轉化?？砂l生于染色體DNA、質粒、轉座子等結構基因,

也可發生于某些調節基因。

在原先對藥物敏感的細菌群體中出現了對抗菌藥物的耐藥性，這是獲得耐藥性與固有耐藥性的重要區別。（二）獲得耐藥性（acquiredresistance）

1.獲得耐藥性概念三、細菌耐藥性的生化機制鈍化酶的產生藥物作用靶位的改變抗菌藥物的滲透障礙主動外排機制細菌自身代謝狀態改變等

鈍化酶（modifiedenzyme）是耐藥菌株產生的、具有破壞或滅活抗菌藥物活性的某種酶，它通過水解或修飾作用破壞抗生素的結構使其失去活性，如分解青霉素的酶或改變氨基糖苷類抗生素結構的酶。（一）鈍化酶的產生重要的鈍化酶種類有：①-內酰胺酶：

特異性水解打開藥物分子結構中的β-內酰胺環，使其完全失去抗菌活性,又稱滅活酶(inactivatedenzyme)，由染色體和質粒介導。分青霉素型水解青霉素類；頭孢菌素型水解頭孢類和青霉素類。

在G－桿菌中有兩種：超廣譜β-內酰胺酶ESBL）和AmpCβ-內酰胺酶

②氨基糖苷類鈍化酶：

由質粒介導，其機制是通過羥基磷酸化、氨基乙?；螋然佘挣；饔茫瑢⑾鄳幕瘜W基團結合到藥物分子上，使藥物的分子結構發生改變，失去抗菌作用。

③氯霉素乙酰轉移酶：

由質粒編碼產生該酶，使氯霉素乙酰化而失去抗菌活性（二）藥物作用靶位的結構和數量改變

——抗菌藥不易與細菌結合

導致與抗生素結合的有效部位發生變異，影響藥物的結合，對抗生素不再敏感，這種改變使抗生素失去作用位點和親和力降低，但細菌的生理功能卻正常。如青霉素結合蛋白改變導致對β-內酰胺類抗生素親和力極低導致耐藥。

細菌細胞壁的障礙和/或外膜通透性的改變將嚴重影響抗生素進入細菌內部到達作用靶位發揮抗菌效能，耐藥屏蔽也是耐藥的一種機制。

（三）抗菌藥物的滲透障礙

-藥物不易進入菌體內

如細菌生物被膜是細菌為適應環境而形成的，可保護細菌逃逸抗菌藥物的殺傷作用。又如細胞膜上微孔缺失時，亞胺培南不能進入胞內而失去抗菌作用。銅綠假單胞菌對抗生素的通透性比其他G－菌差是該菌對多種抗生素固有耐藥的主要原因之一。

（三）抗菌藥物的滲透障礙

-藥物不易進入菌體內

（四）主動外排機制—藥物被泵出菌體外

已發現數十種細菌外膜上有特殊的藥物主動外排系統,藥物主動外排使菌體內抗菌藥濃度下降，難以發揮抗菌作用導致耐藥，主動外排耐藥機制與細菌的多重耐藥性有關。主動外排系統示意圖(五)其他

1.改變代謝途徑

細菌可通過改變代謝途徑逃避抗菌藥物作用，如呈休眠狀態的細菌或細菌營養缺陷菌均可出現對多種抗生素耐藥。耐磺胺藥的細菌自身產生PABA或直接利用葉酸轉化為二氫葉酸。2.產生拮抗劑

細菌也可以通過增加生產代謝拮抗劑來抑制抗生素，從而獲得耐藥性。耐藥金黃色葡萄球菌通過增加對氨基苯甲酸產量，從而耐受磺胺類藥物的作用。四、細菌耐藥性的防治原則1.合理使用抗菌藥物①制定抗生素用藥常規，教育醫務工作者和病人規范化用藥,供臨床選用抗菌藥物參考。②嚴格根據適應證選用藥物③病人用藥前應盡可能進行病原學檢測,并進行藥敏試驗,作為調整用藥的參考。四、細菌耐藥性的防治原則④按藥物的藥動學特性，制定合理的用藥方案。⑤用藥療程應盡量縮短，一種抗菌藥物可以控制的感染則不任意采用多種藥物聯合。⑥嚴格掌握抗菌藥物的局部應用、預防應用和聯合用藥，避免濫用。2.嚴格執行消毒隔離制度

對耐藥菌感染的患者應予隔離，防止耐藥菌的交叉感染.醫務員應定期檢查帶菌情況，以免傳播醫院內感染。四、細菌耐藥性的防治原則

①加強細菌耐藥性的檢測，建立細菌耐藥監測網，掌握本地區、本單位重要致病菌和抗菌藥物的耐藥性變遷資料，及時提為臨床供信息。

②必須規定抗菌藥物憑處方供應。3.加強藥政管理

③農牧業應盡量避免供臨床應用的抗菌藥物作為動物生長促進劑或用于牲畜的治療，以避免對醫用抗菌藥物產生耐藥性。

④細菌耐藥性一旦產生后，在停用有關藥物一段時期后敏感性有可能逐步恢復。3.加強藥政管理

根據細菌耐藥性的機制及其與抗菌藥物結構的關系，改造化學結構，使其具有耐