標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 36780-2018 辣椒輕斑駁病毒檢疫鑒定方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，主要針對(duì)辣椒輕斑駁病毒（PepMoV）的檢測(cè)與鑒定提供了具體的方法指導(dǎo)。該標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出境植物及其產(chǎn)品的檢驗(yàn)檢疫以及國(guó)內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域?qū)苯份p斑駁病毒進(jìn)行監(jiān)測(cè)和防控時(shí)使用。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容，首先明確了術(shù)語(yǔ)定義，包括但不限于“辣椒輕斑駁病毒”、“RT-PCR”等關(guān)鍵概念。接著詳細(xì)介紹了樣品采集、保存及運(yùn)輸?shù)囊螅瑥?qiáng)調(diào)了正確處理樣本對(duì)于保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性的重要性。

在檢測(cè)技術(shù)方面，《GB/T 36780-2018》推薦采用RT-PCR法作為主要鑒定手段，并給出了詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)流程，從RNA提取到逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)直至最終的PCR擴(kuò)增條件設(shè)置都有明確說(shuō)明。此外，還提到了如何通過凝膠電泳分析結(jié)果來(lái)判斷是否存在目標(biāo)病毒DNA片段。

為了確保檢測(cè)結(jié)果可靠，《GB/T 36780-2018》還規(guī)定了一系列質(zhì)量控制措施，如設(shè)立陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照等步驟，以驗(yàn)證整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程的有效性。同時(shí)，也對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境提出了要求，比如保持清潔無(wú)污染狀態(tài)，避免交叉感染等問題發(fā)生。

最后，該標(biāo)準(zhǔn)還列舉了一些可能影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素，并給出了解決方案或建議措施，幫助使用者更好地理解和應(yīng)用此標(biāo)準(zhǔn)于實(shí)際工作中。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2018-09-17 頒布
  • 2019-04-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T36780—2018

辣椒輕斑駁病毒檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofPeppermildmottlevirus

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T36780—2018

目次

前言

…………………………Ⅰ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

病毒基本信息

3……………1

原理

4………………………1

儀器用具及試劑

5、…………………………1

儀器

5.1…………………1

用具

5.2…………………2

試劑

5.3…………………2

取樣

6………………………2

種子取樣

6.1……………2

生長(zhǎng)期植株取樣

6.2……………………2

檢測(cè)鑒定

7…………………3

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定

7.1……………………3

斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定

7.2……………3

膠體金免疫層析測(cè)定

7.3………………3

檢測(cè)

7.4RT-PCR………………………3

實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)

7.5RT-PCR……………3

接種反應(yīng)

7.6……………3

結(jié)果判定

8…………………3

樣品保存與結(jié)果記錄

9……………………3

樣品保存

9.1……………3

結(jié)果記錄

9.2……………3

附錄資料性附錄辣椒輕斑駁病毒其他信息

A()………4

附錄規(guī)范性附錄雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定

B()…………………6

附錄規(guī)范性附錄斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定

C()…………9

附錄規(guī)范性附錄膠體金免疫層析測(cè)定

D()……………11

附錄規(guī)范性附錄檢測(cè)

E()RT-PCR……………………13

附錄規(guī)范性附錄實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)

F()RT-PCR…………15

附錄資料性附錄種子感染水平和取樣量

G()…………16

附錄資料性附錄接種反應(yīng)

H()…………17

參考文獻(xiàn)

……………………19

GB/T36780—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任

。。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國(guó)天津出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共

:、、

和國(guó)甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人魏梅生郭京澤朱水芳孔君李桂芬趙文軍王軍平文朝慧尤佳

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T36780—2018

辣椒輕斑駁病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了辣椒輕斑駁病毒Peermildmottlevirus的檢疫鑒定方法

(pp)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于寄主植株和未處理種子上辣椒輕斑駁病毒的檢測(cè)

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3病毒基本信息

學(xué)名Peermildmottlevirus

:pp

縮寫

:PMMoV

中文名辣椒輕斑駁病毒

:

異名煙草花葉病毒潛隱株系煙草花葉病毒潛隱株系

:;Samsun

分類地位植物桿狀病毒科Viraviridae煙草花葉病毒屬Tobamovirus

:(g),()

的其他信息參見附錄

PMMoVA。

4原理

的蛋白和基因組特征是該病毒檢測(cè)鑒定的依據(jù)采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定

PMMoV。

斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定膠體金免疫層析測(cè)定實(shí)時(shí)熒光

(DAS-ELISA)、(Dot-ELISA)、、RT-PCR、

等方法來(lái)特異性檢測(cè)該病毒并判斷樣品是否帶有

RT-PCR

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