標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 35939-2018 腦心肌炎病毒間接ELISA抗體檢測(cè)方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，主要規(guī)定了使用間接酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（簡(jiǎn)稱(chēng)間接ELISA）來(lái)檢測(cè)腦心肌炎病毒抗體的具體步驟和技術(shù)要求。該標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物血清或血漿樣本中腦心肌炎病毒特異性抗體的定性和定量分析。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)，首先需要準(zhǔn)備相應(yīng)的試劑和材料，包括但不限于包被有腦心肌炎病毒抗原的微孔板、稀釋緩沖液、陽(yáng)性對(duì)照品、陰性對(duì)照品以及洗滌液等。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，以確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

具體流程大致如下：

  1. 將待測(cè)樣品按照一定比例稀釋后加入到已預(yù)先包被好相應(yīng)抗原的微孔板中。
  2. 經(jīng)過(guò)一段時(shí)間孵育后，用洗滌液徹底清洗掉未結(jié)合物質(zhì)。
  3. 加入酶標(biāo)記的二抗，并再次經(jīng)過(guò)適當(dāng)時(shí)間的孵育與清洗過(guò)程。
  4. 最后加入底物溶液，在特定條件下反應(yīng)生成可測(cè)量的顏色變化。
  5. 使用酶標(biāo)儀讀取各孔吸光度值，并通過(guò)比較樣本與對(duì)照組之間的差異來(lái)判斷是否存在目標(biāo)抗體及其濃度水平。

在整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中，需要注意控制好實(shí)驗(yàn)條件如溫度、pH值等因素對(duì)結(jié)果的影響，并且要保證每一步驟都按照規(guī)范執(zhí)行。此外，對(duì)于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理也應(yīng)當(dāng)遵循科學(xué)合理的原則，確保最終得出結(jié)論的有效性和準(zhǔn)確性。


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....

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  • 2018-02-06 頒布
  • 2018-09-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS11220

B41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T35939—2018

腦心肌炎病毒間接ELISA抗體檢測(cè)方法

Indirectenzymelinkedimmunosorbentassayfordetectingthe

antibodyagainstencephalomyocarditisvirus

2018-02-06發(fā)布2018-09-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T35939—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位南京農(nóng)業(yè)大學(xué)中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)起草人白娟王巖姜平蔣康富

:、、、。

Ⅰ

GB/T35939—2018

腦心肌炎病毒間接ELISA抗體檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了腦心肌炎病毒間接抗體的檢測(cè)方法

ELISA。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬腦心肌炎病毒抗體的檢測(cè)豬腦心肌炎血清流行病學(xué)調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室診斷

、。

注腦心肌炎疫病簡(jiǎn)介參見(jiàn)附錄

:A。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB19489

獸醫(yī)診斷樣品采集保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范

NY/T541、

檢驗(yàn)檢疫動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全要求細(xì)則

SN/T2984

3縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

牛血清白蛋白

BSA:(Bovineserumalbumin)

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

ELISA:(Enzyme-linkedimmunosorbentassay)

腦心肌炎病毒

EMCV:(Encephalomyocarditisvirus)

辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的葡萄球菌蛋白

HRP-SPA:A(Horseradishperoxidaselabeledstaphylococcal

proteinA)

四甲基聯(lián)苯胺

TMB:(Tetramethylbenzidine)

病毒結(jié)構(gòu)蛋白

VP1:1(Viralprotein1)

4儀器材料與試劑

、

41試驗(yàn)儀器

.

411酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀

..。

412高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)

..。

413微量移液器

..:

規(guī)格

0.5μL~10μL、20μL~200μL、100μL~1000μL。

414道可調(diào)微量移液器

..12:

規(guī)格

10μL~100μL。

42試驗(yàn)材料

.

421

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